الفئران منتبذ البطن القلب / زراعة واحدة والرئة في تكوين محملة حجم

Summary

We describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The transplant configuration results in a partially loaded graft circulation, allowing direct functional assessment. This model may be employed for acute or chronic studies of function and immunologic status of the transplanted graft.

Abstract

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft involves anastomosis of donor inferior vena cava (IVC) to recipient IVC, and donor ascending aorta (Ao) to recipient abdominal Ao. The right upper and middle lung lobes are preserved and function as conduits for blood flow from right heart to left heart.

There are several advantages to using this technique, and it lends itself to a broad range of applications. Because the graft is transplanted in a configuration that allows for dyamic volume-loading, cardiac function may be directly assessed in vivo. The use of pressure-volume conductance catheters permits characterization of load-dependent and load-independent hemodynamic parameters. The graft may be converted to a loaded configuration by applying a clamp to the recipient’s infra-hepatic IVC. We describe modified surgical techniques for both donor and recipient operations, and an ideal myocardial protection strategy. Depending on the experimental aim, this model may be adapted for use in both acute and chronic studies of graft function, immunologic status, and variable ventricular loading conditions. The conducting airways to the transplanted lung are preserved, and allow for acute lung re-ventilation. This facilitates analysis of the effects of the mixed venous and arterial blood providing coronary perfusion to the graft.

A limitation of this model is its technical complexity. There is a significant learning curve for new operators, who should ideally be mentored in the technique. A surgical training background is advantageous for those wishing to apply this model. Despite its complexity, we aim to present the model in a clear and easily applicable format. Because of the physiologic similarity of this model to orthotopic transplantation, and its broad range of study applications, the effort invested in learning the technique is likely to be worthwhile.

Introduction

The first rodent model of heterotopic abdominal heart transplantation (HAHT) was described by Abbott and colleagues in 1964¹. This technique, and subsequent modifications have been widely applied to characterize transplant graft function and immunologic status. The majority of HAHT techniques described involve a non-volume loaded heart^2,3. Models of HAHT involving volume-loaded ventricles have been described, but they are frequently limited in one or more respects.

Heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) with a volume-loaded left ventricle (LV) has been described previously. Chen and colleagues⁴, and subsequently Ibrahim and colleagues⁵ described HAHLT with a single aorto-aortic (donor ascending to recipient abdominal aorta) anastomosis. The only volume load presented to the ventricle in this circulation is the coronary venous return. Asfour and colleagues described a HAHT technique in which the lung circuit was eliminated by anastomosing donor pulmonary artery (PA) to donor left atrium (LA)⁶. In this circulation, venous inflow to right ventricle (RV) occurs via a donor SVC to recipient IVC anastomosis, and the subsequent LV load is ejected into the aorto-aortic anastomosis. Cardiac function was partially assessed in vivo, and also in vitro using a Langendorff rig. Figueiredo and colleagues described a HAHLT model similar to our own⁷, but in mice. Venous inflow to the RV occurs via donor SVC to recipient IVC anastomosis. Blood subsequently passes through the single lung circulation and LV load is ejected into the aorto-aortic anastomosis. Cardiac function in their study was assessed by magnetic resonance imaging (MRI). Wen and colleagues described a unique HAHT technique in which the LV is loaded by means of a recipient aorta to donor LA anastomosis⁸. The LV, therefore, fills at systemic pressures. Cardiac function, and whether LV stroke volume is ejected antegradely in their model was not assessed.

Many of the techniques referenced above involve non-physiologic LV loading conditions, including the techniques whose partial LV load is represented only by coronary venous return. On the other hand, many techniques do approach physiologic LV loading. The majority of these techniques, as with the technique of Asfour and colleagues, omit the pulmonary circulation and utilize a donor PA to donor LA anastomosis^6,9. The circulation described by Galinanes and colleagues¹⁰ employs a direct recipient cava to donor LA anastomosis, omitting the pulmonary circulation and the right heart. Yokoyama and colleagues achieve the same effect by ligating the donor PA and creating an interatrial communication in the donor heart (omitting donor lung and right heart circulations)¹¹. The circulation of Maruyama and colleagues¹² involves an anastomosis between donor left PA and recipient Ao, which permits LV filling via the pulmonary circulation as a conduit, but effectively excludes the right heart.

