İskemik inmenin patofizyolojisini anlamak, insanlarda yüksek kaliteli doku verilerinin bulunmaması nedeniyle sınırlıdır. Bu tür örneklerin elde edilmesi imkansız olduğundan, iyi kontrol edilen hayvan modeli çalışmaları bir vekil olarak hizmet edebilir. Bu protokolde kullanılan tavşan modeli, iskemik inmenin sorgulanması için tutarlı yüksek kaliteli veriler sağlar.
Burada tarif edilen teknik, iskemik inme patofizyolojisi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için hemodinamik faktörlerin hassas kontrolünü ve modülasyonunu sağlar. İyi planlanmış bir prosedür, özellikle farmakolojik profilaksi ve etkili anjiyografik tekniklerin bir kombinasyonu yoluyla arterlerdeki vazospazmı hafifletmek için stratejiler kullanarak yüksek kaliteli sonuçlara yol açabilir. Başlamak için, tavşanı floroskopi uyumlu bir ameliyat masasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
Sonraki anjiyografik görünümler için konumlandırmayı optimize ederken kafayı uzatın. Vazospazmı hafifletmek için, anestezi indüksiyonundan sonra kulağın içine 0.5 inç transdermal nitrogliserin yerleştirin. Kürkü elektrikli makas kullanarak her iki kasık bölgesinden çıkardıktan sonra, cildi klorheksidin ve alkol ovma ile hazırlayın.
Cildi her zamanki steril şekilde örtün ve bilateral femoral arteriyel nabızları palpe edin. Lidokainin enjekte edildiği yerde 10 numaralı bıçakla beş santimetrelik bir cerrahi kesi yapın. Nörovasküler demeti açığa çıkarmak için künt diseksiyon kullanın ve gerekirse, erişim için yeterince büyük bir arteriyel segmenti ortaya çıkarmak için insizyonu uzatın.
Nörovasküler demetin izolasyonu üzerine, vazospazmı önlemek için artere birkaç damla% 1 lidokain damlatın. Forseps kullanarak arteri damardan ve bitişik sinirden yavaşça ayırın. Arteri, damarın ince duvarlarına kıyasla kas duvarının karakteristik görünümü ile tanımlayın.
Arteri izole ettikten sonra, damarın altındaki dik açılı forsepsleri geçirin. Daha sonra aletle iki damar halkasını kavrayın ve yavaşça arterin altından geçirin. Her birini açıkta kalan geminin yukarı ve aşağı akış uçlarına yerleştirin.
Damar halkalarını çekerek arteri yumuşak çekişe maruz bırakın ve damarı nazik diseksiyonla çıkarılacak herhangi bir artık doku için inceleyin ve başarılı erişim şansını artırın. Damarı diseksiyon yaptıktan ve anjiyokateteri hazırladıktan sonra, lidokaini tekrar damara damlatın. Arter gözle görülür şekilde genişler, Seldinger tekniğini kullanarak bir kılıfın başarılı bir şekilde erişme ve yerleştirilme şansını arttırır.
Çıkış akışını azaltarak ve erişim girişimi için damarı stabilize ederek arteri engorge etmek için aşağı akış damar döngüsüne hafif çekiş uygulayın. Daha sonra, anjiyokateterin iğnesini yavaşça maruz kalan arteriyel segmentin ortasına ilerletin. Anjiyokateter ve göbek odasında bir kan parlaması gördükten sonra, kateteri arteriyel lümene ilerletin.
Anjiyokateterin başarılı bir şekilde yerleştirilmesi üzerine, anjiyokateter lümenden ve aortun içine bir başa çıkma mikroteli ilerletin. Daha sonra anjiyokateteri telin üzerinden çıkarın ve beş Fransız ince hidrofilik kılıfla değiştirin. Üç kapağı açarak arteriyel kanın yan kol borusundan geri dönüşünü onaylayın.
Vanayı kapatın ve kılıfı% 0,9 tuzlu suyla yıkayın. Kılıf göbeğini ek bir 3.0 ipek dikiş ile bitişik cilde sabitleyin ve bu işlemi kontralateral femoral arter için tekrarlayın. Floroskopik görselleştirme altında, sol femoral kılıftan yerleştirilen 0.035 inçlik bir kayma teli üzerinde dört Fransız kayma kateterini ilerletin.
Glide kateterinin ucu proksimal sol vertebral artere yerleştirildi. Teli çıkardıktan sonra, kateteri heparinize edilmiş% 0.9 salin ile yıkayın. Tüm baş ve boynu görselleştirmek için sol vertebral artere lob büyütme altında iyotlu kontrast enjekte ederek anjiyografi yapın.
