Çalışma Bakanlığı bilim ve Teknoloji (proje en 105-2221-E-400-001) ve Ulusal Sağlık Araştırma kurumları (proje BN-105-s-10), Tayvan tarafından desteklenmiştir.

Kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi Tayvan Ulusal Sağlık Araştırma enstitüleri onaylanmıştır tüm hayvan iletişim kuralları.
 1. indüksiyon, diyabetik modelinde erkek yetişkin Sprague - Dawley (SD) fareler <ol><li>kaldırmak sıçan gıda granül kafes hızlı erkek SD (300-350 g) sıçanlara STZ indüksiyon öncesinde 6 h için.</li>
	<li>Hazırlama sodyum sitrat arabellek (0.1 M, pH 4.5).
	<ol><li>Erimesi 1,05 g sitrik asit monohidrat (C 6 H 8 O 7 · H 2 O; mol. WT 210.14) 50 mL 0.1 M sitrik asit çözüm yapmak için su distile.</li>
		<li>Erimesi 1,47 g TRISODYUM sitrat dihydrate (C 8 H 5 O 7 Na 3 · 2 H 2 O; mol. WT 294.12) 50 mL 0.1 M sodyum sitrat çözüm yapmak için su distile.</li>
		<li>Ekle 25 mL sitrik asit çözüm için 25 mL sodyum sitrat çözüm. Sodyum sitrat tampon pH (pH 4.5) monitör pH metre kullanarak. 
		Not: İzotonik arabellek buna ek olarak 0.1 M sodyum sitrat çözüm uygun bir birimi tarafından yapılır.</li>
	</ol></li> <li>Erimesi 50 mg/mL STZ çözüm getirebilecek STZ 0.1 M sodyum sitrat arabellekte. 
	Not: STZ çözüm ışığa duyarlı olduğunu, bu nedenle, STZ çözüm alüminyum folyo ile kapak ve 15-20 dk. içinde kullanın</li>
	<li>50 mg/kg STZ çözüm ile 26 - 28 gauge iğne. temiz enjeksiyon yeri bir etanol pad ile 1 mL insülin veya tüberkülin şırınga çekmek ve intraperitoneally zarar görmesini önlemek için karın sağ alt çeyreğine STZ çözüm enjekte Karın organları. </li> <li>% 10 Sükroz su ile rats 48 h için tek su kaynağı olarak STZ enjeksiyon sonra hipoglisemi önlemek için tedarik.</li></ol>
 2. onay diyabet STZ kaynaklı Sıçanlarda <ol><li>monitör tüm açlık plazma glukoz konsantrasyonu fareler tarafından STZ enjekte sonrası 72 h ile bir glikoz metre.
	<ol><li>Hızlı STZ-indüklenen diyabetik sıçan oruç ölçme önce 15 h için kan glikoz düzeyi.</li>
		<li>Bir kısıtlama çantasında sıçan dizginlemek ve kan toplama sırasında kan şekeri ölçümleri için kuyruk bulaşmasına neden.</li>
		<li>Küçük bir damla kan almak için kuyruk ucu prick kan lanset kullanın. Damla kan glikoz test şeridi üzerinde bir yer. Açlık plazma glukoz düzeyleri rekor. 
		Not: Glikoz metre algılar ve mg/dL birimlerinde kan şekeri düzeyini görüntüler. Açlık kan şekeri düzeyleri 150 mg/dL altında farelerle STZ-indüksiyon 2 hafta sonra dışlamak.</li>
	</ol></li></ol> 3. Diyabetik periferik nöropati diyabetik Sıçanlarda değerlendirilmesi <ol><li>Elektronik von Frey ile mekanik allodynia değerlendirin.
	<ol><li>Alıştırmak STZ indüklenen diyabetik sıçan 30 dk önce hind değerlendirmek için bir 1 cm çapında metal kafes katta bir kafeste pençe çekilme yanıt.</li>
		<li>El ile fareler arka pençe plantar yüzeye baskı uygulamak için katı ipucu (0.8 mm çapında) ile bir elektronik von Frey sonda kullanın ve bir pençe çekilme yanıt görülür kadar basınç yavaş yavaş artırın.</li>
		<li>Bu sistemdeki gösterir ve ölçüm fareyle her ölçüm arasındaki 30 s aralığı başına 5 kez tekrarlayın basınç kaydetmek.</li>
	</ol></li> <li>Isı hyperalgesia elektrikli Ocak ile değerlendirmek.
	<ol><li>Ağrı yanıt değerlendirmeden önce 10 dakikadır (24 ± 0,5 ° C) sıcak tabakta STZ-indüklenen diyabetik sıçan alıştırmak.</li>
		<li>Kaldırmak ve fareler habituation sonra onların kafes yerleştirin, sıcak plaka ısı ve sıcak plaka korumak &#39; s 55 ± 0,5 ° c sıcaklıkta</li>
		<li>Fare aynı anda zamanlayıcıyı başlatılırken ısıtmalı sıcak tabağa yerleştirin.</li>
		Fareyi farklı davranışlar sergiler, hind yalama gibi pençe veya anormal derecede flicking hind pençe, sayacý durdurmak ve para çekme gecikmesi kaydetmek <li>. 
		Not: Eğer bir fare sonra 20 farklı davranışları ifade değil s (20 s kesme süresi), sıcak plaka test sonlandırmak ve fare sıcak plaka kaldır.</li>
	</ol></li></ol> 4. Vivo Sinir iletim blokajı HIFU dönüştürücü ile Not: vivo içinde deneme hafta 5 50 mg/kg STZ enjeksiyon sonra başlar.
<ol><li>CMAPs HIFU sonication ile engelleme önce hayvan yordamları gerçekleştirin.
	<ol><li>Cerrahi araçlarda (neşter, makas, pens ve cam kanca) bir otoklav ameliyattan önce sterilize.</li>
		<li>Tiletamine/zolazepam karışımı (40 mg/kg) ve xylazine (10 mg/kg) mayi enjeksiyon veya inhalasyon yolu ile isoflurane isoflurane Buharlaştırıcı üzerinden %1.75 farelerle anestezi. Vücut ısısını korumak için bir Isıtma yastığı fareler yer.</li>
		<li>Cerrahi sıçanlara ventral recumbency getirin. Göz merhem uygulamak. Fareyi bacak uzatmak ve anestezi derinliği tespit için tırnakları ayak plantar yüzeyine çimdik. Fareler çekilme yanıtları göstermek, ek anestezi uygulanır.</li>
		<li>Bacağından çıkardığınızı tüylerden ve arkasında bir elektrik kesme makinesi ile fareler daha düşük. Cerrahi alanında temiz gazlı bez ile sıvı iyot uygulamak ve dairesel yayın gazlı bez cerrahi sitesi dışa doğru hareket ettirin. Bir alkol takımını aynı dairesel hareketi ile sıvı iyot silmek için kullanın. Bu deney sol ve sağ cerrahi sitesinde gerçekleştirilir. Diğer cerrahi sitesinde yordamı yineleyin ne zaman yordam sonraki adımında gerçekleştirmek.</li>
		<li>Steril Cerrahi makas veya neşter deri kesik dorsal uyluk olun Dikkatle doku cilt altında ayrı ve cilt ile cilt kanca. uyluk kas içinde görülebilir güvenli künt Cerrahi makas kullanın.</li>
		<li>Makas kasları gömülü orta uyluk siyatik sinir lifleri görünür hale gelene kadar dikkatle femur paralel kasları ayırmak için kullanın. Dikkatle çevreleyen bağ doku ve kasları orta uyluk siyatik sinir ayırmak için bir cam kanca kullanın.</li>
	</ol></li> <li>Siyatik sinir bir ısmarlama sinir fiksatör ( Resim 1 ve şekil 3) kullanarak HIFU odak bölgesi içinde konumlandırın. 
