Bu ön tedavinin genel amacı fareler üretmek ve TRPV1 kanallarının supraspinal bölgelerde duyarsızlaştırılmaktır. Bu yöntem nörofarmakolojik alanda anahtar soruları cevapyardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı supraspinal selektif TRPV1 duyarsızlaştırma oldukça basit bir şekilde indüklenen olabilir.
Bu prosedüre başlamak için, pentobarbital sodyum intraperitoneally bir fare anestezi ve düzeltme refleks kaybı olup olmadığını kontrol edin. Deri altı tedavi için, 10 gram vücut ağırlığı başına 0,1 mililitre hacminde boynun arkasına mililitre başına 20 mikrogram RTX enjekte edin. Kontrol grubu için, aynı şekilde araç enjekte edin.
İğnenin 3 ila 3,5 milimetrelik ucunu ortaya çıkarmak için tek kullanımlık 27 göstergeli iğneyi metal bir tüpten geçirin. Daha sonra farenin squamosal kemiklerini parmaklarınızla sıkıca tutun. İğneyi kafa derisiüzerinde yanal olarak hareket ettirin ve iğne ucu dikişüzerine bağlı olduğu için sagittal sütür bulun.
Ucunu yaklaşık bir milimetre sağa taşıyın, sonra uç rostrally koronasütü bulmak için taşıyın. Daha sonra iğneyi yavaşça ve dikey olarak takın. RTX çözeltisini 10 saniyeden fazla enjekte edin ve ardından 10 saniye daha tutun.
Daha sonra, yavaş yavaş iğne çekin ve ev kafesi için fare dönün. RTX enjeksiyonundan bir hafta sonra, testten en az 60 dakika önce fareyi test odasına aktarın. Testten en az 30 dakika önce, fareyi çevreye alışması için pleksiglas bir kafese yerleştirin.
Testten 20 dakika önce asetaminofeni kilogram başına 300 miligram olarak fareye intraperitoneal olarak verin. Fareyi küçük bir bez torbada gevşek bir şekilde tutun ve sağ arka pençenin topuğunun içine 30 kalibrelik bir iğne yerleştirin. İğneyi subkutan olarak yürüyüş yastığının yakınına doğru ilerletin ve mililitre başına 0,05 mikrogram 20 mikrolitre RTX çözeltisi enjekte edin.
Daha sonra, her beş dakikalık bloketkilenen pençe glabrous bölgesinde yalama ve ısırma davranışı dönemini ölçmek. RTX enjeksiyonundan bir hafta sonra fareyi test odasına aktarın. Fareyi pleksiglas bir kafese yerleştirin.
Kuyruk tabanından 1,5 ve 2,5 santimetre lik noktaları işaretleyin. Daha sonra fareyi küçük bir bez torbada gevşek bir şekilde tutun ve künt bir sondayla noktalara basınç uygulayın. Doku hasarını önlemek için 250 gram kesme basıncı uygulandığını lütfen unutmayın.
Kaçış davranışını ortaya çıkarmak için gereken basıncı belirleyin ve iki noktada belirlenen basıncın ortalamasını alarak nosiseptif eşiği hesaplayın. Prosedürleri her 15 dakikada bir tekrarlayın. Taban çizgisini aldıktan sonra, asetaminofeni kilogram başına 300 mikrogram olarak fareye intraperitoneal olarak verin, ardından 90 dakikaya ulaşana kadar kuyruk basınç testini her 15 dakikada bir tekrarlayın.
Bu iki rakam, SC veya ICV tedavi farelerin RTX intraplantar enjeksiyonuna yanıt verme yeteneğini göstermektedir. Araçla tedavi edilen farelerin yalama ve ısırma davranışları ilk 10 dakikada dikkat çekiciydi. SC önceden tedavi edilmiş fareler hiç yalama ve ısırma davranışı göstermemesine rağmen, ICV önceden işlenmiş fareler normalde RTX plantar enjeksiyonuna yanıt verecektir.
Ayrıca, asetaminofen intraperitoneal uygulama araç ICV tedavi farelerin yalama ve ısırma davranışını azalttı, ancak RTX ICV tedavi fareler. Bu grafik kuyruk basınç testinde kilogram başına 300 mikrogram asetaminofenin analjezik etkilerini göstermektedir. Asetaminofen her iki testte de araç tedavi edilmiş farelerin nosiceptive yanıtını azalttı, ancak RTX ile önceden tedavi edilen farelerde asetaminofenin analjezik etkileri inhibe edildi.
Bir kez hakim, Bu ICV enjeksiyon tekniği diğer ilaçlar için uygulanabilir. Resiniferatoksin ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın ve kullanım sırasında koruma için lastik eldiven ve gözlük kullandığınızdan emin olun.
