Bu çalışma Jilin İl Bilim ve Teknoloji Departmanı (YDZJ202201ZYTS181) tarafından desteklenmiştir.

Hayvan prosedürü, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (Kayıt numarası: 2021214). Spesifik patojen içermeyen C57BL/6J fareler (8-10 hafta, ağırlık 18-22 g), erkek ve dişi, 22 °C ve %65 bağıl nemde bağımsız olarak havalandırılan kafeslere yerleştirildi. Fareler, suya ve diyete serbestçe erişebildikleri 7 günlük uyarlanabilir beslenmeden sonra deneye başladılar.
1. İlaç hazırlama
<ol><li>LJZD'nin Hazırlanması NOT: Kullanılan Çin tıbbı, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Bağlı Hastanesinden satın alınmış ve gerçek Çin tıbbı olarak tanımlanmıştır (bakınız Tablo 1).<ol><li>Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) özel bir seramik tencereye koyun (Malzeme Tablosuna bakınız). 1000 mL damıtılmış su ekleyin ve oda sıcaklığında 1 saat bekletin (bkz. Şekil 1A).</li>
		<li>Toz 12 g Bir öğütücü ile ince toz haline getirin ve 300 mL damıtılmış suyu başka bir kapta oda sıcaklığında 1 saat bekletin.</li>
		<li>Yukarıdaki Çin tıbbını özel seramik kapta karıştırın. Karışımı kaynatın ve ardından sadece 300 mL kaynatma kalana kadar orta ateşte tutun. Filtreleme için tıbbi gazlı bez kullanın ve süzüntüyü oda sıcaklığında saklayın.</li>
		<li>1000 mL damıtılmış su ekleyin ve yukarıdaki kaynatma işlemini bir kez daha tekrarlayın. Tıbbi gazlı bez kullanarak tekrar süzün. Süzüntüyü birleştirin ve sadece 150 mL kalana kadar kaynatın.</li>
		<li>Konsantre sıvıyı 5 dakika boyunca 10.000 x g'da santrifüjleyin ve elde edilen süpernatanı orta ateşte 30 mL'ye konsantre edin. Son konsantreyi bir tabağa aktarın ve sadece çözünen madde toz olarak kalana kadar elektrikli bir kurutma fırını kullanarak kurutun.</li>
		<li>Yukarıdaki katıyı tartın ve farelerin günlük dozu olan 0.2 mL (114.16 mg / mL) başına 22.85 mg ilaç içeren bir çözelti elde etmek için steril damıtılmış suda çözün.</li>
	</ol></li>
	<li>5-amino salisilik asidin hazırlanması NOT: 5-amino salisilik asit (5-ASA; Malzeme Tablosuna bakınız) UC-CRC üzerinde iyi bir önleyici etkiye sahiptir ve bu çalışmada pozitif bir ilaç olarak kullanılmıştır23.<ol><li>1.82 mg / mL 5-ASA çözeltisi elde etmek için 64 mg 5-ASA tozunu 200 mL steril damıtılmış su içinde çözün. Tek bir fare için günlük dozaj 0.2 mL idi.</li>
	</ol></li>
	<li>AOM enjeksiyon çözeltisinin hazırlanması<ol><li>25 mg AOM tozuna 2,5 mL steril damıtılmış su ekleyin (Malzeme Tablosuna bakınız) ve 10 mg / mL AOM stok çözeltisi yapmak için vorteks karıştırıcı ile karıştırın (Malzeme Tablosuna bakınız), kullanana kadar -20 ° C'de saklayın.</li>
		<li>AOM stok çözeltisini steril damıtılmış su ile 10:1'de (1 mg/mL) seyrelterek AOM enjeksiyon çözeltisini hazırlayın.</li>