	Not: Özel yapım sinir fiksatör oluşmak-in 3 parça ( şekil 3). Tüm bileşenleri şeffaf Polimetilmetaakrilat (PMMA) yapılır. Dış iş parçacığı bileşen üst yapısını ben aynıdır 2,5 mm boyunda ve M10XP0.7 ( şekil 4A). Merkezi iyi 4.0 mm çaplı delik bileşeni aracılığıyla ben var. Kuyu alt açıklıklı teyp tabakasıyla kaplı kalır. Yuvası çapı 1.2 mm olduğunu ve ben yuvasının Merkezi uçak ve bileşenin üst yüzeyi arasındaki mesafedir 3.1 mm. bileşen II ana gövdesi, dört bacağı ve alt yapı ( şekil 4B) oluşur. 2.5 mm boyunda ve bileşen dış iplik sığacak şekilde M10XP0.7 alt yapısının iç iş parçacığı olduğunu ben. Merkez delik çapi bileşen Merkezi kuyusu aynıdır ben. Ana gövde 32 mm çapında ve 5.4 mm kalınlıkta boyutlardır. Dört bacaklı simetrik olarak dağıtılır. İki özdeş kısa bacakları hizalama için tasarlanmıştır ve iki özdeş uzun bacaklı bileşen III çengel için iş. Dış çap ve bileşenin III yüksekliğini 41 mm ve 9,2 mm dir. İç iş parçacığı M36XP1.0 ve ile delik 27,5 mm çapında (< güçlü sınıfı "xfig" => Şekil 4 c). Koni 84 mm çapında üst açıklıklı ve 27,5 mm alt açıklıklı çapı ile içi boş bir konik olduğunu. Yüksekliği 57,5 ( şekil 5A) mm'dir.
	<ol><li>30-60 dk steril suda ıslatarak takip için çamaşır suyu çözümünde özel akrilik sinir fiksatör deneme önce emmek.</li>
		<li>Bir cam kanca kullanarak sinir çýkýntýdan ve bileşen ı. yuvası koymak</li>
		<li>Vida bileşen II bileşenine ı. dolgu Merkez iyi bileşeni I zil ile &#39; ultrasonik yayılması ve sinir korunması için s çözüm.</li>
		HIFU konut koni <li>vida bileşenine III. Dock bileşeniyle bileşeni bileşen II dört bacağı II III. 
		Not: Üç bileşenden geometrik merkezi ve dönüştürücü hizalanır. Sinir ve dönüştürücü arasındaki mesafe sinir HIFU odak bölge içinde olmasını sağlar odak uzaklığı eşittir.</li>
	</ol></li> <li>Siyatik sinir ve diğer çift gastroknemius kas içine kökeni akupunktur iğneleri bir çift yerleştirin. Her çift iğne Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi bir elektrik koaksiyel kablo ( şekil 1) aracılığıyla bağlanmak. 
	Not: kablosunun bir ucunu iki iğne küçük ayrı ayrı ve kablosunun diğer ucundaki iki timsah klipleri sistem bağlamak için BNC Bağlayıcısı vardır. Akupunktur iğneleri çiftlerini siyatik sinir, uyarıcı elektrotlar ve kayıt elektrotları gastroknemius kas olarak çalışıyorum.
	<ol><li>Örnekleme hızı ve bant genişliği Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi 50 kHz ve 70 Hz - 3 kHz ila, anılan sıraya göre ayarlayın. Siyatik sinir kökeni, uyarıcı elektrotlar supra-azami uyarıcı bir darbe genişliği 0.1 MS ile uygulamak.</li>
		<li>Üzerinden kayıt elektrotları CMAPs kaydetmek ve insert ile dahili amplifikatör Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi yükseltmek. 
		Not: dahili amplifikatör Elektrofizyoloji Koordinat Belirleme Sistemi sinir sinyalleri yükseltmek ve Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi ile kayıt elektrotları üzerinden CMAPs kaydetmek için kullanabilirsiniz.</li>
	</ol></li> <li>Diyabetik nöropatik Sıçanlarda CMAPs bastırmak için bir ticari 2.68 MHz HIFU çevirici kullanın. 
	Not: Dönüştürücü teknik özellikleri aşağıda açıklanan: tek öğeli bir küresel kase diyafram çapı 6 cm ve 5 cm odak uzaklığı ve 4 mm derinlik ve genişliği ücretsiz alanındaki 0.8 mm elips bir odak bölgesi.
	<ol><li>Küresel koni, HIFU dönüştürücü ve koni içinde belgili tanımlık tank kapak bırakın degassed su. HIFU dönüştürücü küresel koni koymak ve koni kapak küresel konik üst açılması için 6 baş vidalar tarafından ( 5B rakam) düzeltin. Küresel koni kabarcıkları doğal olarak baloncuklar su ile karşılaştırıldığında düşük yoğunluk nedeniyle okuldan sonra ön uç açılış koni şeffaf 0,03 mm kalın bant tarafından mühür. Üzerine küresel konik vida bileşen III.</li>
		<li>Degassed su tankından HIFU dönüştürücü ile küresel koni ve bileşen III çıkar. 
		Not: çalışmada kullanılan Ters Ozmos Ters Ozmos işlem tarafından arıtılmış su sudur. Ters Ozmos su gaz çıkarmak için kaynatılır. Soğutma sonra degassed su içinde bireysel bir kapalı tank elde edilir.</li>
	</ol></li> <li>Bileşen koymak ben sinir ve kas arasındaki boşluğa dikkatle ve sinir bileşen ı. gerçekleştirme adımları 4.2.3 ve sinir HIFU odak bölge içinde olduğundan emin olmak için 4.2.4 boşluk yerleştirin ( şekil 3A < / güçlü >).</li>
	<li>Bir işlev üreteci ve Radyofrekans amplifikatör bağlantı. Güç amplifikatörü HIFU dönüştürücü HIFU kiriş üretimi için bağlayın. El ile güç amplifikatörü HIFU dönüştürücü üzerinden için işlev üreteci gerilim çıkışını ayarlayın. HIFU maruz kalma süresi doldu sonra el ile işlev üreteci kapatmak. Bir zamanlayıcı kullanarak zaman gözlemlemek. 
	Not: Yoğunluk ve enerji bu çalışmada kullanılan HIFU demetinin 2,810 W/cm 2 ve 84 J/mm 2, sırasıyla vardır.</li>
	<li>Aynı anda, uyarıcı Elektrofizyoloji Koordinat Belirleme Sistemi (Adım 4.3) üzerinden ve HIFU ışın HIFU sistemi (Adım 4.6) üzerinden siyatik sinir CMAPs kaydederken teslim. Yavaş yavaş HIFU siyatik sinir üzerindeki 3 artırmak s, 5 s 8 azalması veya insert genliği inhibisyonu görülmektedir kadar s.
	<ol><li>Kayıt HIFU teslimi sırasında saniyede bir kez CMAPs ışın. İnsert genliği değişikliği gözlemleyerek sonra HIFU etmeyi kapat ve el ile Elektrofizyoloji edinme yazılım kayda CMAPs erken 10 min, her 5 dakika içinde arka arkaya 30 dk içinde her 2 dk kayıt simgesini tıklayın ve her 10 min Son aşama kayıt süresi 2 h. ulaşana kadar</li>
	</ol></li> <li>Ayrı bileşen II ve III. sinir fiksatör ( şekil 3) HIFU dönüştürücü kesi siteden kaldırmak için. Ayrı bileşen II ve ben güvenli siyatik sinir serbest bırakmak için. Diyabetik sıçan cerrahi sitesi 4-0 fotokromik akorduna dikiş tarafından CMAPs kaydettikten sonra dikiş. Sıvı iyot enfeksiyonu önlemek için cerrahi sitesi uygulamak.
	<ol><li>Kafesleri Isıtma yastığını yerleştirin ve onların kafes hayvan tesisine dönmeden önce kurtarmak fareler sağlar. Fareler 3 gün veya buprenorfin (0,05 - 0,1 mg/kg) mayi enjeksiyon için ibuprofen içme suyu sağlamak.</li>
	</ol></li> <li>Kayıt ve uyarıcı elektrotlar siyatik sinir ve imzalat diyabetik nöropatik sıçan gastroknemius kas kökenli adımları 4.1.2 ve 4.3 7, 14 ve 28 gün sonra ilk HIFU sonication açıklandığı gibi ekleyin. 4.3.1-4.3.2 adımları yineleyin.
	<ol><li>Kafesleri Isıtma yastığını yerleştirin ve onların kafes kafes hayvan tesisine taşımadan önce kurtarmak fareler sağlar.</li>
