Yazarlar malzemenin kendi tür katkılarından dolayı Alessandra Moretti ve Dennis Schade minnettarız. Biz Deneysel Farmakoloji ve Uke ait Toksikoloji Bölümü iPS ve EHT çalışma grubunun büyük destek kabul eder. yazarların çalışmaları DZHK (Kardiyovasküler Araştırma Alman Merkez) ve Milli Eğitim Alman Bakanlığı ve Araştırma (BMBF), Alman Araştırma Vakfı (DFG Es 88 / 12-1, HA 3423 / 5-1 hibe ile desteklenmektedir ), İngiliz Ulusal Merkez Değiştirme Sadeleştirme &amp; Research Hayvanların Azaltma (NC3Rs çATLAK-IT 35911-259146 hibe), İngiliz Kalp Vakfı RM / 13/30157 için, Avrupa Araştırma Kurumu (İleri Grant IndivuHeart), Alman Kalp Vakfı ve Freie und Hansestadt Hamburg.

<ol>
	<li>Laverty, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+we+improve+our+understanding+of+cardiovascular+safety+liabilities+to+develop+safer+medicines?.">How can we improve our understanding of cardiovascular safety liabilities to develop safer medicines?.</a> Br J Pharmacol. 163 (4), 675-693 (2011).</li><li>Takahashi, K., Yamanaka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+mouse+embryonic+and+adult+fibroblast+cultures+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.</a> Cell. 126, 663-676 (2006).</li><li>Burridge, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+defined+generation+of+human+cardiomyocytes.">Chemically defined generation of human cardiomyocytes.</a> Nat Methods. 11 (8), 855-860 (2014).</li><li>Kempf, H., Kropp, C., Olmer, R., Martin, U., Zweigerdt, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells+in+scalable+suspension+culture.">Cardiac differentiation of human pluripotent stem cells in scalable suspension culture.</a> Nat Protoc. 10 (9), 1345-1361 (2015).</li><li>Yang, X., Pabon, L., Murry, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+adolescence:+maturation+of+human+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes.">Engineering adolescence: maturation of human pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes.</a> Circ Res. 114 (3), 511-523 (2014).</li><li>Mannhardt, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Engineered+Heart+Tissue:+Analysis+of+Contractile+Force.">Human Engineered Heart Tissue: Analysis of Contractile Force.</a> Stem Cell Reports. 7 (1), 29-42 (2016).</li><li>Eder, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+proarrhythmic+drugs+on+relaxation+time+and+beating+pattern+in+rat+engineered+heart+tissue.">Effects of proarrhythmic drugs on relaxation time and beating pattern in rat engineered heart tissue.</a> Bas Res Cardiol. 109 (6), 436 (2014).</li><li>St&#246;hr, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+abnormalities+and+altered+drug+response+in+engineered+heart+tissue+from+Mybpc3-targeted+knock-in+mice.">Contractile abnormalities and altered drug response in engineered heart tissue from Mybpc3-targeted knock-in mice.</a> J Mol Cell Cardiol. 63, 189-198 (2013).</li><li>Schaaf, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Engineered+Heart+Tissue+as+a+Versatile+Tool+in+Basic+Research+and+Preclinical+Toxicology.">Human Engineered Heart Tissue as a Versatile Tool in Basic Research and Preclinical Toxicology.</a> PLoS One. 6 (10), e26397 (2011).</li><li>Hansen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+drug+screening+platform+based+on+engineered+heart+tissue.">Development of a drug screening platform based on engineered heart tissue.</a> Circ Res. 107 (1), 35-44 (2010).</li><li>Frank, S., Zhang, M., Sch&#246;ler, H. R., Greber, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+molecule-assisted,+line-independent+maintenance+of+human+pluripotent+stem+cells+in+defined+conditions.">Small molecule-assisted, line-independent maintenance of human pluripotent stem cells in defined conditions.</a> PloS One. 7 (7), e41958 (2012).</li><li>Lanier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+inhibition+correlates+with+human+embryonic+stem+cell+cardiomyogenesis:+A+structure-activity+relationship+study+based+on+inhibitors+for+the+Wnt+response.">Wnt inhibition correlates with human embryonic stem cell cardiomyogenesis: A structure-activity relationship study based on inhibitors for the Wnt response.