	</ol></li>
</ol>2. UC-CRC modelinin kurulması
NOT: Deney 4 gruba ayrıldı: kontrol, model, LJZD ve 5-ASA grubu, her grupta 10 fare. Kontrol grubu hariç diğer gruplar AOM ve DSS ile tedavi edildi.
<ol><li>AOM enjeksiyon çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu NOT: 7 gün boyunca uyarlanabilir beslemeden sonra, farelere intraperitoneal enjeksiyon yoluyla AOM enjeksiyon çözeltisi (1 mg / mL) verildi (bkz. Şekil 1B).<ol><li>Fareyi karnı yukarı ve başı hafifçe aşağı gelecek şekilde tutun. Karın derisini sıkılaştırmak için sırt derisini kavrayın ve cildi 1 mL'lik bir şırınga ile orta karın çizgisinde her iki uyluğun kök çizgisinin kesişiminin yaklaşık 1 cm sağında delin (bkz.</li>
		<li>1 mL şırınga iğnesini karın orta hattına paralel olacak şekilde derinin altında 3-5 mm mesafeye itin ve iğneyi karın boşluğuna 0,3-0,5 mm 45°'de sokun.</li>
		<li>Uç karın kasından geçtikten sonra, operatör ani bir direnç kaybı hisseder. Ardından, sıvı sızıntısı olup olmadığını gözlemlemek için şırıngayı dışarı ve geriye doğru çekin. Değilse, AOM enjeksiyon solüsyonunu farelere 0.1 mL / 10 g'da yavaşça itin.</li>
	</ol></li>
	<li>% 2 DSS çözeltisinin döngüsel stimülasyonu NOT: AOM ile indüklenen her fareye 3, 6 ve 9. haftalarda 500 mL DSS çözeltisi verildi ve fareler bu süre zarfında serbestçe içti.<ol><li>10 g DSS'ye 500 mL steril damıtılmış su ekleyerek% 2 DSS çözeltisi hazırlayın (bkz. Bir vorteks karıştırıcı ile karıştırın ve kullanana kadar 4 °C'de saklayın.</li>
		<li>AOM ile indüklenen her fare, AOM indüksiyonundan sonra 3, 6 ve 9. haftalarda 7 gün boyunca 500 mL% 2 DSS solüsyonunu serbestçe içer.</li>
	</ol></li>
</ol>3. İlaç tedavisi
NOT: Yetişkin insanların günde 63 g LJZD'ye ihtiyacı vardır. Deneysel fare ve insan ilaç dozunun dönüşüm formülüne göre, fareler için eşdeğer deney dozu (mg / kg) = insan dozu (mg / kg) / vücut ağırlığı (60 kg) x 9.1, farelerin günlük dozu yaklaşık 9.6 g / kg idi.
<ol><li>LJZD ve 5-ASA grubunu, sırasıyla 7. ve 15. haftalarda gastrik gavaj ile 0.1 mL / 10 g hazırlanan LJZD ve 5-ASA solüsyonu ile tedavi edin.<ol><li>Farelerde intragastrik uygulama için aşağıdaki prosedürü uygulayın. Fareyi sol elinizde tutun ve sağ elinizde mide perfüzyon aparatını tutun. Şırınga iğnesini ağzına sokun ve farelerin farenksinin arka duvarından aşağı kaydırın. Fareler yutkunurken farenksi aşağı kaydırın ve ilerlemeye devam edin. Bir direnç hissi olduğunda ve şırınga farenkse itilebildiğinde, iğneyi dışarı çekin ve enjeksiyonu tamamlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kontrol ve model grubuna aynı miktarda salin uygulayın (bkz. Malzeme Tablosu).</li>
	<li>Her gruptaki fareleri, uygulama süresi boyunca aynı anda günde bir kez uygun ilaçla tedavi edin.</li>