	</ol></li> <li>Fareler deneyden sonra ötenazi. Fareyi bir karbon dioksit odaya koyun. 5 dakika farelerin nefes durdurmak için bekleyin. Kalp yenerek durdurdu emin olmak.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Abuaisha, B. B., Costanzi, J. B., Boulton, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acupuncture+for+the+treatment+of+chronic+painful+peripheral+diabetic+neuropathy:+A+long-term+study.">Acupuncture for the treatment of chronic painful peripheral diabetic neuropathy: A long-term study.</a> Diabetes Res Clin Pract. 39 (2), 115-121 (1998).</li><li>Hamza, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+electrical+nerve+stimulation:+A+novel+analgesic+therapy+for+diabetic+neuropathic+pain.">Percutaneous electrical nerve stimulation: A novel analgesic therapy for diabetic neuropathic pain.</a> Diabetes Care. 23 (3), 365-370 (2000).</li><li>Ballantine, H. T., Bell, E., Manlapaz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+and+problems+in+the+neurologic+applications+of+focused+ultrasound.">Progress and problems in the neurologic applications of focused ultrasound.</a> J Neurosurg. 17, 858-876 (1960).</li><li>Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+high-intensity+focused+ultrasound+for+conduction+block+of+peripheral+nerves.">Image-guided high-intensity focused ultrasound for conduction block of peripheral nerves.</a> Ann Biomed Eng. 35 (1), 109-119 (2007).</li><li>Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-intensity+focused+ultrasound+attenuates+neural+responses+of+sciatic+nerves+isolated+from+normal+or+neuropathic+rats.">High-intensity focused ultrasound attenuates neural responses of sciatic nerves isolated from normal or neuropathic rats.</a> Ultrasound Med Biol. 41 (1), 132-142 (2015).</li><li>Young, R. R., Henneman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+block+of+nerve+conduction+by+ultrasound.">Reversible block of nerve conduction by ultrasound.</a> Arch Neurol. 4, 83-89 (1961).</li><li>Lele, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+focused+ultrasonic+radiation+on+peripheral+nerve,+with+observations+on+local+heating.">Effects of focused ultrasonic radiation on peripheral nerve, with observations on local heating.</a> Exp Neurol. 8 (1), 47-83 (1963).</li><li>Hong, C. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+nerve+conduction+block+in+patients+with+poly-+neuropathy+after+ultrasound+thermotherapy+at+therapeutic+dosage.">Reversible nerve conduction block in patients with poly- neuropathy after ultrasound thermotherapy at therapeutic dosage.</a> Arch Phys Med Rehabil. 72 (2), 132-137 (1991).</li><li>Okada, A., Morita, Y., Fukunishi, H., Takeichi, K., Murakami, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+magnetic+resonance-guided+focused+ultrasound+treatment+of+uterine+fibroids+in+a+large+Japanese+population:+impact+of+the+learning+curve+on+patient+outcome.">Non-invasive magnetic resonance-guided focused ultrasound treatment of uterine fibroids in a large Japanese population: impact of the learning curve on patient outcome.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 34 (5), 579-583 (2009).</li><li>Huisman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+consensus+on+use+of+focused+ultrasound+for+painful+bone+metastases:+current+status+and+future+directions.">International consensus on use of focused ultrasound for painful bone metastases: current status and future directions.</a> Int J Hyperthermia. 31 (3), 251-259 (2015).</li><li>Dickinson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medium-term+Outcomes+after+Whole-gland+High-intensity+Focused+Ultrasound+for+the+Treatment+of+Nonmetastatic+Prostate+Cancer+from+a+Multicentre+Registry+Cohort.">Medium-term Outcomes after Whole-gland High-intensity Focused Ultrasound for the Treatment of Nonmetastatic Prostate Cancer from a Multicentre Registry Cohort.</a> Eur Urol. 70 (4), 668-674 (2016).</li><li>Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+high-intensity+focused+ultrasound+on+nerve+conduction.">Effects of high-intensity focused ultrasound on nerve conduction.</a> Muscle Nerve. 37 (2), 241-250 (2008).</li><li>Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+conduction+block+in+diabetic+rats+using+high-intensity+focused+ultrasound+for+analgesic+applications.">Nerve conduction block in diabetic rats using high-intensity focused ultrasound for analgesic applications.</a> Br J Anaesth. 114 (5), 840-846 (2015).</li><li>Donoff, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+regeneration:+basic+and+applied+aspects.">Nerve regeneration: basic and applied aspects.</a> Crit Rev Oral Biol Med. 6 (1), 18-24 (1995).</li><li>Fawcett, J. W., Keynes, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+nerve+regeneration.">Peripheral nerve regeneration.</a> Annu Rev Neurosci. 13, 43-60 (1990).</li><li>Nightingale, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuropathic+pain+market.">The neuropathic pain market.</a> Nat Rev Drug Discov. 11 (2), 101-102 (2012).</li><li>Lipton, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-pulse+transcranial+magnetic+stimulation+for+acute+treatment+of+migraine+with+aura:+a+randomised,+double-blind,+parallel-group,+sham-controlled+trial.">Single-pulse transcranial magnetic stimulation for acute treatment of migraine with aura: a randomised, double-blind, parallel-group, sham-controlled trial.</a> Lancet Neurol. 9 (4), 373-380 (2010).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Action potentials diyabetik sıçan vivo içinde gelen nöropatik sinir ve anlık oluşumunu engelleyici etkisi HIFU tedavisi hem gözlenmiştir sonra kısmi ve geçici bastırma. 28 günlük takip çalışması insert üzerinde güvenli bir abluka sinir iletim, uygun HIFU riziko taşınan dışarı gösterdi. Sonuç olarak, yukarıdaki Protokolü HIFU tedavisi siyatik sinirleri diyabetik Sıçanlarda tersinir iletim bloğu için alternatif bir çözüm sağlayabilir.
Bu yöntemde, i?...