</a> J Med Chem. 55 (2), 697-708 (2012).</li><li>Hirt, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+afterload+induces+pathological+cardiac+hypertrophy:+a+new+in+vitro+model.">Increased afterload induces pathological cardiac hypertrophy: a new in vitro model.</a> Bas Res Cardiol. 107 (6), 307-323 (2012).</li><li>Jacob, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+Tyrosine+Kinase+Inhibitor-Mediated+Decline+in+Contractile+Force+in+Rat+Engineered+Heart+Tissue.">Analysis of Tyrosine Kinase Inhibitor-Mediated Decline in Contractile Force in Rat Engineered Heart Tissue.</a> PLoS One. 11 (2), e0145937 (2016).</li><li>Friedrich, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+FHL1+as+a+novel+disease+gene+for+isolated+hypertrophic+cardiomyopathy.">Evidence for FHL1 as a novel disease gene for isolated hypertrophic cardiomyopathy.</a> Hum Mol Genet. 21 (14), 3237-3254 (2012).</li><li>Crocini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+ANKRD1+mutations+associated+with+hypertrophic+cardiomyopathy+on+contraction+parameters+of+engineered+heart+tissue.">Impact of ANKRD1 mutations associated with hypertrophic cardiomyopathy on contraction parameters of engineered heart tissue.</a> Bas Res Cardiol. 108 (3), 349 (2013).</li><li>Fiedler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+Long+Noncoding+RNA-Based+Strategies+to+Modulate+Tissue+Vascularization.">Development of Long Noncoding RNA-Based Strategies to Modulate Tissue Vascularization.</a> J Am Coll Cardiol. 66 (18), 2005-2015 (2015).</li><li>van Meer, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+molecule+absorption+by+PDMS+in+the+context+of+drug+response+bioassays.">Small molecule absorption by PDMS in the context of drug response bioassays.</a> Biochem Biophysl Res Commun. , (2016).</li><li>Godier-Furn&#233;mont, A. F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiologic+force-frequency+response+in+engineered+heart+muscle+by+electromechanical+stimulation.">Physiologic force-frequency response in engineered heart muscle by electromechanical stimulation.</a> Biomaterials. 60, 82-91 (2015).</li><li>Eng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomous+beating+rate+adaptation+in+human+stem+cell-derived+cardiomyocytes.">Autonomous beating rate adaptation in human stem cell-derived cardiomyocytes.</a> Nat Commun. 7, 10312 (2016).</li><li>Huebsch, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+iPS-Cell-Derived+Cardiac+Muscles+for+Physiologically+Relevant+Drug+Response+Analyses.">Miniaturized iPS-Cell-Derived Cardiac Muscles for Physiologically Relevant Drug Response Analyses.</a> Sci Rep. 6 (24726), 1-12 (2016).</li><li>Masumoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myocardial+regenerative+potential+of+three-dimensional+engineered+cardiac+tissues+composed+of+multiple+human+iPS+cell-derived+cardiovascular+cell+lineages.">The myocardial regenerative potential of three-dimensional engineered cardiac tissues composed of multiple human iPS cell-derived cardiovascular cell lineages.</a> Sci Rep. 6 (29933), 1-10 (2016).</li><li>Ravenscroft, S. M., Pointon, A., Williams, A. W., Cross, M. J., Sidaway, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+Non-myocyte+Cells+Show+Enhanced+Pharmacological+Function+Suggestive+of+Contractile+Maturity+in+Stem+Cell+Derived+Cardiomyocyte+Microtissues.">Cardiac Non-myocyte Cells Show Enhanced Pharmacological Function Suggestive of Contractile Maturity in Stem Cell Derived Cardiomyocyte Microtissues.</a> Toxicol Sci. 152 (1), 99-112 (2016).</li><li>Zhang, J. H., Chung, T. D. Y., Oldenbutg, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Statistical+Parameter+for+Use+in+Evaluation+and+Validation+of+High+Throughput+Screening+Assays.">A Simple Statistical Parameter for Use in Evaluation and Validation of High Throughput Screening Assays.</a> J Biomol Screen. 4 (2), 67-73 (1999).</li><li>Vandenburgh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Durg-screening+platform+based+on+the+contractility+of+tissue-engineered+muscle.">Durg-screening platform based on the contractility of tissue-engineered muscle.</a> Muscle Nerve. 37 (4), 438-447 (2008).</li></ol>