</ol>4. UC-CRC modelinin değerlendirilmesi ve LJZD'nin etkinliği
<ol><li>Hastalık aktivite indeksi skoru NOT: Tablo 2'ye göre, farelerin kilo kaybı, dışkı viskozitesi ve dışkı kanaması birleştirilerek hastalık aktivite indeksi (DAI) skoru değerlendirildi.<ol><li>Adaptif beslenmenin başlangıcından ilaç tedavisinin sonuna kadar farelerin ağırlığını günlük olarak kaydedin.</li>
		<li>Her deney faresinin dışkı kıvamını dikkatlice gözlemleyin ve bağırsak hareketlerini üç koşuldan biri olarak kaydedin: normal, gevşek dışkı ve sulu ishal.</li>
		<li>Deney hayvanlarının dışkı kanamasını üç koşuldan biri olarak kaydedin: kanama yok, az kanama ve dışkıda görünür kan.</li>
	</ol></li>
	<li>Serumda IL-6 seviyesinin saptanması<ol><li>Fareleri 9 hafta boyunca LJZD veya 5-ASA ile tedavi edin. Sol elinizle farenin boyun derisini kavrayarak ve yanal dekübit pozisyonunu almak için deney masasına hafifçe bastırarak fareleri sabitleyin. Farelerin bıyıklarını makasla kesin. Kan kontaminasyonunu önlemek için farelerin bıyıklarını makasla dikkatlice kesin ( Malzeme Tablosuna bakın). NOT: Serbestçe hareket edemeyen farelerin uygun şekilde sabitlendiği kabul edildi. Bu olmazsa, fareler sabitlenmelidir.</li>
		<li>% 2 izofluran soluyarak fareyi uyuşturun. Göz küresinin etrafındaki cildi etanol ile sterilize edin (Malzeme Tablosuna bakınız). Göz küresini tıkalı ve çıkıntılı hale getirmek için yandaki göz derisine hafifçe bastırın.</li>
		<li>Göz küresini bir dirsek cımbızıyla sıkıştırın ve gözbebeklerini doğru ve hızlı bir şekilde çıkarın. Kanın santrifüj tüpüne damlamasına izin verin (bkz. Bu süreçte, kan alımını hızlandırmak için farenin kalbine dokunun.</li>
		<li>Toplanan kanı 30 dakika oda sıcaklığında tutun ve 10 dakika boyunca 3.500 x g'da santrifüj edin. Süpernatanı toplayın ve IL-6 içerik algılama kiti talimatlarına göre IL-6 seviyesini tespit edin (bkz. Malzeme Tablosu).</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektal dokuyu ayırma<ol><li>Kan örneklemesinden sonra farelere% 5 aşırı doz izofluran ve servikal çıkık soluyarak ötenazi yapın (bkz.</li>
		<li>Fareleri kriyojenik anatomik bir ortamda tutun. Fareleri sırtüstü pozisyonda hareketsiz hale getirin. Alt karın kıllarını makasla kesin ve etanol ile sterilize edin.</li>
		<li>İki uyluk kökü ile karın orta hattı arasındaki kesişme noktasını göz kapağı forseps ile sıkıştırın (bkz. Makasla yaklaşık 1-1,5 cm enine bir kesi kesin.</li>
		<li>Transvers insizyonun orta noktasından ksifoid sürece doğru karnın medyan çizgisi boyunca uzunlamasına bir kesi yapın.</li>
		<li>Kolorektumu çevreleyen dokudan ayırmak için peri-kolorektal dokuları anüs yönünde çıkarın. Kolorectum'a zarar vermemeye dikkat edin.</li>