Oral ilaçlar, akupunktur1ve elektriksel sinir stimülasyonu2 ağrılı diyabetik polinöropati tedavisi için kullanılır. Ancak, oral ilaçlar, akupunktur ve elektriksel sinir stimülasyonu invaziv işlem yan etkileri terapötik etkinlik ve hastanın bağlılık engel. Hayvan modellerinde periferik sinirler bloğunu ultrason için onlarca yıl3,4,5araştırmış. Büyük yeşil kurbağa vitro siyatik sinir iletim geri dönülebilir olarak 0.4 için-ultrason pozlama 10-20 darbeleri tedaviden sonra inhibe 1.0 s6. Sinir iletim engellemek için bir ultrason7tarafından indüklenen sıcaklık artışı faktördür. Polinöropati olan hastalar için bileşik kas aksiyon potansiyelleri (insert) bastırılması düşük yoğunluktaki ultrason için 2 dk8maruz peroneal sinir içinde gerçekleştirildi. 5 dk içinde tam kurtarma zamandı.
Son zamanlarda, gıda ve İlaç İdaresi Amerika Birleşik Devletleri'nin HIFU uterin fibroid tümörler9, ağrı palliations kemik metastaz10ve prostat kanseri11için non-invaziv tedavi olarak onaylanmış. Bir HIFU dönüştürücü vücut dışında akustik ışınları yayar ve kirişler çeşitli doku ortamlar içinde iletmek ve odağı hedef tümöre üzerinde birleşirler. Odak bölge hemen hedef tümörler üzerinde lokalize etkileri çevre dokulara zarar vermeden üretmek için kuruldu. HIFU Ayrıca sinir iletim inhibe veya sinir denervation normal Sprague-Dawley (SD) fareler12 in vivo deneyler neden uygulandı. Buna ek olarak, HIFU kısa ve uzun vadeli etkileri nöropatik sinir incelenen13olmuştur. Önceki sonuçlar duyusal sinir iletim tersine çevrilebilir veya kalıcı blok uygun parametrelerle HIFU tarafından elde edilebilir gösterdi. Analjezik uygulamaların yanı sıra HIFU bir araç olarak sinir iletim abluka Nöroloji temel araştırma ve geliştirme ağrı kesici için periferik ve merkezi bileşenleri göreli katkısını araştırmak için kullanılabilir olur. Bu nedenle, bir HIFU engelleme teknoloji platformu belirli hayvan modellerinde periferik sinirler için gereklidir. Bu makalenin amacı, kısmen veya tamamen HIFU tarafından diyabetik nöropatik Sıçanlarda periferik sinir aksiyon potansiyelleri engelleme yordamlarına göstermektir. Diyabetik fare modelleri ve değerlendirme periferik nöropatik semptomların kurulmuştur. Bir HIFU platformu ve deneysel süreçler sıçan siyatik sinirleri tedavisi için belirli sunulmaktadır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="965">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:365px;">streptozotocin</td>
			<td style="width:315px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:119px;">85882</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">citric acid monohydrate&#160;</td>
			<td style="width:315px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">C1909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">trisodium citrate dihydrate</td>
			<td style="width:315px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">W302600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">glucose meters</td>
			<td>Roche Accu-Check Active</td>
			<td>GC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">electronic von Frey device</td>
			<td>IITC Life Science</td>
			<td>2390</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hot plate</td>
			<td>IITC Life Science</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Biopac MP36 acquisition system</td>
			<td>Biopac Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HIFU transducer</td>
			<td>Sonic Concepts</td>
			<td>H108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">function generator</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>33250A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">power amplifier</td>
			<td>Electronics &#38; Innovation</td>
			<td>1040L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:365px;">Rats&#160;</td>
			<td style="width:315px;">Biolasco taiwan</td>
			<td style="width:119px;">Sprague-Dawley</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:365px;">Puralube vet ointment</td>
			<td style="width:315px;">Dechra</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">isoflurane vaporizer</td>
			<td style="width:315px;">Parkland Scientific</td>
			<td style="width:119px;">V3000PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:365px;">Isoflurance</td>
			<td style="width:315px;">Attane</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:365px;">Restraint bag (Decapicones)</td>
			<td style="width:315px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:119px;">DC 200</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an ultrasonic tool for nerve conduction block in diabetic rat models

