Bu yöntem, migren hastalarının başlıca şikayeti olan fotofobi için klinik öncesi davranışsal bir vekil sağlar. Bu tekniğin temel avantajı, algılamanın otomatik olması ve dolayısıyla çok uygun olmasıdır. Ayrıca, hafif isteksizlik ve kaygı, bu testlerin yapılmasıyla ayırt edilebilir.
İlk gün, açık / koyu tahlil cihazını açın. Işık yoğunluğunu 27.000 lüks olarak ayarlayın. Koyu renkli kesici ucu açık/koyu renkli odaya yerleştirin.
İzleme yazılımını açın ve yeni bir protokol ayarlayın. Yeni protokol ayarında, süreyi 30 dakika olarak ayarlayın. Yeni analiz ayarında, veri kutularını süreye göre 300 saniyeye ayarlayın.
Yeni bölge ayarında, önceden tanımlanmış bölgeleri seçin. İkisini ve ardından yatayı seçin. Odanın kayıt için yatay olarak iki eşit boyutlu bölgeye bölünüp bölünmediğini kontrol edin.
Testten önce, fareleri bir saat boyunca test odasına alıştırmak, farelerin sirkadiyen ritmini bozmamak için oda ışığını açık tutun. Farelerin test odası ortamına tam olarak alışmasına izin vermek için açık/koyu tahlil için tüm ekipmanların açık olduğundan emin olun. Veri al'ı seçin, fare kimliklerini girin ve protokolü başlatın.
Açık/koyu renkli odaya ve koyu renkli ek parçaya erişmek için çekmeceyi ses azaltma kabininin dışına çekin. Yavaşça odanın ışık bölgesine bir fare yerleştirin ve çekmeceyi kabinin içine itin. Yazılımın fareyi hemen algıladığından ve etkinliği kaydetmeye başladığından emin olun.
Kaydın 30 dakika sonra otomatik olarak durmasını bekleyin. Fareyi ev kafesine geri döndürün. Önceki farenin bıraktığı koku alma ipuçlarını ortadan kaldırmak için odayı ve koyu renkli eki alkol kokusu mikrop öldürücü tek kullanımlık mendiller kullanarak temizleyin.
Dördüncü günde, birinci günde gerçekleştirilen tüm adımları tekrarlayın. Yedinci günde, birinci günde gerçekleştirilen adımları tekrarlayın, ancak yalnızca farelerin alışkanlığına kadar. Alışkanlıktan sonra, fareleri CGRP intraperitoneal ile uygulayın.
Sonra fareleri ev kafeslerine geri döndürün. 30 dakika sonra, protokole devam edin ve fareyi daha önce de belirtildiği gibi açık / karanlık odada çalıştırın. Odayı ve koyu renkli kesici ucu daha önce açıklandığı gibi temizleyin.
10. günde, birinci günde gerçekleştirilen tüm adımları tekrarlayın. Aparatı açın ve ışık yoğunluğunu 27.000 lüks olarak ayarlayın. İzleme yazılımını açın ve daha önce gösterildiği gibi yeni bir protokol ayarlayın.
Yeni bölge ayarlarında, birini ve ardından ortayı seçin. Çevreyi 3,97 santimetre ve merkezi 19,05 x 19,05 santimetre olarak ayarlayın. Fareleri daha önce gösterildiği gibi test odasına alıştırmak.
Fareleri CGRP intraperitoneal ile uygulayın. Fareleri ev kafeslerine geri döndürün. 30 dakika sonra protokolü başlatın.
Çekmeceyi ses azaltma kabininin dışına çekin ve fareyi açık alan odasının ortasına yavaşça yerleştirin. Çekmeceyi kabinin içine itin. Farenin davranışını 30 dakika boyunca izleyin, ardından fareleri ev kafeslerine geri döndürün.
Aparatı daha önce gösterildiği gibi temizleyin. Sonuçlar, CGRP'nin intraperitoneal enjeksiyonunun, CD1 ve C57 siyah 6J farelerde açık / karanlık tahlilde ışık bölgesinde geçirilen süreyi önemli ölçüde azalttığını, ancak CD1 ve C57 siyah 6J farelerde açık alan tahlilinde merkezde geçirilen fareleri etkilemediğini ortaya koymuştur. CGRP ile tedavi, farelerin karanlık bölgede dinlendiği süreyi de arttırdı, ancak hem CD1 hem de C57 siyah 6J farelerde ışık bölgesinde değil.
Posterior talamik çekirdeklerdeki nöronların optik uyarılması, kanal hodopsin-2 enjekte edilen farelerde ışık / karanlık tahlilinde ışık bölgesinde geçirilen süre farelerinde, kontrol virüsü enjekte edilen farelere kıyasla karşılık gelen bir azalmaya yol açmıştır. Kontrol virüsü enjekte edilen farelere kıyasla, karanlık bölgede dinlenme süresinde bir artış gözlendi, ancak ışık bölgesinde değil, kanalrodopsin-2 enjekte edilen farelerde de gözlendi. Fareyi açık/karanlık odaya yerleştirirken, mümkün olduğunca fazla stresi önlemek için farenin nazikçe kullanılması gerektiğini hatırlamak önemlidir.
Bu teknik, migren ve diğer fotofobi ile ilişkili bozuklukların altında yatan mekanizmaları keşfetmenin ve potansiyel terapötikler için klinik öncesi etkinliği test etmenin yolunu açacaktır.