IM, TE ve AH EHT Technologies GmbH, Almanya&#39;nın ortak kurucuları oldular.

Tasarlanmış kalp dokusu kardiyovasküler araştırma aracı kutusuna değerli bir seçenek sunuyor. 24-kuyu formatında EHTs hastalık modelleme 8, 14, ilaç güvenliği taraması 7, 8, 10, 11, 15, ya da temel kardiyovasküler araştırma 16, 17</...

Böyle ilaca bağlı uzun QT sendromu gibi kardiyak yan etkiler son yıllarda pazar çekme yol açmıştır. İstatistikler her çekme yaklaşık% 45&#39;i kardiyovasküler sistem 1 istenmeyen etkileri nedeniyle olduğunu göstermektedir. Pahalı gelişimsel süreç ve onayından sonra bu ilaç yetmezliği ilaç firmaları için en kötü durum senaryosu. Araştırma ve geliştirme departmanları bu nedenle erken dönemlerinde bu istenmeyen kardiyovasküler etkilerin tespiti odaklanır. Ekonomik ve etik kaygılar, hayvan deneyleri azaltmak ve yeni in vitro tarama deneyleri ile bunların yerine çabaları için devam etmektedir. Yerleşik tahlilleri kümesi Birleşik Devletleri Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) ve Avrupa İlaç Ajansı (EMA) proaritmik ilaç etkileri 2 preklinik değerlendirilmesi için kılavuzlar dahil edilir. farklılaşması, ardından somatik hücrelerin yeniden programlama teknolojisiİnsan uyarılmış pluripotent kök hücreler (hiPSC) Bu araştırma alanı 3 artırdı. Şimdi in vitro insan kardiyomiyositlerindeki yeni ilaç adayları elemek mümkün kılmakta ve türler arası farklılıkları ile ilgili sorunları önler. Son kardiyak farklılaşma protokolleri 4, 5 etik kaygı olmadan kardiyomiyositlerinin sınırsız kaynağı sağlamak. Bununla birlikte, en önemli ve en iyi kardiyomiyositlerin in vivo parametre özelliği kasılma kuvveti ölçümü, iyi kurulmuş değildir. Bu yetişkin kardiyomiyosit kıyasla insan uyarılmış bir pluripotent kök hücre türevli kardiyomiyositlerde (hiPSC-CM) olgunlaşmamış 6 ile ilgilidir. Olası bir ilerletme tek hücreler 7 (mühendisliği kalp dokusu, EHT) 3-boyutlu kalp dokusu mühendislik etmektir. EHT protokolü, tek sıçanlara ait ve insan kardiyomiyositlerde 8 gömme dayanır </sup&gt;, iki esnek polidimetilsiloksan (PDMS), mesaj 24 oyuklu bir formatta 11 arasında, fibrin hidrojel 9, 10. Birkaç gün içinde kardiyomyositler tek hücreleri olarak kendiliğinden sözleşme başlar ve hücresel ağlar oluşturmaya başlar. 7-10 gün sonra, bütün doku makroskopik kasılmaları görebilir. Bu işlem sırasında, hücre dışı matris çap ve uzunluk bir azalmaya yol açar, tekrar oluşturulur. PDMS eğilme EHT sonucu kısa sürede sürekli yük gelişmekte EHT kardiyomi tutulması, dinlenme sırasında bile sonrası. EHTs birkaç hafta içinde auxotonic kas kasılmaları gerçekleştirmeye devam ediyor. İnsan EHTs ilaç tarama ve hastalık 7 modellemek için uygunluklarını göstermektedir fizyolojik ve farmakolojik uyarılması sırasında olan tepkileri gösterir. Bu yazıda Generati için sağlam ve kolay protokol mevcutİnsan EHT ve hERG kanalı inhibitörleri varlığında daralma desenin, konsantrasyona bağımlı değişikliklerin otomatik kontraktilite analizi ile.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>EHT analysis intrument</td>
			<td>EHT Technologies GmbH</td>
			<td>A0001</td>
			<td>Software is included</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EHT PDMS rack</td>
			<td>EHT Technologies GmbH</td>
			<td>C0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EHT PTFE spacer</td>
			<td>EHT Technologies GmbH</td>
			<td>C0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EHT electrode</td>
			<td>EHT Technologies GmbH</td>
			<td>P0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EHT pacing adapter/cable</td>
			<td>EHT Technologies GmbH</td>
			<td>P0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well-plate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well-cell culture plate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>140675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml falcon tube, graduated&#160;</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62,554,502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell scraper</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>831,830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinner flask</td>
			<td>Integra</td>
			<td>182 101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stirrer Variomag/ Cimarec Biosystem Direct&#160;</td>
			<td>Thermo scientific</td>
			<td>70101</td>
			<td>Adjust rotor speed to 40 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T175 cell culture flask&#160;</td>
