Kademeli soğutma protokolü, mevcut deneysel yöntemlere göre daha yavaş bir soğutma hızına sahiptir. Bu model klinik olarak ilgilidir, çünkü sıcaklığı hedefleme süresi insan aralığına daha yakındır. Bu tekniklerin temel avantajı basitlikleri ve ucuzluklarıdır.
Ayrıca, bu modeller uzman ekipman gerektirmez. Kademeli modelden elde edilen klinik soğutma oranı, inme hastaları için bir tedavi önlemi olarak hipotermi yararları hakkında daha bilinçli preklinik araştırma sağlayacaktır. Anestezi edilmiş bir sıçanı, burun bir koni içinde sırtüstü pozisyonda cerrahi bir ısı paspası üzerine yerleştirerek başlayın.
Burnu cerrahi bantla sabitleyin. Kürkü sağ alt karın bölgesinden tıraş edin ve deri altı 200 mikrolitre% 0.05 bupivacaine lokal anestezik olarak enjekte edin. Yeni tıraş edilmiş bölgeye antiseptik çözelti uygulayın.
Sağ karın bölgesi proksimal boyunca sağ uyluğa kadar iki santimetrelik uzunlamasına bir kesi yapın ve ventral uyluk kırışıklığındaki boşluğu açığa çıkaracak kadar derine ve hemostatlar ve tokmaklar kullanarak cildin altında bir veri kaydedici cihazı tutacak kadar büyük bir cep oluşturun. Sıcaklık izleme veri kaydedici cihazını cebe yerleştirin ve kas ve cildi kapatmak için 5-0 dikiş kullanın, veri kaydedicinin ısıtma paspasına dayanmamasını sağlamak için. Aktif hipotermiyi teşvik etmek için, ilk olarak sıçanın başından 20 santimetre ve alt karın bölgesinden 120 santimetrelik bir kelepçe ile bir retort standı yerleştirin ve sıçanın alt sırtına yönelik fanlarla her standa dakikada en az 4.000 dönüş ayarına sahip 60 milimetre 12 voltluk bir fan takın.
Isı paspasını hipotermi başlatmak için istenen hedef sıcaklığa ayarlayın ve her iki fanı da açın. Eğilimli pozisyonda, daha hızlı soğutma indüksiyonu için kürkü karıştırırken ve rektal sıcaklığı yakından izlerken sıçanın alt sırtına her beş dakikada bir üç veya dört sprey% 70 etanol uygulayın. Rektal sıcaklık hedef sıcaklığın bir derecesi içinde olduğunda etanol uygulamasını durdurun.
Sıcaklık hedefin 0,5 derecesi içinde olduğunda, aşırı soğutma olmadan sıcaklığın hedefe yavaşça düşmesini sağlamak için fanları kapatın. Aşırı soğutma durumunda, bir fanı bir hayvan ısı lambası ile değiştirin ve hayvanı hedef sıcaklığa hafifçe ısıtmak için ısı lambasını kullanın. Hedef sıcaklığa ulaşıldıktan ve stabilize edildikten sonra, kalan hipotermi dönemi için sıcaklığı izleyin.
Hipotermik dönemin sonunda, ısı paspasını 37 santigrat dereceye ayarlayın ve hayvanın 30 dakikalık bir süre boyunca termoregüle olmasına izin verin. Klinik olarak ulaşılabilir kademeli başlangıçlı hipotermiyi teşvik etmek için, önceden belirlenmiş belirli bir zaman dilimi içinde hipotermi elde etmek için çekirdek sıcaklığı düzenlenmiş homeotermik ısı paspasının sıcaklığını küçük artışlarla azaltın. Hedef sıcaklığa ulaşıldığında, herhangi bir harici soğutma olmadan istenen aralık için hedef sıcaklığı koruyun.
Hipotermik dönemin sonunda hayvanı yeniden ısıtmak için, ısı paspasını farenin istenen zaman aralığında 37 santigrat dereceye kadar yeniden ısınmasına izin vermek için ayarlayın. Her iki hipotermi deneyinin tamamlanmasından sonra, kaydedilen vücut sıcaklıklarının analizine izin vermek için veri kaydediciyi çıkarın. Bu analizde hipotermi, gösterildiği gibi 15 dakikada 32,5 santigrat derece hedef sıcaklığa hızlı soğutma ile elde edildi.
Hedef sıcaklığın yaklaşık 0,5 santigrat derece üzerinde soğutmayı durduramadığı için hafif bir sıcaklık fazlalık gözlenebilir. Hedef sıcaklık 30 dakika boyunca korundu ve 1,5 saatte yeniden ısıtmaya başlandı. Bu deneyde, kademeli hipotermi indüksiyon yaklaşımı, 33 santigrat derecelik hedef sıcaklığa iki saat içinde ulaşılabilmesi için kullanıldı.
Hedef sıcaklık 2,5 saatte yeniden ısınmadan önce 30 dakika boyunca korundu. Kademeli soğutma tekniği, sıçanlarda iskemik inmeden sonra klinik olarak daha alakalı bir soğutma oranının intrakraniyal basınç yükselmesini önleyip önlemeyeceğini araştırmamıza yol açar.
