由于缺乏高质量的人类组织数据,对缺血性卒中的病理生理学了解有限。由于无法获得此类样本,因此控制良好的动物模型研究可以作为替代物。该方案中使用的兔子模型为缺血性中风的询问提供了一致的高质量数据。
这里描述的技术允许精确控制和调节血流动力学因素,以评估它们对缺血性卒中病理生理学的影响。精心策划的手术可以带来高质量的结果,特别是通过结合药物预防和有效的血管造影技术来减轻动脉血管痉挛的策略。首先,将兔子仰卧放在透视兼容手术台上。
伸展头部,因为它优化了后续血管造影视图的定位。为了减轻血管痉挛,在诱导麻醉后,将 0.5 英寸的透皮硝酸甘油放在耳朵内侧。使用电剪从两个腹股沟区域去除皮毛后,用洗必泰和酒精磨砂膏准备皮肤。
以通常的无菌方式覆盖皮肤,并触诊双侧股动脉脉动。在注射利多卡因的部位用10号刀片做一个5厘米的手术切口。使用钝性夹层暴露神经血管束,如果需要,延长切口以暴露足够大的动脉段以进入。
分离神经血管束后,在动脉上滴几滴 1% 利多卡因以防止血管痉挛。使用镊子轻轻地将动脉与静脉和邻近神经分开。通过其肌肉壁的特征外观与静脉薄壁相比来识别动脉。
隔离动脉后,将直角镊子放在血管下方。然后用仪器抓住两个血管环,轻轻地将它们穿过动脉下方。在暴露容器的上游和下游各放置一个。
通过拉动血管环使动脉受到轻柔的牵引,并检查血管是否有任何残留组织要通过轻柔解剖去除,从而增加成功进入的机会。解剖血管并准备血管导管后,再次将利多卡因滴注在血管上。动脉明显扩张,增加了使用Seldinger技术成功进入和放置鞘的机会。
对下游血管环施加轻柔的牵引力,通过减少流出并稳定血管以进行进入尝试来充血动脉。接下来,慢慢地将血管导管的针头推进到暴露的动脉段的中间。在看到血管导管和轮毂腔中有血闪时,将导管推进到动脉腔内。
成功放置血管导管后,将一根微丝穿过血管导管腔并进入主动脉。然后取下导线上的血管导管,并用五法式细亲水护套代替。通过打开三通阀确认动脉血通过侧臂管返回。
锁定阀门关闭,并用0.9%盐水冲洗护套。用额外的 3.0 丝缝将鞘轮固定在相邻皮肤上,并对股动脉对侧重复此过程。在透视下,将四根法式滑行导管推进到插入左股骨鞘的 0.035 英寸滑丝上。
将滑动导管的尖端定位在左椎动脉近端。取下导线后,用肝素化的0.9%盐水冲洗导管。通过在肺叶放大下向左椎动脉注射碘造影剂来进行血管造影,以可视化整个头部和颈部。
对于左椎体注射,注射50%造影剂,用生理盐水稀释,用三CC注射器的温和渐强。通过检查右椎动脉向下反流并进入右锁骨下动脉来确定注射量。在注射过程中,还要注意大脑后动脉或大脑上动脉,其中一个将是微导管闭塞的目标。
用0.010英寸微丝准备2.4法式流向微导管,并在微丝尖端形成C形。在路线图指导下,使用右股骨鞘将微导管推进到四根法式滑动导管内,并通过导线进入右椎动脉。推进微导管通过左椎动脉的颈节段。
为了通过从 V2 到 V3 段的最佳急转弯,当微丝回到其尖端近端时,单独推进微导管。在通过从V2到V3的急转后,微导管通常很容易通过近端基底或动脉。此时,推进微丝并选择所需的大脑后动脉和小脑上动脉,因为由于颅内动脉的脆弱性质,不建议注射微导管。
进一步将微导管通过微丝推进到目标动脉并选择近端位置,因为它在原点成角度,因此在后部通常最安全进行交流。在小脑上动脉中放置更深的位置是可行的。重复血管造影,在头部注射高放大倍率的左椎动脉导管,以确认目标动脉闭塞。
为了获得最佳成像效果,应注射全强度造影剂,通常不超过一个 CC,足以安抚所有颅内动脉。在透视下轻轻地从微导管上取下微丝,以确认位置稳定。将旋塞阀放在微导管的轮毂上并关闭旋塞阀,以防止逆行血流失血。
移除左椎导管,使左股骨通路鞘可用。在随后的闭塞期间,获取间歇性透视图像以确认闭塞微导管的稳定位置。三小时后取出闭塞微导管。
然后继续动脉血压测量和调节额外的所需时间。给主动脉中的球囊导管充气和放气,以监测血压变异性。在立即进行脑部摘取的急性手术中,从枕骨脊开始,向前工作,直到大脑可以完整地摘取。
将大脑置于福尔马林或快速冷冻状态,具体取决于所需的组织分析类型。在所有动物中,成功收获大脑并进行组织病理学分析,显示右小脑梗死。血压从放置在肾下主动脉中的 Fogarty 球囊导管追踪,大约一小时的监测数据显示动脉压随球囊充气的变化而实时变化。
血压的短期追踪显示了整个心动周期的压力变化。此外,呼吸变异性也注意到微小的快速变化,这在生理上是正常的。在气球充气后,测量的血压立即增加了近一倍。
在尝试此操作时,细致的钝性夹层和滴注利多卡因以防止进入血管导管期间出现血管痉挛至关重要。此外,左椎动脉血管造影为有效血管内通路目标颅内动脉提供了路线图。血流动力学可以通过药理学方式或通过给主动脉中的球囊导管充气来调节。
收获的脑标本可以用各种技术进行分析,例如组织病理学或空间转录组学。