		<li>Kolorectum'u tamamen ortaya çıkarmak için karın derisini yanlara doğru itin. Kolorektumu karın boşluğundan göz kapağı forseps ile çıkarın ve segmentleri anüsten çekuma kadar kesin (hariç); Toplam uzunluk yaklaşık 10 cm'dir. Elde edilen kolorektal dokuları 4 °C'de serum fizyolojik içinde saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Rektumun uzunluğunun ve ağırlığının değerlendirilmesi<ol><li>Kolorectumun içini yıkamak için salini 4 ° C'de 5 mL'lik bir iğne ile çıkarın ( Malzeme Tablosuna bakın). Ardından, dokunun nemini emmek için kolorektumu emici kağıda yerleştirin.</li>
		<li>Kolorektal dokuları tartın ve ardından uzunluklarını ölçmek için A4 kağıda yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorrektumdaki tümör sayısını ölçün<ol><li>Kolorektumu tamamen açmak için uzunlamasına kesin ve kolorrektumdaki tümörlerin sayısını ve boyutunu gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektumun patolojik analizi<ol><li>Kolorektum'u 24 saat boyunca% 4 paraformaldehit içinde sabitleyin. Sabit rektal dokuyu erimiş parafine gömün ve doku donduran bir mikrotom ile sürekli olarak 5 μm kalınlığında kesit alın.</li>
		<li>Hou ve ark.24 prosedürüne göre, ksilen içindeki bölümleri mumdan arındırın ve ardından seri etanol konsantrasyonları ile kurutun. Hematoksilen çözeltisi ile 5 dakika boyadıktan sonra, bölümleri saf suyla durulayın. Bundan sonra, 1 dakika boyunca% 0.5 eozin çözeltisi ile boyayın ( Malzeme Tablosuna bakınız).</li>
		<li>Gradyan dehidrasyon ve ksilen şeffaf tedavisini tekrar gerçekleştirin. Kesitleri kapatın ve Xie ve ark.25 tarafından açıklandığı gibi optik mikroskop altında gözlemleyin (Malzeme Tablosuna bakın) ve fotoğraflayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektumun immünohistokimyasal analizi<ol><li>Bölümleri yukarıdaki yönteme göre mumdan arındırın ve kurutun. Gök ve ark.26 tarafından tarif edildiği gibi yüksek basınçlı termal onarım tekniği ile kesitlerdeki antijeni onarın.</li>
		<li>Bölümleri endojen peroksidaz blokerlerinde oda sıcaklığında 15 dakika bekletin. Bölümleri keçi serumu ile kapatın (Malzeme Tablosuna bakın).</li>
		<li>Bölümlere birincil antikor ZO-1 (1:1000), Oklüdin (1:1000) ve KI67 (1:500; Malzeme Tablosuna bakınız) ekleyin ve gece boyunca 4 ° C'de inkübe edin. Bölümleri PBS tamponu ile durulayın (Malzeme Tablosuna bakınız), genel amaçlı ikincil antikor (1:5000; Malzeme Tablosuna bakınız) ekleyin ve 37 °C'de 30 dakika inkübe edin.</li>
		<li>Renk geliştirme bölümlerine DAB çözümünü (Malzeme Tablosuna bakın) ekleyin. Bölümleri hematoksilen çözeltisi ile boyayın.</li>
		<li>Bölümleri tekrar kurutun, şeffaflaştırın ve kapatın. Optik mikroskop ile protein ekspresyonunu gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>