Sinir iletim bloğu bir yüksek yoğunluk odaklı ultrason (HIFU) çevirici ile normal ve diyabetik hayvan modellerinde son zamanlarda yapıldı. HIFU geri dönülebilir olarak uygun bir ultrasonik parametresini kullanırken sinirler zarar vermeden periferik sinir iletim engelleyebilir. Sinir aksiyon potansiyelleri geçici ve kısmi bloğunu HIFU ağrı yardım için yararlı bir klinik tedavi olma potansiyeline sahip olduğunu gösterir. Bu eser bir HIFU dönüştürücü kullanarak diyabetik sıçan vivo içinde nöropatik sinirler aksiyon potansiyelleri bastırmak için işlemleri gösterir. İlk adım streptozotocin (STZ) enjeksiyonu ile yetişkin erkek diyabetik nöropatik rats üretmektir. İkinci adım STZ-indüklenen diyabetik Sıçanlarda diyabetik periferik nöropati bir elektronik von Frey sonda ve sıcak bir tabak tarafından değerlendirmek etmektir. Kayıt içinde vivo hücre dışı aksiyon potansiyelleri HIFU sonication için maruz sinir son adım etmektir. Burada ortaya yöntem ultrason analjezik uygulamaları çalışma yararlanabilir.

3 s sonication bir yoğunluk itibariyle 2,810 W/cm2bir HIFU doz, insert temellerin % 20 oranında bastırılır, ancak tamamen (şekil 2A, elmas) 30 dk sonra ele geçirildi ve neredeyse giriyordu, in vivo çalışmada gösterilmiştir 28 gün (şekil 2B, elmas) döneminde sürekli. 5 s HIFU maruz kalma, aynı yoğunlukta CMAPs 65,4 temel 4 dk (%9,5) oranında azalmış ve %73,7 (%12,6) satır taban çizgisiyle...