In cases where near physiologic loading conditions were met, we advance the technique of HAHLT in 2 major respects. First, to our knowledge, the exact configuration we report has not been described in rats. It is possibly the most versatile circulation for investigators wishing to study the physiology, structure, and immunology of the transplanted heart-lung graft. Second, we describe how the function of the transplant graft can be directly characterized in vivo. For this application, pressure-volume conductance catheters can be introduced directly into the LV apex of the transplant graft, which allows for complete cardiac functional characterization.

The technique described here can be applied to both acute and chronic studies of transplant graft function, while the functional assessment may be performed either in vivo or in vitro. We present a model in which the loading conditions can be near physiologic, however the degree of ventricular loading may be manipulated both acutely and chronically by diverting venous return towards or away from the graft. Afterload conditions can also be manipulated. Because the lung and its airway are retained in this transplant configuration, investigators can re-ventilate the donor lung acutely. Uniquely, lung re-ventilation changes the composition of blood perfusing the transplant coronary arteries. Under non-ventilated conditions, blood ejected from the donor aorta is deoxygenated, and mixes with oxygenated blood in the recipient aorta. Under acutely ventilated conditions, ejected blood becomes oxygenated. Thus, transplant graft function can be compared under ventilated and non-ventilated conditions, and also under variably loaded conditions.

The protocol below describes important modifications to previously described HAHLT donor and recipient operations. It also describes an optimal technique for protecting the transplant graft throughout the period of ischemia (time between donor explant and recipient implant). Advantages of this technique include physiologic conditions potentially approaching that of an orthotopically transplanted graft, and a wide range of investigative applications. An important limitation is its technical complexity. With adequate mentoring and practice, the advantages of this technique will likely outweigh the challenges in adopting it.

Protocol

وتم إيواء جميع الحيوانات ويعتني به وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية لرعاية واستخدام حيوانات المختبر الوطني و. منحت الموافقة الأخلاقية لهذا البروتوكول من قبل الجامعة لجنة رعاية الحيوان كولومبيا البريطانية. واستخدمت 450 غ لهذا البروتوكول - الذكور والجرذان سبراج داولي يتراوح وزنها بين 300.