			<td>Sarstedt&#160;</td>
			<td>831,812,002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V-shaped sedimentation rack&#160;</td>
			<td>Custom made at UKE Hamburg</td>
			<td>na</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10&#215; DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>52100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-Thioglycerol&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M6145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Phospho-L-ascorbic acid trisodium salt</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>49752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Activin-A&#160;</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>338-AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15510-019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aprotinin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A1153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqua ad injectabilia</td>
			<td>Baxter GmbH</td>
			<td>1428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 PLUS insulin&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BMP-4</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>314-BP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase II&#160;</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS004176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>F0415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase II, type V (from bovine spleen)</td>
			<td>Sigma&#160;</td>
			<td>D8764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dorsomorphin&#160;</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab120843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA&#160;</td>
			<td>Roth</td>
			<td>8043.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal calf serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10437028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF2</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-104-921</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen (bovine)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F8630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geltrex&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A1413302</td>
			<td>For coating: 1:200 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS w/o Ca2+/Mg2+&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14175-053</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES&#160;</td>
			<td>Roth</td>
			<td>9105.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>26050088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin&#160;</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>05-720-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin, human</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I9278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipidmix&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L5146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>354234</td>
			<td>For EHT reconsitutionmix.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Benzyl-p-Toluenesulfonamide</td>
			<td>TCI</td>
			<td>B3082-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS w/o MgCl2/CaCl2</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>14190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P2443</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinyl alcohol&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium selenite</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF&#223;1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transferrin&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Biorbyt</td>
			<td>orb6014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hiPSC</td>
			<td>Custom made at UKE hamburg</td>
			<td>na</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iCell cardiomyocytes kit</td>
			<td>Cellular Dynamics International</td>
			<td>CMC-100-010-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluricyte cardiomyocyte kit</td>
			<td>Pluriomics</td>
			<td>PCK-1.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cor.4U - HiPSC cardiomyocytes kit</td>
			<td>Axiogenesis AG</td>
			<td>Ax-C-HC02-FR3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellartis cardiomyocytes</td>
			<td>Takara Bio USA, Inc.</td>
			<td>Y10075</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated contraction analysis of human engineered heart tissue for cardiac drug safety screening