Watch this Scientific Journal Video about An Ultrasonic Tool for Nerve Conduction Block in Diabetic Rat Models at JoVE.com

An Ultrasonic Tool for Nerve Conduction Block in Diabetic Rat Models

Bu çalışma yüksek yoğunluk odaklı ultrason diyabetik nöropatik sinir aksiyon potansiyelleri engellemek için uygulanan metodoloji sunar.

Sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme

Nerve conduction block with a high intensity-focused ultrasound (HIFU) transducer has been performed in normal and diabetic animal models recently. HIFU ...

an-ultrasonic-tool-for-nerve-conduction-block-in-diabetic-rat-models

Research

JoVE Journal

Bioengineering

7.3K Görüntüleme.  National Health Research Institutes. Bu çalışma yüksek yoğunluk odaklı ultrason diyabetik nöropatik sinir aksiyon potansiyelleri engellemek için uygulanan metodoloji sunar.

Video: An Ultrasonic Tool for Nerve Conduction Block in Diabetic Rat Models

Procedure for Decellularization of Rat Livers in an Oscillating-pressure Perfusion Device

Decellularization and recellularization of parenchymal organs may enable the generation of functional organs in vitro, and several protocols for rodent liver decellularization have already been published. We aimed to improve the decellularization process by construction of a proprietary perfusion device enabling selective perfusion via the portal vein and/or the hepatic artery. Furthermore, we sought to perform perfusion under oscillating surrounding pressure conditions to improve the homogeneity of decellularization. The homogeneity of perfusion decellularization has been an underestimated factor to date. During decellularization, areas within the organ that are poorly perfused may still contain cells, whereas the extracellular matrix (ECM) in well-perfused areas may already be affected by alkaline detergents. Oscillating pressure changes can mimic the intraabdominal pressure changes that occur during respiration to optimize microperfusion inside the liver. In the study presented here, decellularized rat liver matrices were analyzed by histological staining, DNA content analysis and corrosion casting. Perfusion via the hepatic artery showed more homogenous results than portal venous perfusion did. The application of oscillating pressure conditions improved the effectiveness of perfusion decellularization. Livers perfused via the hepatic artery and under oscillating pressure conditions showed the best results. The presented techniques for liver harvesting, cannulation and perfusion using our proprietary device enable sophisticated perfusion set-ups to improve decellularization and recellularization experiments in rat livers.

The presented techniques for liver harvesting, cannulation and perfusion using our proprietary device enable sophisticated perfusion set-ups to improve decellularization and recellularization experiments in rat livers.

Bir Salınım basınçlı perfüzyon Aygıt Sıçan karaciğerinin decellularization Prosedürü

Decellularization and recellularization of parenchymal organs may enable the generation of functional organs in vitro, and several protocols for rodent ...

Biyomühendislik

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and dampen loads in the spine. The IVD consists of a proteoglycan-rich nucleus pulposus (NP) and a collagen-rich annulus fibrosis (AF) sandwiched by cartilaginous end-plates. Together with the adjacent vertebrae, the vertebrae-IVD structure forms a functional spine unit (FSU). These microstructures contain unique cell types as well as unique extracellular matrices. Whole organ culture of the FSU preserves the native extracellular matrix, cell differentiation phenotypes, and cellular-matrix interactions. Thus, organ culture techniques are particularly useful for investigating the complex biological mechanisms of the IVD. Here, we describe a high-throughput approach for culturing whole lumbar mouse FSUs that provides an ideal platform for studying disease mechanisms and therapies for the IVD. Furthermore, we describe several applications that utilize this organ culture method to conduct further studies including contrast-enhanced microCT imaging and three-dimensional high-resolution finite element modeling of the IVD.

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

Whole organ culture of the intervertebral disc (IVD) preserves the native extracellular matrix, cell phenotypes, and cellular-matrix interactions. Here we describe an IVD culture system using mouse lumbar and caudal IVDs in their functional spinal units and several applications utilizing this system.

bir<em&gt; İn Vitro</emKemirgen İntervertebral Disk&gt; Organ Kültürü Modeli

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

A Performance-testing Platform for a Conduction Micropump with an FR-4 Copper-clad Electrode Plate

Here, a conduction micropump with symmetric planar electrode pairs prepared on flame-retardant glass-reinforced epoxy (FR-4) copper-clad laminate (CCL) is fabricated. It is used to investigate the influence of chamber dimensions on the performance of a conduction micropump and to determine the reliability of the conduction pump when acetone is used as the working fluid. A testing platform is set up to evaluate conduction micropump performance under different conditions. When the chamber height is 0.2 mm, the pump pressure reaches its peak value.

This paper presents a protocol for the fabrication of a conduction micropump using symmetric planar electrodes on flame-retardant glass-reinforced epoxy (FR-4) copper-clad laminate (CCL) to test the influence of chamber dimensions on the performance of a conduction micropump.

Performans Test platformu ve tel Micropump FR-4 bakır kaplı elektrot plaka ile için

Here, a conduction micropump with symmetric planar electrode pairs prepared on flame-retardant glass-reinforced epoxy (FR-4) copper-clad laminate (CCL) is ...

An Efficient and Reproducible Protocol for Distraction Osteogenesis in a Rat Model Leading to a Functional Regenerated Femur

This protocol describes the use of a newly developed external fixator for distraction osteogenesis in a rat femoral model. Distraction osteogenesis (DO) is a surgical technique leading to bone regeneration after an osteotomy. The osteotomized extremities are moved away from each other by gradual distraction to reach the desired elongation. This procedure is widely used in humans for lower and upper limb lengthening, treatment after a bone nonunion, or the regeneration of a bone defect following surgery for bone tumor excision, as well as in maxillofacial reconstruction. Only a few studies clearly demonstrate the efficiency of their protocol in obtaining a functional regenerated bone, i.e., bone that will support physiological weight-bearing without fracture after removal of the external fixator. Moreover, protocols for DO vary and reproducibility is limited by lack of information, making comparison between studies difficult. The aim of this study was to develop a reproducible protocol comprising an appropriate external fixator design for rat limb lengthening, with a detailed surgical technique that permits physiological weight-bearing by the animal after removal of the external fixator.