عملية 1. المانحة

1. لدينا حوالي 100 مل من شلل القلب (RT) في قارورة أسطواني متصلة طويلة في الوريد (IV) أنابيب القسطرة عن طريق محبس 3-الطريقة. استخدام الحامل لرفع القارورة إلى ما يقرب من 80CM فوق سطح المنطوق، مما يتيح تسليم شلل القلب عن طريق الجاذبية.
2. لتصور هياكل كاف، استخدم إما زوج من loupes لالجراحية أو مجهر تشريح.
   ملاحظة: نحن نستخدم حاليا مجهر التشغيل مجهر مع 3.4 - 21.3X التكبير.
3. وضع المانحة في غرفة التخدير ولحث التخدير مع 4-5٪ الأيزوفلورين.
4. نقل الفئران على منصة التشغيل والحفاظ على التخدير من مخروط الأنف مع 1-2٪ الأيزوفلورين. تطبيق مرهم التعليم والتدريب المهني لعيون الحيوان لمنع جفاف. إدارة ميدازولام (2 ملغ / كلغ) داخل peritoneally مع 25 G الإبرة.
5. استخدام كليبرز الجراحية، حلق المانحة من xiphisternum للفك السفلي. حلاقة منطقة صغيرة من الفخذ الأيسر (للوصول IV لاحقا). تطبيق وكيل السماط على الأسطح المنطوق، انتظر حوالي 5 دقائق، وإزالة الشعر بقطعة من الشاش.
6. الإعدادية مواقع الجراحية مع حل يستند إلى chlorexidine بوفيدون اليود أو (نستخدم بالكلورهيكسيدين فقط). اختراق مواقع الجراحي مع 0،1-0،5٪ ليدوكائين تحت الجلد.
7. تأمين الأمامية وhindlimb اليسار إلى منصة التشغيل بشريط لاصق، وترك hindlimb الصحيح مجانا لرصد عمق التخدير والعلامات الحيوية.
8. بعد التأكد من عمق التخدير المناسب من خلال دواسة قرصة، وجعل شق في الفخذ الأيسر باستخدام تجعدمشرط 22 شفرة. عن طريق تشريح حادة، فضح الوريد الفخذي مشترك اليسار والحصول على حق الوصول IV على النحو التالي:
   1. سحب بلطف الأنسجة التي تغمر الوريد الفخذي، ويقني؛ يدخل القنية الوريد مع 24 G IV. ربط IV على طول قصيرة من مليئة المالحة IV الأنابيب، وتأمين أنابيب في مكان بشريط لاصق.
      ملاحظة: يتم وصف هذا الإجراء لإقناء؛ إدخال القنية الوريدية الفخذ لدى الفئران في مواضع أخرى من جيسبيرسن وزملاؤه ^14.
   2. توصيل 10 مل حقنة مليئة المالحة إلى الأنبوب الرابع، وبلطف نضح الدم لضمان تحديد المواقع الصحيح للIV.
   3. حقن 300-500 وحدة دولية من الهيبارين غير المجزأ من خلال الأنبوب الرابع، وبعد ذلك تدفق أنابيب مع 3-5 مل من المياه المالحة.
9. المقبل، يبضع الرغامى المتبرع على النحو التالي:
   1. جعل شق خط الوسط في الأنسجة الرخوة بين الشق الوداجي والفك السفلي باستخدام مشرط 22 شفرة. اختراق الكبسولة للغدة الدرقية في خط الوسط باستخدام Metzenمقص باوم، وفصوص منفصلة لها باستخدام تشريح حادة.
   2. باستخدام تشريح حادة، فصل عضلات حزام الرقبة في خط الوسط لفضح السطح الأمامي من القصبة الهوائية.
   3. استخدام ملقط منحنية لتشريح بصراحة طائرة كفافي حول القصبة الهوائية. تطويق القصبة الهوائية مع ربطة عنق من الحرير 4-0.
   4. باستخدام مقص القزحية، وجعل شق عرضي في القصبة الهوائية الأمامية، ما يقرب من أدنى 5MM في الغضروف الدرقي. إدخال بلطف قنية القصبة الهوائية (14 G IV) وثبته في مكانه باستخدام التعادل 4-0 الحرير.
   5. توصيل قنية القصبة الهوائية لجهاز التنفس الصناعي الميكانيكي. إعادة توجيه تدفق الأكسجين والأيزوفلورين عبر الدائرة التنفس الصناعي، وتهوية المانحة بمعدل وحجم المد والجزر التي تنبأ بها وزنه ^13.
10. إجراء شق في خط الوسط من الصدر (باستخدام مشرط 22 شفرة)، وتوسيع شق في الشق الوداجي إلى ما دون xipisternum.
11. البقاء في خط الوسط، إجراء القص المتوسط ​​باستخدام قطع العظام. سحب حواف القص مع ضام الذاتي الاحتفاظ. أدخل التامور وتجاويف الجنبي.
12. إجراء استئصال التوتة. فمن الأسهل لتقسيم لأول مرة بصراحة الغدة الصعترية في خط الوسط، ثم فصلها عن الهياكل المحيطة باستخدام مزيج من تشريح حادة وحادة.
    ملاحظة: أصل الشرايين الصدرية الداخلية قد أصيب عندما تشريح الغدة الصعترية بعيدا عن حواف القصية متفوقة. لمنع النزيف، ويمكن تطبيق مقاطع مرقئ قبل إزالة الغدة الصعترية في هذه النقاط.
13. باستخدام مقص Metzenbaum و / أو وير حاد، تشريح شبه الأجوفية الدهون بعيدا عن الوريد الأجوف السفلي (IVC). تأكد من أن IVC خالية نسبيا من الدهون والنسيج الضام من مفترق CAVO الأذيني متفوق، إلى الحجاب الحاجز دون المستوى.
14. باستخدام وير حاد، مجانا محيطي الوريد الأجوف العلوي (SVC) وتطويقها بالتعادل 4-0 الحرير.
15. المقبل، تشريحغادر الوريد الأجوف خالية من الهياكل المحيطة بها، وligate أنه قريب وبشكل أقصى مع 4-0 العلاقات الحرير. بتر جزء من التدخل الأجوف لفضح الشريان تحت الترقوة الأيسر.
16. مجانا محيطي الأوعية قوس الأبهر باستخدام وير حاد. تطبيق مقاطع الجراحية الداني والقاصي إلى الشريان اللا اسم له، وتقسيمه بين لقطات. ترك اليسار الشريان السباتي المشترك والشريان تحت الترقوة الأيسر قص الامم المتحدة.
17. المقبل، يقني؛ يدخل القنية في SVC مع القسطرة 24 G IV. تأمين القسطرة مع ضعت سابقا 4-0 الحرير التعادل.
18. الاستعداد لموسم الحصاد الكسب غير المشروع المناسب، ولكن لطيف.
19. باستخدام مقص حاد، تقسيم IVC فقط متفوقة على السطح البطني. تقسيم SVC متفوقة على موقع إقناء؛ إدخال القنية لها، وضمان أن الهياكل الهوائية مجاورة لم يصب بأذى.
20. إيقاف جهاز التنفس الصناعي وقطع قنية القصبة الهوائية. المسح الشامل القصبة الهوائية قريب.
21. فهم القصبة الهوائية مقطوع مع ملقط، وإزالة القلبوالرئتين أون الكتلة. وهذا يتطلب الجر لطيف مع تشريح حاد كما هو إزالة الطعم القلب والرئة. فصل القصبة الهوائية من المريء الأساسي. تجنب اصابة الشريان الأورطي النازل، حتى أن جزء طويل من انه لا يزال سليما بعد الحصاد.