Sol vertebral enjeksiyon için, üç CC'lik bir şırıngadan yumuşak bir kreşendo ile, normal salin ile seyreltilmiş% 50 kontrast enjekte edin. Sağ vertebral arterden aşağıya ve sağ subklaviyen artere reflüyü kontrol ederek enjeksiyon miktarını belirleyin. Bu enjeksiyon sırasında, biri mikrokateter ile tıkanması gereken hedef olacak olan posterior serebral arteri veya superior serebral arteri de not edin.
0.010 inçlik bir mikrotel ile 2.4 Fransız akış yönelimli bir mikrokateter hazırlayın ve mikrotelin ucunda bir C şekli yapın. Yol haritası rehberliğinde, mikrokateteri sağ femoral kılıfı kullanarak dört Fransız kayma kateterinin içine ve telin üzerinden sağ vertebral artere ilerletin. Mikrokateteri sol vertebral arterin servikal segmentinden ilerletin.
Keskin dönüşü V2'den V3 segmentine en iyi şekilde geçmek için, mikrotel ucuna proksimal geri dönerken mikrokateteri tek başına ilerletin. Keskin dönüşü V2'den V3'e geçtikten sonra, mikrokateter genellikle proksimal bazal veya artere kolayca geçer. Bu noktada, mikroteli ilerletin ve intrakraniyal arterlerin kırılgan doğası nedeniyle mikrokateter enjeksiyonları tavsiye edilmediğinden, istenen posterior serebral ve superior serebellar arterleri seçin.
Mikrokateteri mikrotel üzerinden hedef artere daha da ilerletin ve proksimal bir pozisyon seçin, çünkü kökenindeki açılanma nedeniyle iletişim kurmak için posteriorda tipik olarak en güvenli olanıdır. Superior serebellar arterde daha derin bir pozisyon mümkündür. Hedef arterin tıkanmasını doğrulamak için sol vertebral arter kateterini başın üzerine yüksek büyütme ile enjekte ederek anjiyografiyi tekrarlayın.
Optimal görüntüleme için, tüm intrakraniyal arterlerin pasifizasyonu için yeterli olan, tipik olarak birden fazla CC içermeyen tam güçlü kontrast enjekte edin. Sabit bir pozisyonu doğrulamak için mikroteli floroskopik görselleştirme altında mikrokateterden yavaşça çıkarın. Mikrokateterin göbeğine bir stopcock yerleştirin ve kan kaybının retrograd kan akışından kaynaklanmasını önlemek için stopcock'u kapatın.
Sol femoral erişim kılıfını kullanılabilir hale getirmek için sol vertebral kateteri çıkarın. Takip eden oklüzyon döneminde, tıkayıcı mikrokateterin stabil pozisyonunu doğrulamak için aralıklı floroskopik görüntüler elde edin. Tıkayıcı mikrokateteri üç saat sonra çıkarın.
Daha sonra istenen ek süre boyunca arteriyel kan basıncı ölçümü ve modülasyonuna devam edin. Kan basıncı değişkenliğini izlemek için aorttaki balon kateterini şişirin ve söndürün. Acil beyin hasadı ile akut prosedürlerde, kalvaryumu oksipital sırttan başlayarak ve beyin bozulmadan toplanana kadar önden çalışarak rongeurlarla parça parça bir şekilde çıkarın.
İstenilen doku analizinin türüne bağlı olarak beyni formalin veya flaş dondurucuya yerleştirin. Tüm hayvanlarda, beyin başarıyla toplandı ve sağ beyincikte enfarktüsü gösteren histopatolojik analiz yapıldı. Kan basıncı, infrarenal aort içine yerleştirilen bir Fogarty balon kateterinden izlendi ve yaklaşık bir saatlik izlemeden elde edilen veriler, balon enflasyonundaki değişikliklerle gerçek zamanlı arteriyel basınç değişikliklerini gösteriyor.
Kan basıncının kısa süreli takibi, kalp döngüsü boyunca basınç değişikliklerini gösterir. Ek olarak, fizyolojik olarak normal olan solunum değişkenliğinden küçük hızlı değişiklikler kaydedildi. Balonun şişirilmesinin ardından ölçülen kan basıncının hemen hemen iki katına çıktığı kaydedildi.
Bu prosedür denenirken, anjiyokateterin erişimi sırasında vazospazmı önlemek için titiz künt diseksiyon ve lidokain damlaması kritik öneme sahiptir. Ayrıca, sol vertebral arterin anjiyografisi, hedeflenen intrakraniyal artere etkili endovasküler erişim için bir yol haritası sağlar. Hemodinamik, farmakolojik yollarla veya aorttaki bir balon kateterin şişirilmesiyle modüle edilebilir.
Hasat edilen beyin örnekleri, histopatoloji veya mekansal transkriptomik gibi çeşitli tekniklerle analiz edilebilir.