Liujunzi Kaynatma: UC-CRC'nin Önlenmesi İçin Etkili Bir Tedavi

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

KRK, her yıl yaklaşık 1.148.000 yeni vaka ve 576.000'den fazla ölümle dünya çapında en yaygın kanserlerden biridir. KRK, kalıtsal, sporadik ve UC-KRK olmak üzere farklı nedenlere göre üç tipe ayrılabilir31. ÜK gibi inflamatuar barsak hastalıkları olan hastalarda KRK insidansı, genel popülasyondan anlamlı olarak daha yüksektir. UC, tipik adenom-adenokarsinomyolu 6'dan farklı olan inflamatuar-kanser yolu yoluyla KRK gelişimini uyarır. Şu anda, UC-KR...

Kolorektal kanser (KRK), küresel kanser insidansının %10'unu ve toplam kansere bağlı ölümlerin %9,4'ünü oluşturan, dünyada en sık görülen üçüncü malignite ve ikinci en yaygın ölüm nedeni olan yaygın bir gastrointestinal malignitedir 1,2. Genetik faktörler, kronik inflamasyon, yüksek yağlı diyet, diyabet ve anormal bağırsak florası CRC 3,4 için risk faktörleridir. Bunlar arasında inflamatuar barsak hastalığı, özellikle ülseratif koloproktit (ÜK), CRC 5,6 için açık bir risk faktörüdür. UC ile ilişkili CRC (UC-CRC),CRC 7,8'in tipik adenom-adenokarsinom gelişim modelinden farklı olarak, kolorektumun kronik inflamasyonuna dayanan inflamasyon, atipik hiperplazi ve kanserin bir geçiş sürecidir. Genel popülasyonla karşılaştırıldığında, inflamatuar barsak hastalığı olan hastalarda KRK riski yaklaşık 10-40 kat daha yüksektir9.
Şu anda, cerrahi hala KRK için standart tedavidir ve tümörün konumuna ve evresine bağlı olarak radyasyon tedavisi, sistemik ilaç tedavisi veya her ikisinin bir kombinasyonu mümkündür10. Bu geleneksel tedavi yöntemleri büyük ilerleme kaydetmiş olsa da, KRK'nin yüksek heterojenliği ve nüks oranı nedeniyle prognoz kötüdür ve tedavi etkisi ideal değildir11,12. Bu nedenle, erken teşhis, erken tanı ve kapsamlı tedavi, KRK hastalarının sağkalım oranını iyileştirmenin anahtarıdır ve ÜK'nin KRK'ye dönüşümüne dikkat etmek özellikle önemlidir. Yıllar geçtikçe, geleneksel Çin tıbbı (TCM), sınırlı yan etkileri ve önemli etkinliği nedeniyle UC-CRC veya kronik gastrit tedavisinde büyük ilgi görmüştür. Diyalektik tedaviye dayanarak, çeşitli nesillerden ünlü Çin tıbbı uygulayıcıları, Huangqi Jianzhong kaynatma13, Sijunzi kaynatma14 ve Sishen hapı15 gibi çok sayıda klasik reçete oluşturmuştur.
Liujunzi kaynatma (LJZD), Yi Xue Zheng Zhuan'ın Ming Hanedanlığı'nda derlenen çalışmalarından kaynaklanmaktadır ve TCM16'da klasik bir reçetedir. Tablo 1'de gösterildiği gibi, LJZD, Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Kurt (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Narenciye reticulata Blanco (Chenpi) ve Pinellia ternata (Thunb.) Qi'yi yenileme ve dalağı güçlendirme, nemi kurutma ve balgamı çözme etkisine sahip olan Breit (Banxia). Modern klinik uygulamada, genellikle kronik gastrit, mide ülseri ve duodenum ülserlerini tedavi etmek için kullanılır. Modern farmakolojik araştırmalar, LJZD ve modifiye LJZD'nin UC ve sindirim sistemi kanserinin adjuvan tedavisinde yüksek uygulama değerine sahip olduğunu göstermiştir 17,18,19.
Şu anda, UC-CRC fare modellerini oluşturmanın birçok yolu vardır, ancak azoksimetan (AOM)/dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı fare modeli en yaygın kullanılan UC-CRC modelidir; klinik semptomlar, morfolojik ve patolojik gözlemler, modelin insan UC-CRC20,21'e çok benzediğini kanıtlamıştır. Temel prensip, önce kimyasal kanserojen AOM ile karsinogenezi indüklemek ve daha sonra bağırsak mukozal epitelinin sürekli hasarını ve onarımını simüle etmek için fareleri sürekli olarak DSS'nin enflamatuar stimülasyon ortamına maruz bırakmak ve böylece bir UC-CRC fare modelioluşturmaktır 22. Bu çalışmanın amacı, kısa dönemde AOM'nin intraperitoneal enjeksiyonu ve DSS'nin siklik stimülasyonu ile UC-KRK'nin fare modelini oluşturmak ve UC-KRK tedavisine bilimsel bir temel sağlamak amacıyla ilacın ve LJZD'nin moleküler mekanizmasının UC-KRK üzerindeki etkisini değerlendirmektir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Azoxymethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A5486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-amino salicylic acid</td>
			<td>Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td>
			<td>3819413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J mice</td>
			<td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>NO 210726210100853716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB color development kit</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>2005289</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dewatering machine&#160;</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JJ-12J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran sulfate sodium</td>
			<td>Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>MB5535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-P5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin-eosin dye</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>B1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6</td>
			<td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td>
			<td>MM-0163M2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KI67 primary antibody</td>
			<td>Google Biotechnology Inc</td>
			<td>GB121141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral gum</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>10004160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Object slide</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Occludin primary antibody</td>
			<td>Affnity</td>
			<td>DF7504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthostatic optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathological microtome</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZO-1 primary antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab221547</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of coloproctitis cancer model in mice and evaluation of therapeutic effect of chinese medicine