2. إعداد القلب والرئة الكسب غير المشروع

ملاحظة: حين الانتهاء من هذا الجزء من هذا الإجراء، يجب أن يكون مساعد التخدير القوارض المتلقي والتحضير لزرع الكسب غير المشروع.

1. وضع الكسب غير المشروع القلب والرئة على الشاش الجراحي مع السطح الأمامي للقلب لأسفل. باستخدام تشريح حادة، وإزالة أي المريء المتبقية، وتجنب إصابة الشعب الهوائية الخلفية.
2. موقع الأبهر الصدري تنازلي وإدراج 16 G ذات الرؤوس صريحا قنية. تأمين قنية في مكان بالتعادل 4-0 الحرير.
3. تحديد موقع السفن قوس الأبهر، وتطبيق مقطع الجراحية إلى الشريان تحت الترقوة الأيسر. ترك الشريان السباتي الأيسر برنامج الأمم المتحدة للقص لالفرعيةمتتالية دي-بث.
4. إدارة الجرعة الأولى من شلل القلب من خلال ربط أنابيب شلل القلب إلى الشريان الأبهر قنية 16 G. الشريان السباتي يجب المغطي مؤقتا مع ملقط لضمان تسليم كاف من شلل القلب.
   ملاحظة: هناك فائدة إلى وجود قنية الأبهر المرفقة هي أن شلل القلب يمكن أن تدار بشكل مستمر و / أو بشكل متقطع كما تريد. لجرعات متقطعة، ونحن عادة تقديم شلل القلب كل 10-15 دقيقة في 5 مل boluses أكثر من 30 - 45 ثانية.
5. باستخدام مقص Metzenbaum و / أو وير حاد، تشريح الدهون المناطق شبه الأبهر بعيدا من الشريان الأورطي. تأكد من أن الشريان الأورطي هو خالية نسبيا من الدهون والنسيج الضام من الشريان تحت الترقوة الأيسر (قوس البعيدة) إلى موقع إقناء؛ إدخال القنية لها.
6. المقبل، فضح القصبات الهوائية mainstem اليسار باستخدام وير حاد، وligate أنه قريب مع ربطة عنق من الحرير 4-0. المسح الشامل اليسار البعيدة القصبات الهوائية إلى ربطة باستخدام مقص القزحية. إجراء استئصال الرئة اليسرى قبل ligating الرئوية اليسرىالشريان والوريد مع 4-0 العلاقات الحرير. المسح الشامل البعيدة للرباط وإزالة الرئة اليسرى.
7. على النحو الوارد أعلاه، وإزالة كل فصوص الرئة الأخرى باستثناء الحق في الفص العلوي والمتوسطة. تجنب إصابة IVC في عملية أداء lobectomies.
8. توصيل أنابيب شلل القلب إلى الشريان الأبهر قنية وإدارة شلل القلب مستمر في حين يجري إعداد المتلقي. وضع الكسب غير المشروع القلب والرئة في وعاء معقم (على سبيل المثال، كوب).