This study describes a reproducible and detailed protocol using a newly developed external fixator for distraction osteogenesis (DO) in a femoral rat model which permits physiological weight-bearing by the animal after removal of the external fixator.

Oyalama Osteogenesis fonksiyonel rejenere uyluk için önde gelen bir fare modeli için verimli ve tekrarlanabilir bir protokol

This protocol describes the use of a newly developed external fixator for distraction osteogenesis in a rat femoral model. Distraction osteogenesis (DO) ...

An Ultrahigh-throughput Microfluidic Platform for Single-cell Genome Sequencing

Sequencing technologies have undergone a paradigm shift from bulk to single-cell resolution in response to an evolving understanding of the role of cellular heterogeneity in biological systems. However, single-cell sequencing of large populations has been hampered by limitations in processing genomes for sequencing. In this paper, we describe a method for single-cell genome sequencing (SiC-seq) which uses droplet microfluidics to isolate, amplify, and barcode the genomes of single cells. Cell encapsulation in microgels allows the compartmentalized purification and tagmentation of DNA, while a microfluidic merger efficiently pairs each genome with a unique single-cell oligonucleotide barcode, allowing &gt;50,000 single cells to be sequenced per run. The sequencing data is demultiplexed by barcode, generating groups of reads originating from single cells. As a high-throughput and low-bias method of single-cell sequencing, SiC-seq will enable a broader range of genomic studies targeted at diverse cell populations.

Single-cell sequencing reveals genotypic heterogeneity in biological systems, but current technologies lack the throughput necessary for the deep profiling of community composition and function. Here, we describe a microfluidic workflow for sequencing &gt;50,000 single-cell genomes from diverse cell populations.

Tek hücreli genom sıralama için bir üretilen iş Ultrahigh mikrosıvısal Platform

Sequencing technologies have undergone a paradigm shift from bulk to single-cell resolution in response to an evolving understanding of the role of ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver engineering, including in vivo organ decellularization followed by repopulation, has emerged as a promising approach over ex vivo liver engineering. However, postoperative survival was not achieved. The aim of this study is to develop a novel surgical technique of in vivo selective liver lobe perfusion in rats as a prerequisite for in vivo liver engineering. We generate a circuit bypass only through the left lateral lobe. Then, the left lateral lobe is perfused with heparinized saline. The experiment is performed with 4 groups (n = 3 rats per group) based on different perfusion times of 20 min, 2 h, 3 h, and 4 h. Survival, as well as the macroscopically visible change of color and the histologically determined absence of blood cells in the portal triad and the sinusoids, is taken as an indicator for a successful model establishment. After selective perfusion of the left lateral lobe, we observe that the left lateral lobe, indeed, turned from red to faint yellow. In a histological assessment, no blood cells are visible in the branch of the portal vein, the central vein, and the sinusoids. The left lateral lobe turns red after reopening the blocked vessels. 12/12 rats survived the procedure for more than one week. We are the first to report a surgical model for in vivo single liver lobe perfusion with a long survival period of more than one week. In contrast to the previously published report, the most important advantage of the technique presented here is that perfusion of 70% of the liver is maintained throughout the whole procedure. The establishment of this technique provides a foundation for in vivo partial liver engineering in rats, including decellularization and recellularization.

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

We establish a novel surgical technique for an in vivo single liver lobe perfusion model in rat as a prerequisite for further studying in vivo partial liver engineering in the future.

Sıçan Vivo içinde kısmi karaciğer Dairesi'nde için bir temel olarak yeni bir cerrahi teknik

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

A Multilayer Microfluidic Platform for the Conduction of Prolonged Cell-Free Gene Expression

The limitations of cell-based synthetic biology are becoming increasingly apparent as researchers aim to develop larger and more complex synthetic genetic regulatory circuits. The analysis of synthetic genetic regulatory networks in vivo is time consuming and suffers from a lack of environmental control, with exogenous synthetic components interacting with host processes resulting in undesired behavior. To overcome these issues, cell-free characterization of novel circuitry is becoming more prevalent. In vitro transcription and translation (IVTT) mixtures allow the regulation of the experimental environment and can be optimized for each unique system. The protocols presented here detail the fabrication of a multilayer microfluidic device that can be utilized to sustain IVTT reactions for prolonged durations. In contrast to batch reactions, where resources are depleted over time and (by-) products accumulate, the use of microfluidic devices allows the replenishment of resources as well as the removal of reaction products. In this manner, the cellular environment is emulated by maintaining an out-of-equilibrium environment in which the dynamic behavior of gene circuits can be investigated over extended periods of time. To fully exploit the multilayer microfluidic device, hardware and software have been integrated to automate the IVTT reactions. By combining IVTT reactions with the microfluidic platform presented here, it becomes possible to comprehensively analyze complex network behaviors, furthering our understanding of the mechanisms that regulate cellular processes.

The fabrication process of a PDMS-based, multilayer, microfluidic device that allows in vitro transcription and translation (IVTT) reactions to be performed over prolonged periods is described. Furthermore, a comprehensive overview of the hardware and software required to automate and maintain these reactions for prolonged durations is provided.

Uzun Süreli Hücresiz Gen Ekspresyonunun İletimi için Çok Katmanlı Mikroakışkan Platform

The limitations of cell-based synthetic biology are becoming increasingly apparent as researchers aim to develop larger and more complex synthetic genetic ...

