이 전처리의 전반적인 목표는 마우스를 생성하는 것이고 TRPV1 채널은 초피척추 지역에서 둔감하다는 것입니다. 이 방법은 신경 약리학 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 초피탈 선택적 TRPV1 둔감이 매우 간단한 방법으로 유도 될 수 있다는 것입니다.
이 절차를 시작하려면, 펜토바르비탈 나트륨과 마우스를 인트라테톤으로 마취하고 오른쪽 반사의 손실을 확인합니다. 피하 치료를 위해, 10 그램 체중 당 0.1 밀리리터의 부피로 목 뒤쪽에 밀리리터 당 20 마이크로 그램의 RTX를 주입하십시오. 대조군의 경우 동일한 방법으로 차량을 주입합니다.
일회용 27 게이지 바늘을 금속 튜브를 통과하여 바늘의 3~3.5밀리미터 끝을 노출시합니다. 그런 다음 손가락으로 마우스의 적개 뼈를 단단히 잡습니다. 바늘을 두피에 측면으로 옮기고 바늘 끝이 봉합사에 매여 있는 동안 처진 봉합사를 찾습니다.
팁을 오른쪽으로 약 1밀리미터 이동한 다음 장밋빛으로 팁을 이동하여 관상 봉합사를 찾습니다. 그 후 바늘을 천천히 수직으로 삽입합니다. RTX 용액을 10초 이상 주입하고 10초 동안 더 길게 누를 수 있습니다.
그 후, 천천히 바늘을 철회하고 홈 케이지에 마우스를 반환합니다. RTX 주입 후 1 주일, 테스트 하기 전에 적어도 60 분, 테스트 룸에 마우스를 전송. 테스트 30분 이상 전에 마우스를 플렉시유리 케이지에 배치하여 환경에 적응할 수 있도록 합니다.
그런 다음 테스트 20 분 전에, 마우스 내역에 킬로그램 당 300 밀리그램에서 아세트 아미노펜을 투여하십시오. 마우스를 작은 천 가방에 느슨하게 잡고 오른쪽 뒷발의 발 뒤꿈치에 30 게이지 바늘을 삽입합니다. 바늘을 보행 패드 근처로 피하하여 밀리리터당 0.05 마이크로그램으로 RTX 용액 20마이크로리터를 주입합니다.
그 후, 각 5분 블록에서 영향을 받는 발의 글래브로스 영역에서 핥고 물고 있는 동작의 기간을 측정한다. RTX 주입 후 1 주일, 테스트 룸에 마우스를 전송. 마우스를 플렉시글라스 케이지에 놓습니다.
꼬리 의 기지에서 1.5 및 2.5 센티미터에서 반점을 표시합니다. 다음으로, 작은 천 가방에 마우스를 느슨하게 잡고 무딘 프로브로 반점에 압력을 가합니다. 조직 손상을 피하기 위해 250그램의 차단 압력이 부과됩니다.
탈출 동작을 유도하는 데 필요한 압력을 결정하고 두 지점에서 결정된 압력을 평균화하여 모각 임계값을 계산합니다. 15분마다 절차를 반복합니다. 기준선을 얻은 후, 킬로그램당 300 마이크로그램에서 마우스 내역으로 아세트아미노펜을 투여한 다음, 90분에 도달할 때까지 15분마다 꼬리 압력 테스트를 반복합니다.
이 두 수치는 RTX의 인트라플라타르 주입에 대한 SC 또는 ICV 처리마우스의 반응성을 보여준다. 차량 처리 마우스의 핥기 및 물어 뜯는 행동은 처음 10 분에서 놀랍습니다. SC 전처리된 마우스는 핥기 및 물기 행동을 전혀 보여주지 않았지만, ICV 전처리된 마우스는 일반적으로 RTX의 발바닥 주입에 반응했습니다.
더욱이, 아세트아미노펜의 복막 투여는 차량 ICV 처리 마우스의 핥기 및 물기 행동을 감소시키지만 RTX ICV 처리 마우스에서는 감소시키지 않았다. 이 그래프는 꼬리 압력 테스트에서 킬로그램당 300 마이크로그램에서 아세트아미노펜의 진통 효과를 보여줍니다. 아세트아미노펜은 두 테스트에서 전처리된 마우스의 자각 반응을 감소시켰지만, 아세트아미노펜의 진통 효과는 RTX로 ICV를 전치료한 마우스에서 억제되었다.
일단 마스터, 이 ICV 주입 기술은 다른 약물에 대 한 적용 될 수 있습니다. 수지포톡신으로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으며 취급 시 보호를 위해 고무 장갑과 안경을 사용해야 한다는 것을 잊지 마십시오.