3. مستلم عملية

1. تخدير المتلقي وفقا لعملية المانحة أعلاه. استخدام مرهم التعليم والتدريب المهني لحماية العينين الحيوان من جفاف. تأكيد التخدير في كثير من الأحيان عن طريق دواسة قرصة.
2. وضع الحيوان وفقا لعملية المانحة، وهذه المرة ترك forelimb الصحيح مجانية لمراقبة العلامات الحيوية وعمق مخدر.
3. حلق البطن من xiphisternum إلى القضيب. حلاقة منطقة صغيرة من الفخذ الأيسر (للوصول IV لاحقا). تطبيقالسماط وكيل لأسطح المنطوق، انتظر حوالي 5 دقائق، وإزالة الشعر بقطعة من الشاش.
4. الإعدادية مواقع الجراحية مع اليود البوفيدون أو الحل القائم على chlorexidine. اختراق مواقع الجراحي مع 0،1-0،5٪ ليدوكائين تحت الجلد.
5. يبضع الرغامى وتهوية المتلقي وفقا لتوجيهات أعلاه. بدلا من ذلك، والحفاظ على المتلقي تحت التخدير مخروط الأنف.
6. إدخال قسطرة في الوريد الفخذي كما هو موضح أعلاه. حقن 300-500 وحدة دولية من الهيبارين غير المجزأ من خلال الأنبوب الرابع، وبعد ذلك تدفق أنابيب مع 3-5 مل من المياه المالحة.
7. إجراء عملية فتح البطن عن طريق شق البطن خط الوسط مع مشرط 22 شفرة من xiphisternum إلى القضيب. التراجع عن جدار البطن باستخدام ضام الذاتي الاحتفاظ. وبعد ذلك، سحب أحشاء متفوق وإلى الجانب الأيسر للفأر. التفاف عليها في الحارة، غارقة في المياه المالحة الشاش.
8. فضح الشريان الأورطي IVC والبطن من قبل تشريح حادة خلال المغطي إعادةترو-البريتوني الدهون.
9. لدينا المشبك السفينة المنحني متاحة وجاهزة.
10. محيطي تحرير IVC والشريان الأورطي قريب وبشكل أقصى وتطويق لهم 4-0 العلاقات الحرير. يجب أن يكون هناك ما يقرب من 2-3 سم المسافة بين هذه المواقع.
11. تطبيق بعناية المشبك السفينة المنحني، وضمان أن يتعرض جزء كاف من كلا IVC والشريان الأبهر فوق فكي المشبك.
12. إجراء شق في الجدار الأمامي للIVC مع إبرة 25 G متصلة 1 مل حقنة مليئة المالحة. تمديد شق مع مقص بوتس لتتناسب مع طول المتبرع IVC الفوهة.
13. إزالة الطعم القلب والرئة من الحاوية الخاصة به وفصلها من شلل القلب. وضع الكسب غير المشروع في البطن المستلم في وضع الأمثل لأداء مفاغرة وريدية.
    ملاحظة: سوف يكون موجها والكسب غير المشروع القلب والرئة في نهاية المطاف بشكل غير مباشر قليلا، حيث يشير مهيمنة نحو عام البطن السفلى اليسرى رباعي.
14. تأمين كعبواصبع القدم ينتهي من مفاغرة مع النايلون 9-0 خياطة. ربط عقدة آمنة في كل نهاية، تاركا إبرة مثبتة في الذراع الطويلة للخياطة، ونهاية قصيرة من الخيط أن تكون مرتبطة في وقت لاحق. إدارة جرعة من شلل القلب.
15. في إدارة الموضة، كامل نصف خط خياطة وربطة عنق على الذراع خياطة قصيرة معارضة. إدارة جرعة من شلل القلب.
16. إكمال النصف الآخر من الخط خياطة وربطة عنق عليه. مفاغرة وريدية كاملة. إدارة جرعة من شلل القلب
17. الشرق الكسب غير المشروع القلب والرئة مع الإشارة مهيمنة القلب تجاه من البطن السفلى اليسرى رباعي. تأكد من أن مفاغرة وريدية لا ملتويا أو الملتوية.
18. تقييم طول الشريان الأورطي المانحة التي سوف تكون هناك حاجة للوصول إلى الشريان الأورطي المتلقي، والحفاظ على حد سواء IVC وanastomoses الأبهري في تكوينات خالية من التوتر وبرنامج الأمم المتحدة للمتلوى.
19. تقسيم الأبهر النازل (البعيدة إلى الشريان تحت الترقوة الأيسر) مع مقص القزحية.
20. جعل incisioن في الجدار الأمامي من الشريان الأورطي المتلقي مع إبرة 25 G متصلة 1 مل حقنة مليئة المالحة. تمديد شق مع مقص بوتس لتتناسب مع طول فتحة الأبهر المانحة.
21. ترسيخ اصبع القدم (الجانب المتفوق) من الشريان الأورطي المانحة إلى المستلم الشريان الأورطي باستخدام خياطة 9-0 النايلون. ثم، لتمرير الإبرة إلى الجانب الأنسي من الشريان الأورطي وإكمال نصف مفاغرة في إدارة الموضة.
22. في كعب مفاغرة الشريان الأبهر، عكس اتجاه خط خياطة (التحول في اتجاه خياطة)، وإكمال النصف الجانبي للمفاغرة في إدارة الموضة.
23. إزالة ببطء القسطرة الرابع في SVC، وligate في SVC مع مشبك جراحي.
24. دي الهواء الشريان الأورطي من خلال تحديد موقع برنامج الأمم المتحدة للقص ترك الشريان السباتي المشترك. عقد الشريان مفتوحا، في وضع مستقيم من شأنها أن تسمح للهواء أن أخلت بحرية.
25. لفترة وجيزة فتح فكي المشبك السفينة المنحني والسماح الشريان السباتي ينزف (دالبريد الجوي) ل2-3 ثانية. إعادة تطبيق المشبك السفينة.
26. تطبيق مقطع الجراحية إلى الشريان السباتي. إزالة المشبك السفينة المنحني.
27. تحقق من وجود نزيف في خطوط الدرز. إذا كان موجودا، وتطبيق ضغط لطيف مع الشاش الجراحي أو إصلاح بطول 9-0 النايلون خياطة (اعتمادا على شدة النزيف).
28. قلب المانحة أن تستأنف الضرب في غضون دقائق.
29. إيلاء اهتمام وثيق للعلامات الحيوية المستلم، وعمق التخدير، وإدارة حجم الإنعاش حسب الحاجة.
30. اعتمادا على النهاية التجريبية، إما إغلاق بطن الحيوان والسماح لها التعافي من التخدير، أو إعداد الحيوان للتقييم القلب والأوعية الدموية.
    ملاحظة: أمثلة من تقييم الكسب غير المشروع وتشمل التدابير في الجسم الحي التي تعتمد على الحمل والحمل مستقل ديناميكا الدم، تدابير في المختبر وظيفة في Langendorff وسائط قلب العمل، و(في الجراحة البقاء على قيد الحياة) تخطيط صدى القلب أو تحقيقات MRI.
31. فينهاية التجارب النهائية الحادة، يصرح باستخدامها الحيوانات عن طريق استنزاف.