Kolorektal kanser (KRK), sindirim sisteminin yaygın bir malignitesidir ve dünya çapında en sık görülen üçüncü malignite ve maligniteye bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedeni haline gelmiştir. Ülseratif koloproktit (ÜK) prekanseröz bir lezyondur ve ÜK ile ilişkili KRK (ÜK-KRK) KRK'NIN EN SıK GÖRÜLEN ALT TIPIDIR. Bu nedenle, makul bir UC-CRC modeli, yeni ilaç geliştirmenin temel taşı ve garantisidir. Geleneksel Çin tıbbı (TCM), iyi etkinliği nedeniyle UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. TCM'nin klasik bir tonik reçetesi olan Liujunzi kaynatma (LJZD), UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, azometan ve dekstran sülfat sodyum birleştirilerek UC-KRK modeli oluşturulmuş ve LJZD uygulanmıştır. Veriler, LJZD'nin fare vücut ağırlığı, kolorektal uzunluk, patolojik ve inflamatuar faktörler, kolorektal bariyer fonksiyonu ve kanser belirteçlerini kullanarak UC-CRC'de kanser geçişini etkili bir şekilde inhibe edebileceğini doğruladı. Bu protokol, UC-CRC'nin önlenmesi ve tedavisinde TCM'nin etkinliğini değerlendirmek için bir sistem sağlar.

Colorectal cancer (CRC) is a common gastrointestinal malignancy, the third most common malignancy, and the second most common cause of death in the world, accounting for 10% of the global cancer incidence and 9.4% of the total cancer-related death1,2. Genetic factors, chronic inflammation, high-fat diet, diabetes, and abnormal intestinal flora are risk factors for CRC3,4. Among them, inflammatory bowel disease, especially ulcerative coloproctitis (UC), is a clear risk factor for CRC5,6. UC-associated CRC (UC-CRC) is a transition process of inflammation, atypical hyperplasia, and cancer based on chronic inflammation of the colorectum, which is different from the typical adenoma-adenocarcinoma development model of CRC7,8. Compared with the general population, the risk of CRC is approximately 10-40 times higher in patients with inflammatory bowel disease9.
Currently, surgery is still the standard treatment for CRC, and depending on the location and stage of the tumor, radiation therapy, systemic drug therapy, or a combination of both are possible10. Although these traditional treatment modalities have made great progress, due to the high heterogeneity and recurrence rate of CRC, the prognosis is poor, and the treatment effect is not ideal11,12. Therefore, early detection, early diagnosis, and comprehensive treatment are key to improving the survival rate of CRC patients, and it is particularly important to pay attention to the transformation of UC to CRC. Over the years, traditional Chinese medicine (TCM) has attracted much attention in the treatment of UC-CRC or chronic gastritis due to its limited side effects and significant efficacy. Based on dialectical treatment, famous Chinese medicine practitioners of various generations have created a large number of classic prescriptions, such as Huangqi Jianzhong decoction13, Sijunzi decoction14, and Sishen pill15.
Liujunzi decoction (LJZD) originated from the works of Yi Xue Zheng Zhuan compiled in the Ming Dynasty and is a classic prescription in TCM16. As shown in Table 1, LJZD consists of six traditional herbs, including Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) and Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), which has the effect of replenishing qi and strengthening the spleen, drying dampness, and resolving phlegm. In modern clinical practice, it is often used to treat chronic gastritis, gastric ulcers, and duodenal ulcers. Modern pharmacological research has shown that LJZD and modified LJZD have high application value in the adjuvant treatment of UC and digestive tract cancer17,18,19.
At present, there are many ways to construct UC-CRC mouse models, but the azoxymethane (AOM)/dextran sulfate sodium (DSS) induced mouse model is the most widely used UC-CRC model; the clinical symptoms, morphological, and pathological observations have proved that the model is very similar to human UC-CRC20,21. The basic principle is to first induce carcinogenesis with chemical carcinogen AOM and then continuously expose mice to the inflammatory stimulation environment of DSS to simulate the continuous damage and repair of intestinal mucosal epithelium, thereby constructing a UC-CRC mouse model22. The aim of this study is to establish a mouse model of UC-CRC by intraperitoneal injection of AOM and cyclic stimulation of DSS in the short term and to evaluate the effect of the drug and the molecular mechanism of LJZD on UC-CRC in order to provide a scientific basis for the treatment of UC-CRC.

