Protokol, yerleşik insan hastalığına benzeyen abdominal aort anevrizmasının fare modelini ve intravenöz kateter yoluyla tekrarlayan tedaviyi birleştirir. Anevrizmanın ilerlemesini engellemek için klinik ihtiyacı ele almak. Protokol, farelerde anevrizma ilerlemesini azaltmak için ilaçların test edilmesi için aort çapı hacminin ve morfolojisinin genişlemesi hakkında kapsamlı bilgiler de dahil olmak üzere eksiksiz bir iş akışı sağlar.
Ayrıca 3D ultrason. 3D ultrason, anevrizmaların daha az tat bazlı fare modellerinde geliştiği infrarenal aortu ölçmek için uyarlanabilir. Juguler ven kateterizasyonu, intravenöz enjeksiyon gerektiren herhangi bir set için kullanılabilir.
12 ila 14 haftalık anestezi uygulandıktan sonra, APOE eksikliği olan posta faresi, sırtın sol üst tarafındaki küçük alanı, omuz bıçağının üzerinde, tıraş edilen bölgeyi dezenfekte etmek için% 10 povidon iyot çözeltisi uygulayarak tıraş edin. Orta omurga ve sol skapuler çizgi arasında bir neşter ile üst sırtın derisinde bir santimetre enine kesi yapın. Cildi forseps ile tutmak ve künt kavisli makas kullanmak.
Sol arka bacağa doğru iterek deri altı bir cep yapın. Makası açın ve cebi genişletmek için açık makası kesimden çekin. Kesi bölgesi tarafından salınan anjiyotensin ikisinin potansiyel girişimini en aza indirmek için pompayı akış moderatörü kuyruğa doğru olacak şekilde cebe yavaşça yerleştirin.
Daha sonra yarayı 4.0 emilebilir kesilmiş dikişle kapatın. Vasküler erişim sistemini kullanarak. Kateteri, üç Fransız tarafını istenen uzunlukta keserek ve kateteri vasküler erişim sisteminin veya VAS'ın 22 gauge metal konektörünün üzerine en az üç milimetre örtüşecek şekilde iterek hazırlayın.
Bağlantı noktasını korumak için alüminyum kapağı düğmenin üzerine yerleştirin. Kürkü ventral taraftaki boynun sağ tarafından ve anestezi uygulanan bir farenin üst sırtının sağ tarafından tıraş edin. Daha sonra tıraş edilen bölgeyi dezenfekte etmek için povidon iyot çözeltisini uygulayın.
Juguler ven hazırlığı için, sağ klavikula üzerinde boynun sağ tarafında 0.5 santimetre enine süper klaviküler cilt kesisi yapın. Bağ dokusunu ayırmak için künt mikrocerrahi cımbız kullanın ve dış juguler veni açığa çıkaran yağları kullanın. Yağdaki küçük kan damarlarını yırtmaktan kaçının.
Geminin beş milimetresini pektoral kaslara yakın izole edin. Daha sonra bükülmüş mikro cımbız kullanarak damarın altındaki dokuyu künt disseke edin ve 6.0 ipek ligatürlerin iki ila üçünden geçirin. Ligatürlere tutun ve siteye bir damla salin ekleyin.
Düğme implantasyonu için fareyi ters çevirin ve yüzüstü konuma getirin. Tıraş edilen bölgeyi dezenfekte etmek için povidon iyot çözeltisini uygulayın. Orta omurga ve sağ skapuler çizgiler arasında bir neşter ile üst sırtta bir santimetre sagital kesi yapın.
Daha sonra, künt diseksiyon ile kesi bölgesinin etrafındaki VAS'ın boyutundan biraz daha büyük dairesel bir cep yapmak için künt kavisli makas kullanın. Makası hafifçe açarak sağ omuz üzerinden boyundaki ventral insizyona doğru kraniyal olarak tünel açmak için künt kavisli makası kullanın. Sonra açık makası dışarı çekin ve daha fazla içeri itilirken eylemi tekrarlayın.
Tünel ventral insizyona ulaştığında, ventralden dorsal insizyona cerrahi kelepçelerden geçin. Kateterin üç Fransız ucunu kelepçeye takın ve kateteri tünelden çekin, böylece ventral boyun insizyonunun dışında kalır ve VAS dorsal insizyonda yerinde olur. Daha sonra VAS cerrahi keçe diskini deri altından sırttaki kesiye yerleştirin.
Koruyucu alüminyum kapağı çıkarmak için taşıma aletinin çatal ucunu kullanarak kateter kontrolünü açın ve düğmeyi tutmak için manyetik ucu kullanın ve sıvı bir Fransız ucundan sızana kadar ilgili enjektöre bağlı bir mililitrelik şırınga ile salin veya PBS enjekte edin. Düğmeye cebinizde kaudal olarak basın ve cildi VA'nın flanşı altındaki VA'ların keçe diski üzerinden, kraniyal olarak iki dört oh kesilmiş dikişle kapatın. Damar kateterizasyonu için, fareyi sırtüstü pozisyona geri çevirin ve kesilmiş tarafa bir damla salin ekleyin.