النتائج

تقنية HAHLT المذكورة أعلاه هي عالية التقنية وتتطلب اهتماما وثيقا بالتفاصيل. ويبين الجدول 1 بعض العوامل الرئيسية المرتبطة ناجحة مقابل إجراءات غير ناجحة، ويمكن أن تستخدم كدليل لاستكشاف الصعوبات التقنية.

بعد غير مثبت الشريا...

Discussion

سوف تكون مسنودة النجاح مع تقنية الموضحة هنا على عدة عوامل. ومفتاح بينها أن يكون ضمان الاستقرار في كل من المتبرع والمتلقي الحيوانات، واعتماد تقنية المنطوق الدقيقة التي هي آمنة ومتوافقة مع الحد الأدنى من فقدان الدم، وضمان اعتقال شلل القلب الكامل مع موحد الكسب غير المش...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Celsior Cardioplegic Soution	Genzyme		The solution is kept on ice throughout the procedure. We prepare our own solution, with slight modifications.
Rodent Ventilator	Harvard Apparatus	Model 683
Vital Sign Monitor	Nonin	Model 9847V	Displays SpO2 and heart rate.
IV Cannulae	Jelco	3063	24 - 26 G x 3/4" cannulae.
IV Tubing	CareFusion	MP9259-C	Short-length connector tubing (18 cm).
Surgical Clips	Teleflex Medical	001204	Horizon titanium ligating clips.
Sutures	Ethicon, Sharpoint	LA54G, AK-0107	3-0 silk reel, and 9-0 prolene suture (single-armed, DR5 needle).
Surgical Instruments	Not Applicable	Not Applicable	The instruments used are generic, and can be purchased from any surgical supply company.