Yazar Spotlight: Koloproktit Kanseri için Geleneksel Çin Tedavisi Olarak Liujunzi Decottion

Farelerde Koloproktit Kanser Modelinin Oluşturulması ve Çin Tıbbının Terapötik Etkisinin Değerlendirilmesi

This study was on the prevention and treatment of coloproctitis cancer with traditional Chinese medicine. We aim to establish a mouse model for coloproctitis cancer and evaluate traditional Chinese medicine indicators. We confirmed that the Chinese medicine Liujunzi decoction is a effective treatment for coloproctitis cancer prevention.In the future, we will work to identify more sensitive biomarkers for colon and rectal cancer and screen Liujunzi decoction for therapeutic targets.

LJZD'nin kaynatma işlemi, Tablo 1'deki ilaçların bileşim oranına ve Şekil 1A'daki TCM'nin kaynatma yöntemine göre hazırlanmıştır. Şekil 1B'de belirtilen zaman noktasına göre, farelere 7. günde intraperitoneal olarak 1 mg/mL AOM enjekte edildi ve farelere3., 6. ve 9. haftalarda %2 DSS içeren içme suyuna serbest erişim sağlandı. UC-CRC fare modeli 15. haftada başarıyla k...

Watch this Scientific Journal Video about Author Spotlight: Liujunzi Decoction as a Traditional Chinese Treatment for Coloproctitis Cancer at JoVE.com

Bu protokol, dekstran sülfat sodyum ile birlikte azometan tarafından indüklenen ülseratif koloproktit ile ilişkili kolorektal kanserin bir fare modelini sağlar. Model, kolorektal kanserin önlenmesi ve tedavisinde geleneksel Çin tıbbı bileşiklerinin etkinliğini değerlendirmek için kullanıldı.

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Bu çalışma, geleneksel Çin tıbbı ile koloproktit kanserinin önlenmesi ve tedavisi üzerineydi. Koloproktit kanseri için bir fare modeli oluşturmayı ve geleneksel Çin tıbbı göstergelerini değerlendirmeyi amaçlıyoruz. Çin tıbbı Liujunzi kaynağının koloproktit kanserinin önlenmesi için etkili bir tedavi olduğunu doğruladık.Gelecekte, kolon ve rektum kanseri için daha hassas biyobelirteçleri belirlemek ve terapötik hedefler için Liujunzi kaynatma taramasını taramak için çalışacağız.

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

596 Görüntüleme.  Changchun University of Chinese Medicine. Bu çalışma, geleneksel Çin tıbbı ile koloproktit kanserinin önlenmesi ve tedavisi üzerineydi. Koloproktit kanseri için bir fare modeli oluşturmayı ve geleneksel Çin tıbbı göstergelerini değerlendirmeyi amaçlıyoruz. Çin tıbbı Liujunzi kaynağının koloproktit kanserinin önlenmesi için etkili bir tedavi olduğunu doğruladık.Gelecekte, kolon ve rektum kanseri için daha hassas biyobelirteçleri belirlemek ve terapötik hedefler için Liujunzi kaynatma taramasın?...

Video: Yazar Spotlight: Koloproktit Kanseri için Geleneksel Çin Tedavisi Olarak Liujunzi Decottion

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading cause of malignancy-related death. Ulcerative coloproctitis (UC) is a precancerous lesion, and UC-associated CRC (UC-CRC) is the most common subtype of CRC. Therefore, a reasonable UC-CRC model is the cornerstone and guarantee of new drug development. Traditional Chinese medicine (TCM) has been widely used in the treatment of UC-CRC due to its good efficacy. As a classic tonic prescription of TCM, Liujunzi decoction (LJZD) has been widely used in the treatment of UC-CRC. In this study, a UC-CRC model was established by combining azomethane and dextran sulfate sodium, and the LJZD was administered. The data confirmed that LJZD can effectively inhibit cancer transition in UC-CRC by using mouse body weight, colorectal length, pathological and inflammatory factors, colorectal barrier function, and cancer markers. This protocol provides a system for evaluating the efficacy of TCM in the prevention and treatment of UC-CRC.

This protocol provides a mouse model of ulcerative coloproctitis-associated colorectal cancer induced by azomethane combined with dextran sulfate sodium. The model was used to evaluate the efficacy of traditional Chinese medicine compounds in the prevention and treatment of colorectal cancer.

