Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

Enerjiyi ısı şeklinde dağıtan adipositin kahverengi ve bej alt tipleriyle ilgileniyoruz, beyaz adiposit ise genellikle enerji depolarken, amacımız enerji alımını baskılamak yerine enerji harcamasının teşvik edilmesine dayanan obezite ve diyabet için yeni bir tedavi geliştirmektir. Bir transkripsiyon faktörü olan NFI'yi, genom çapında bir açık kromatin analizi ile kahverengi adiposit farklılaşmasının kritik bir düzenleyicisi olarak tanımladık. NFI ve adipogenezin ana transkripsiyonel düzenleyicisi PPAR-gama, kahverengi yağa özgü arttırıcılar olarak birlikte lokalize olur.

Stromal vasküler fraksiyonun fare yağ dokusundan izole edilmesi sürecinde, yağ dokusunun manuel kıyma ve kollajenaz sindirimi deneysel değişkenliğe ve kontaminasyona yol açabilir. Yöntemimiz, SVF izolasyonunu kolaylaştıran, deneysel değişkenliği ve kontaminasyonu azaltan ve tekrarlanabilirliği artıran kollajenaz sindirimi için bir doku ayrıştırıcısı kullanır. Bireysel olarak farklılaştırılmış adiposit kullanılarak yapılan deneyler, alanımızdaki araştırmalar için vazgeçilmezdir.

Protokolümüz, sonraki adiposit farklılaşması için kolay ve tekrarlanabilir SVF izolasyonu sunacak ve topluluğumuzdaki araştırmaları hızlandıracaktır. Şu anda, NFI'nın vücut ağırlığı ve glikoz gibi tüm vücut metabolizmasındaki rolünü, fonksiyon fare modellerinin kazancı ve kaybını kullanarak araştırıyoruz. Ayrıca, yakın gelecekte her bir aşağı akış yolu için NFI'nın diğer farmakolojik aktivasyonunu da keşfedeceğiz.