Kardiyak doku mühendisliği üç boyutlu güç üreten işlenmiş dokular oluşturacak teknikleri tarif etmektedir. temel araştırmalar ve klinik öncesi ilaç geliştirilmesinde bu prosedürlerin uygulanması için, standart koşullar altında otomatik üretimi ve analiz için protokoller geliştirmek önemlidir. Burada, farklı türlerin (fare, sıçan, insan) kardiyomiyositlerden projelendirilmiş kalp dokusu (EHT) üretmek için bir yöntem sunulmaktadır. teknik 24 oyuklu bir formatta elastik polidimetilsiloksan (PDMS), destekler arasındaki ayrışmış kardiyomiyositlerde içeren bir fibrin jel montajı dayanır. Üç boyutlu, kuvvet üreten EHTs dökümden sonra iki hafta içinde oluşturmaktadır. Bu işlem, haftada birkaç yüz EHTs üretilmesine imkan tanır ve teknik olarak kardiyomiyositlerin mevcudiyeti ile kısıtlanır (0.4-1.0 x 10 6 / EHT). auxotonic kas kasılmaları Değerlendirilmesi mechan ile değiştirilmiş bir inkübasyon odası içinde gerçekleştirilirik 24 oyuklu plakalar için kilitleme ve bu haznenin üzerine yerleştirilen bir kamera. Bir yazılım kamera her EHT bir XYZ eksen sistemine taşındı kontrol eder. EHT kasılmalar otomatik bir şekil tanıma algoritması ile tespit edilir, ve bir güç PDMS mesajların EHT kısalması ve elastik eğilimi ve geometrisine göre hesaplanır. Bu prosedür standardize ve steril koşullar altında EHT yüksek sayıda otomatik analizi için izin verir. Kardiyomiyosit kasılması üzerindeki ilaç etkileri güvenilir algılama kardiyak ilaç geliştirme ve emniyet farmakoloji açısından çok önemlidir. İnsan EHT sistemi kardiyak ilaç güvenliği taraması için gelecek vaat eden bir araç olarak gösteren, insan kalbin kasılma kinetiği üzerindeki ilaç yanıtları çoğaltır, hERG kanalı inhibitörü E-4031 örneği ile, gösterir.

Kardiyak Farklılaşma ve EHT Hazırlanması HiPSC indirgenmiş gelişme faktörü taban membran matrisi genişletilmiş EDTA ve gece boyunca döndürme şişeleri oluşturulmuş embriyoit organları (EBS) ile ayrıştırılmıştır. Üç gün mezodermal indüksiyonundan sonra, kalp farklılaşma, Wnt inhibitörü ile başlatılmıştır. Farklılaşma protokolünün ~ 17 gün sonra, dayak EBS kollajenaz tip II (Şekil 1...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Contraction Analysis of Human Engineered Heart Tissue for Cardiac Drug Safety Screening at JoVE.com

Automated Contraction Analysis of Human Engineered Heart Tissue for Cardiac Drug Safety Screening

uyarılmış pluripotent kök hücreler (hiPSC) kardiyomiyositlerini -türevlenmiş dan Burada, insan mühendisliği kalp dokusu üretimini göstermektedir. Biz hERG kanalı inhibitörü e-4031 ile büzülme kuvveti ve kasılma biçimi örnek değişiklik analiz etmek için bir yöntem sunulmaktadır. Bu yöntem, kalp ilaç taraması için sağlamlık ve uygunluğu yüksek seviyesini gösterir.

Kardiyak İlaç güvenlik Taraması için insan mühendisliği kalp dokusunun Otomatik Büzülme Analizi

Cardiac tissue engineering describes techniques to constitute three dimensional force-generating engineered tissues. For the implementation of these ...

automated-contraction-analysis-human-engineered-heart-tissue-for

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Bioengineering

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antiarrhythmic and Heart Failure Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

12.5K Görüntüleme.  University Medical Center Hamburg-Eppendorf and DZHK (German Center for Cardiovascular Research).  uyarılmış pluripotent kök hücreler (hiPSC) kardiyomiyositlerini -türevlenmiş dan Burada, insan mühendisliği kalp dokusu üretimini göstermektedir. Biz hERG kanalı inhibitörü e-4031 ile büzülme kuvveti ve kasılma biçimi örnek değişiklik analiz etmek için bir yöntem sunulmaktadır. Bu yöntem, kalp ilaç taraması için sağlamlık ve uygunluğu yüksek seviyesini gösterir. 