Sıçanlarda derin hipotermik dolaşım durmasının kurulması. Derin hipotermik dolaşım durması olan DHCA, kompleks konjenital kalp hastalığı ve aort ark hastalığı ameliyatları sırasında rutin olarak uygulanır. Bu çalışma, sıçanlarda DHCA kurulması için bir yöntem sağlamayı amaçlamaktadır.
Protokoller kurumsal bir inceleme aldı ve Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi, Fuwai Hastanesi, Çin Tıp Bilimleri Akademisi'nden onay aldı. Hazırlık çalışmaları. CPB devrelerinin, morf damlalığından, makaralı pompadan, ısı eşanjöründen, membran oksijenatörden, bağlantı tüpünden modifiye edilmiş bir rezervuar ve devreye bağlı bir su tankı içerdiğinden emin olun ve bir mililitre heparin sodyum ve bir mililitre salin ile 12 mililitre hidroksi nişasta yapar, makaralı pompa yavaşça dönerken, devreyi 40 mililitre astarlama çözeltisi ile astarlayın.
İki, anestezi ve kanülasyon. Tüpü vantilatör ve yan parametrelerle bağlayın. Elektrikli bir ısıtma battaniyesi ve sağa koyun ve bantla sağa bakın.
Kuruluğu önlemek için gözlere oftalmik merhem uygulayın. Sağ kasık bölgesindeki, sağ servikal bölgedeki ve kuyruktaki saçları tıraş makinesi ile tıraş edin. Daha sonra cildi aldehit ve alkolle dezenfekte edin.
Cildi ve sol kasık bölgesini kesin ve sol femoral ven ve arteri açığa çıkarmak için kas ve doku yumuşak kemiğini diseke edin. Arteri dikkatlice ayırın. 22 gauge intravenöz kateteri sol femoral artere kanüle edin.
İpek ile bağlı arter ve kateter. Pıhtılaşmayı önlemek için kanülü yıkamak için heparin içeren salin kullanın. Kan basıncını izlemek için kateteri pres sensörüne bağlayın.
Kuyruğun derisini kesin ve daha sonra cerrahi alanın ortasındaki kuyruk arterini ortaya çıkarmak için kuyruk arterinin yüzeysel türlerini kesmek için bir neşter kullanın. Kuyruk arterini 22 gauge intravenöz kateter ile kanüle edin. Arter ve kateteri ipek ile ilişkilendirin.
Pıhtılaşmayı önlemek için kateteri yıkamak için heparin içeren salin kullanın. Sağ juguler damarın derisini kesin, ardından damarı açığa çıkarmak için kas ve dokuyu ayırın. Sağ dış juguler venin içine 16 gauge ev yapımı çok yaşlılık intravenöz kateter yerleştirin ve dikkatlice sağ inferior vena kava veya sağ atriyuma koyun.
Kontaminasyonu önlemek için sağ dış damarın her kanüllenmiş bölgeyi nemli toplarla kapladığı heparin sodyum uygulayın. Üçüncüsü, devreyi kuyruk arterindeki kateterle bağlayın ve pompayı dakikada bir ila iki mililitre düşük hızda tutun. Daha sonra rezervuarı sağ dış juguler vendeki kateter ile bağlayın.
Rezervuarda her zaman yaklaşık bir santimetrelik bir kan seviyesi olduğundan emin olun. Su deposunu açın ve önce su sıcaklığını 37 santigrat olarak ayarlayın. Kan basıncı sabit kaldıktan sonra, akış pompasını dakikada 80 ila 100 mililitreye kadar yavaşça artırın.
Dört, soğutma. Oda sıcaklığını yaklaşık 20 santigrat dereceye ayarlayın. Bu tek kullanımlık eldivenlere buz küpleri koyun ve sonra sağ başa ve yanlara koyun.
Tankın sıcaklığının, pirincin rektal sıcaklığına göre gerçek zamanlı olarak önerildi. Ventilatörün ilgili parametrelerini kan gazı analizi sonuçlarına göre uygun şekilde değiştirin. Beş, derin hipotermi dolaşım durması.
Daha sonra rektal sıcaklık 15 ila 20. santigrat dereceye düşer. Buz torbasını değiştirin ve dolaşım durması sırasında derin hipoterminin korunmasını sağlamak için eldivenleri atın. Makaralı pompayı durdurun.