Fabrication of the Composite Regenerative Peripheral Nerve Interface (C-RPNI) in the Adult Rat

Recent advances in neuroprosthetics have enabled those living with extremity loss to reproduce many functions native to the absent extremity, and this is often accomplished through integration with the peripheral nervous system. Unfortunately, methods currently employed are often associated with significant tissue damage which prevents prolonged use. Additionally, these devices often lack any meaningful degree of sensory feedback as their complex construction dampens any vibrations or other sensations a user may have previously depended on when using more simple prosthetics. The composite regenerative peripheral nerve interface (C-RPNI) was developed as a stable, biologic construct with the ability to amplify efferent motor nerve signals while providing simultaneous afferent sensory feedback. The C-RPNI consists of a segment of free dermal and muscle graft secured around a target mixed sensorimotor nerve, with preferential motor nerve reinnervation of the muscle graft and sensory nerve reinnervation of the dermal graft. In rats, this construct has demonstrated the generation of compound muscle action potentials (CMAPs), amplifying the target nerve&#39;s signal from the micro- to milli-volt level, with signal to noise ratios averaging approximately 30-50. Stimulation of the dermal component of the construct generates compound sensory nerve action potentials (CSNAPs) at the proximal nerve. As such, this construct has promising future utility towards the realization of the ideal, intuitive prosthetic.

Fabrication of the Composite Regenerative Peripheral Nerve Interface C-RPNI in the Adult Rat

The following manuscript describes a novel method for developing a biologic, closed loop neural feedback system termed the composite regenerative peripheral nerve interface (C-RPNI). This construct has the ability to integrate with peripheral nerves to amplify efferent motor signals while simultaneously providing afferent sensory feedback.

Yetişkin Sıçanda Kompozit Rejeneratif Periferik Sinir Arabiriminin (C-RPNI) Imalatı

Recent advances in neuroprosthetics have enabled those living with extremity loss to reproduce many functions native to the absent extremity, and this is ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of robust, predictive in vitro test systems is essential. Hepatic toxicology is key when considering ENM exposure, as the liver serves a vital role in metabolic homeostasis and detoxification as well as being a major site of ENM accumulation post exposure. Based upon this and the accepted understanding that 2D hepatocyte models do not accurately mimic the complexities of intricate multi-cellular interactions and metabolic activity observed in vivo, there is a greater focus on the development of physiologically relevant 3D liver models tailored for ENM hazard assessment purposes in vitro. In line with the principles of the 3Rs to replace, reduce and refine animal experimentation, a 3D HepG2 cell-line based liver model has been developed, which is a user friendly, cost effective system that can support both extended and repeated ENM exposure regimes (&#8804;14 days). These spheroid models (&#8805;500 &#181;m in diameter) retain their proliferative capacity (i.e., dividing cell models) allowing them to be coupled with the &#8216;gold standard&#8217; micronucleus assay to effectively assess genotoxicity in vitro. Their ability to report on a range of toxicological endpoints (e.g., liver function, (pro-)inflammatory response, cytotoxicity and genotoxicity) has been characterized using several ENMs across both acute (24 h) and long-term (120 h) exposure regimes. This 3D in vitro hepatic model has the capacity to be utilized for evaluating more realistic ENM exposures, thereby providing a future in vitro approach to better support ENM hazard assessment in a routine and easily accessible manner.

This procedure was established to be used for developing advanced 3D hepatic cultures in vitro, which can provide a more physiologically relevant assessment of the genotoxic hazards associated with nanomaterial exposures over both an acute or long-term, repeated dose regimes.

Uzun Süreli Nanomalzeme Maruziyetini Takiben İn vitro Genotoksisite Testi için Gelişmiş 3D Karaciğer Modelleri

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...

An Open Source Technology Platform to Manufacture Hydrogel-Based 3D Culture Models in an Automated and Standardized Fashion

Current mixing steps of viscous materials rely on repetitive and time-consuming tasks which are performed mainly manually in a low throughput mode. These issues represent drawbacks in workflows that can ultimately result in irreproducibility of research findings. Manual-based workflows are further limiting the advancement and widespread adoption of viscous materials, such as hydrogels used for biomedical applications. These challenges can be overcome by using automated workflows with standardized mixing processes to increase reproducibility. In this study, we present step-by-step instructions to use an open source protocol designer, to operate an open source workstation, and to identify reproducible mixtures. Specifically, the open source protocol designer guides the user through the experimental parameter selection and generates a ready-to-use protocol code to operate the workstation. This workstation is optimized for pipetting of viscous materials to enable automated and highly reliable handling by the integration of temperature docks for thermoresponsive materials, positive displacement pipettes for viscous materials, and an optional tip touch dock to remove excess material from the pipette tip. The validation and verification of mixtures are performed by a fast and inexpensive absorbance measurement of Orange G. This protocol presents results to obtain 80% (v/v) glycerol mixtures, a dilution series for gelatin methacryloyl (GelMA), and double network hydrogels of 5% (w/v) GelMA and 2% (w/v) alginate. A troubleshooting guide is included to support users with protocol adoption. The described workflow can be broadly applied to a number of viscous materials to generate user-defined concentrations in an automated fashion.

This protocol serves as a comprehensive tutorial for standardized and reproducible mixing of viscous materials with a novel open source automation technology. Detailed instructions are provided on the operation of a newly developed open source workstation, the usage of an open source protocol designer, and the validation and verification to identify reproducible mixtures.

Hidrojel Tabanlı 3D Kültür Modellerini Otomatik ve StandartLaştırılmış Bir Şekilde Üretecek Açık Kaynaklı Bir Teknoloji Platformu

Current mixing steps of viscous materials rely on repetitive and time-consuming tasks which are performed mainly manually in a low throughput mode. These ...