Ligatürleri ayırın ve kateterin ve juguler venin etrafındaki ilk bağı, damarı bağlamak ve kateteri dışarıya sabitlemek için mümkün olduğunca kraniyal olarak iki ila üç düğümle bağlayın. İkinci bağı pektoral kaslara mümkün olduğunca yaklaştırın. Mikro makas kullanarak, keskin bir uç oluşturmak için çapraz bir açı kesin, böylece kateterin üç ila beş milimetresi damarda olacaktır.
Daha sonra, güvenli kraniyal ligatürü çekerek ve iğneyi damara paralel iterek, salinle doldurulmuş bir mililitrelik bir şırıngaya tutturulmuş 27 gauge iğne kullanarak damardaki bir deliği delin. Daha sonra, güvenli kraniyal ligatürü çekerek ve bükülmüş cımbızı kullanarak kateteri damarın içine kaydırarak kateteri aynı şekilde damara yerleştirin. Kateteri damarla aynı hizaya gelene kadar itin.
Kateter yerleştirilen bölgenin üzerine ikinci bağı iki ila üç düğümle bağlayın ve kan sızıntısı olup olmadığını kontrol edin. Her iki ligatürdeki fazla ucu mikro makasla kesin ve bir damla salin ekleyin. Daha sonra cildi 4.0 emilebilir kesilmiş dikişlerle kapatın.
Fareye, daha önce gösterildiği gibi istenen miktarda inhibitör veya PBS salini enjekte edin. Şırıngayı VAS'tan ayırırken piston üzerindeki pozitif basıncı koruyun. Kurtarma sonrası fareleri izleyin.
Ultrason yazılımını kullanarak ayarları 30 DB görüntü derinliği 9,0 milimetreye ve genişlik 8,08 milimetreye çıkaracak şekilde ayarlayın. Daha sonra, sahnedeki dört elektrokardiyogram veya EKG elektrodunun her birine bir damla elektrojel ekleyin ve fare ekstremitelerini bunlara bantlayın. Sıcak ultrason jelini farenin karnına yayın ve vericiyi karın ile temas ettirmek için indirin.
Aortu dairesel, hızlı titreşen bir damar olarak tanımlayın. Sol renal arteri bulun ve ilgilenilen alanda herhangi bir girişimde bulunmadığından emin olmak için alanı kraniyal olarak 12 milimetreye kadar manuel olarak inceleyin. Sol renal artere geri dönün.
Daha sonra probu arterden kraniyal olarak altı milimetreye ayarlayın. 3D ultrason edinimi için solunum geçidini% 25 gecikmeye ve% 50'lik bir pencereye ve EKG tetikleyicisini 50 milisaniyeye ayarlayın. 3D seçeneklerinden tarama mesafesini 0,076 milimetrelik bir adım boyutuyla 11,96 milimetreye ayarlayın.
157 kare elde ettikten sonra, görüntüyü kaydetmeden önce görüntü kalitesini kontrol etmek için kaydırın. 2D çap kazanımı için solunum geçidi ve EKG tetiğini kapatın ve süper renal aortun 12 milimetrelik uzamasında en büyük çapa sahip alanı manuel olarak bulun. Ekranda B moduna basın ve B modu görüntüsü elde edin.
Ek olarak, dönüştürücüyü hareket ettirmeden EKV görüntüsü için, aynı sitede sistemin standart ayarlarıyla bir EKV görüntüsü alın. Süper renal anevrizmaların gelişimi ve ilerlemesi sekizinci gün ve 27. günde ultrason ile izlendi. 27. günün trikrom boyası aort, duvar diseksiyonu ve intramural trombüs ile oluşan anevrizmanın morfolojisini göstermektedir.
Sekizinci günde abdominal aort anevrizması veya AAA insidansı ve ilk dokuz gün içinde aort rüptürleri farelerin% 9'unun AAA oluşturamadığını göstermiştir. Bununla birlikte, farelerin% 35'i kateter implantasyonundan önce aort rüptürleri yaşamıştır, bu nedenle AAA hastalığı olan kalan farelerin toplam% 56'sının tedavi gruplarına tabakalaşması için minimum düzeyde olmasına neden olmuştur. PBS kontrolü ile tedavi edilen farelerde başlangıçta hızlı oluşan ve orta derecede büyüyen anevrizmaların ilk genişlemesi ile daha fazla hastalık ilerlemesi arasında ters bir ilişki gözlenmiştir.
Örnek ultrason sonuçları, GSK 4 84 tedavisinin AAA ilerlemesini inhibe ettiğini, anevrizmaların fareleri büyütmeye ve kontrol etmeye devam ettiğini ortaya koymuştur. Kateter açıklığı, kateter bağlantısının ven veya vasküler erişim düğmesinden kesilmesi, anevrizma bölgesinde bilinmeyen ilaç konsantrasyonları ile deri altı boşluğuna ilaç verilmesiyle sonuçlandığı için gereklidir. Deneyin sonunda fareler kurban edildiğinde, su ve diğer dokular histolojik olarak araştırılabilir ve hedef ilaç etkilerini karakterize etmek için kan analizi yapılabilir.