Tıp

Preparation of Liujunzi Decoction (LJZD) for the Treatment of Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer  (UC-CRC)

To begin place Dang Shen, Bai Zhu, into a specialized ceramic pot. Add 1000 milliliters of distilled water and let it soak at room temperature for one hour. Using a grinder, grind 12 grams of Fu ling into a fine powder.Then, soak the powdered Fu ling in 300 milliliters of distilled water in a separate container for one hour at room temperature. Mix the prepared Chinese herbal mixture in the specialized ceramic pot. Boil the mixture and maintain it over medium heat until the decoction volume reduces to 300 milliliters.Combine the filtrate obtained from the decoction and continue boiling until the volume reduces to 150 milliliters. Then centrifuge the concentrated liquid at 10, 000 G for five minutes. Concentrate the obtained supernatant to 30 milliliters over medium heat.Transfer the final concentrate to a dish and dry it using an electric drying oven until only the solute remains as a powder. Now, weigh the obtained powder, and dissolve it in sterile distilled water to create the daily dosage for mice. To prepare five amino salicylic acid, weigh 64 milligrams of five amino salicylic acid powder, and dissolve it in 200 milliliters of sterile distilled water.

Ülseratif Koloproktit-Kolorektal Kanser (UC-CRC) Tedavisi için Liujunzi Dekaynatma (LJZD) Hazırlanması

Establishment of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model to Evaluate the Therapeutic Effect of Chinese Medicine

To begin, gently position the mouse with its belly up and the head slightly down. Grasp the back skin to secure the abdominal area and insert a one milliliter syringe needle, one centimeter to the right of the midline of the abdomen at the intersection of the line, connecting both thighs. Gradually insert the one milliliter syringe needle to a depth of three to five millimeters under the skin.Insert the needle approximately 0.3 to 0.5 millimeters into the abdominal cavity at a 45 degree angle. Once the needle tip passes through the abdominal muscle, notice a sudden decrease in resistance. Slowly inject 0.1 milliliters of the azoxymethane injection solution per 10 grams of body weight into the mice.Subsequently, retract the syringe gently. Then add 500 milliliters of sterile distilled water to 10 grams of DSS. To prepare a 2%DSS solution.Mix the solution with a vortex mixer and store at four degrees Celsius until use, administer the prepared LJZD and five amino salicylic acid solution daily at a consistent time via gastric gavage to the respective groups at week seven and week 15.

Çin Tıbbının Terapötik Etkisini Değerlendirmek için Ülseratif Koloproktit-Kolorektal Kanser (UC-CRC) Modelinin Oluşturulması

Evaluation of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model and Efficacy of Liujunzi Decoction (LJZD)

To begin, establish the UC-CRC mouse model and administer the prepared LJZD and 5-ASA solution to the respective groups. After the drug treatment, monitor the weight of mice daily from the beginning of adaptive feeding until the end of drug treatment. Diligently observe and document the fecal consistency of each experimental mouse, categorizing it as normal, loose stools or watery diarrhea.Carefully document any fecal bleeding observed in the experimental animals, categorizing it into no bleeding, minimal bleeding, or visible blood in the stool. To separate the colorectal tissue, maintain the euthanized mice within a cryogenic anatomical environment. Secure the mice in a supine position.Using scissors, trim the lower abdominal hair and sterilize the area with ethanol. Using eyelid forceps, gently grasp the intersection point between the two thigh roots and the abdominal midline. Then use scissors to create a one to 1.5 centimeters long transverse incision.Perform a longitudinal incision along the median line of the abdomen, starting from the midpoint of the transverse incision to the xiphoid process. Carefully detach the peri-colorectal tissues in the direction towards the anus, separating the colorectum rom the surrounding tissue. Gently push aside the abdominal skin to fully expose the colorectum.Using eyelid forceps, extract the colorectum from the abdominal cavity and section it from the anus to the cecum. Preserve the collected colorectal tissues in saline at four degrees Celsius. The UC-CRC model group had a significant weight loss compared to the control group which was alleviated by LJZD treatment.LJZD treatment improved the disease activity index compared with the UC-CRC model group.