Rezervuarı çevre ile temas halinde tutun ve kanı yavaşça dış juguler damardan rezervuara boşaltın. Kan basıncı reformuna dikkat edin. Kan basıncı ve kalp atışı olmadığından, drenajı durdurun ve rezervuarı kapalı tutun.
Vantilatörünü kapatın. Altı, ısınma ve reperfüzyon. Tüm tek kullanımlık eldivenleri çıkarın ve oda sıcaklığını 25 santigrat dereceye yükseltin.
Venöz drenaj tüpünün kesilmesini sürdürürken hafıza oksijen interventilasyonunu geri yükleyin. Rezervuardaki kanın yavaşça doğru gövdeye geri döndüğünden emin olmak için makaralı pompayı açın. Rezervuardaki kan seviyesi bir santimetre kaldıktan sonra ventilatörü açın.
Drenaj tüpünü kullanarak kanı sağ atriyumdan rezervuara yavaşça boşaltın. Isıtma lambasını, ısıtma yastığını ve su deposunu açın. Su deposunun sıcaklığını 25 santigrat dereceye ayarlayın.
Ardından zamanında sol sıcaklığa ayarlayın. Rektal sıcaklık 34 santigrat dereceye döndükten sonra ısıtma lambasını çıkarın. Yedi, CPB'den ayrılıyor.
Pompa akış hızının silindirini yavaşça ve kademeli olarak azaltın ve vena cinsi hızını dakikada bir mililitreye düşürerek akış hızına ayarlayın. Rezervuarı çevre ile temas halinde tutun. Kalan kanı dakikada bir mililitre akış hızına sahip bir devrede demleyin.
Hafızada oksijenlenmesini ve makaralı pompayı durdurun. Bir süre mekanik ventilasyon ve derin bir anesteziden sonra ötenazi. Temsili sonuçlar.
Kontrol grubu olarak, normal sıcaklık CPB, NtCPB, sıçan. Dolaşım durması olmadan, tüm prosedür boyunca stabil bir ortalama arter kan basıncı MAP ve vücut ısısı gösterdi. DHCA sıçanlarının MAP'si kalp durması sırasında azalırken.
DHCA sıçanlarının sıcaklığı soğutma aşamasında hızlı bir şekilde düştü ve döner fazda kademeli olarak iyileşti. DHCA devresinin sütten kesilmesi, DHCA sıçanlarının sıcaklığı normale döndü. Yukarıdaki veriler, DHCA prosedürümüzün kliniklerdeki hastaların gerçek sıcaklık ve MAP değişikliklerini taklit ettiğini göstermiştir.
DHCA işlemcisinin ve yükselişinin etkisi kan gazı analizi ile araştırıldı. Birincil çözelti ile tam kan temasından sonra, hemoglobin konsantrasyonu her iki grupta da desilitter başına altı gramdan yüksekti. DHCA yüzeyinden sütten kesilerek, CPB devresinde kalan kanın sağa doğru yeniden infüze edilmesi nedeniyle desilitter başına dokuz grama yükseldi.
Hematokrit HCT, HB'ye benzer bir eğilim gösterdi. DHCA reperfüzyonundan sonra laktat asidi hızlı bir şekilde artmıştır ve bu DHCA grubunda daha belirgindi. DHCA prosedüründen sonra pH azaldı, bu da büyük olasılıkla laktat asit birikiminin bir sonucuydu. Tüm deney boyunca, sodyum, klorür, potasyum iyonları ve glikoz konsantrasyonu her 10 noktada önemli farklılıklar göstermedi.
Bu sonuç, DHCA'nın sadece laktat asidine artmış asidi indüklediğini, ancak kan pH'ını ve hemoglobin, hematokrit, sodyum iyonları, klorür iyonları, potasyum iyonları ve glikoz konsantrasyonunu etkilemediğini göstermektedir. DHCA'nın nöronal otofaji üzerindeki etkisini değerlendirmek için, transmisyon elektroskobunu kullandık ve şaşırtıcı bir şekilde DHCA sıçanlarının hipokampüsündeki otofagozomların sayısını bulduk ve arttırdık. Yukarıdaki veriler, DHCA modelimizin kliniklerdeki hastaların gerçek sıcaklık ve MAP değişikliklerini taklit ettiğini göstermiştir.
Bu model sistemik inflamatuar yanıt sendromunu, nöroinflamasyonu vb. araştırmak için uygulanabilir.
