A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
* These authors contributed equally
يوضح البروتوكول المقدم هنا بالتفصيل إجراءات جمع البيانات وتحليل البيانات للتصوير المقطعي للتماسك البصري الموجه بالصور (OCT) ويوضح تطبيقه في نماذج القوارض المتعددة لأمراض العين.
دائما ما تكون أمراض العين ، مثل الضمور البقعي المرتبط بالعمر ، والزرق ، والتهاب الشبكية الصباغي ، والتهاب القزحية ، دائما بتغيرات هيكلية في الشبكية. تظهر هذه الأمراض التي تصيب قاع العين دائما تشوهات نموذجية في أنواع معينة من الخلايا في شبكية العين ، بما في ذلك الخلايا المستقبلة للضوء والخلايا العقدية الشبكية والخلايا الموجودة في الأوعية الدموية في الشبكية والخلايا في خلايا الأوعية الدموية المشيمية. تقنيات التصوير غير الغازية والكفاءة العالية والقابلة للتكيف مطلوبة لكل من الممارسة السريرية والأبحاث الأساسية. يلبي التصوير المقطعي البصري الموجه بالصور (OCT) هذه المتطلبات لأنه يجمع بين تصوير قاع العين والتصوير المقطعي البصري عالي الدقة ، مما يوفر تشخيصا دقيقا للآفات الصغيرة بالإضافة إلى التغييرات المهمة في بنية الشبكية. توضح هذه الدراسة بالتفصيل إجراءات جمع البيانات وتحليل البيانات ل OCT الموجه بالصور وتوضح تطبيقه في نماذج القوارض للأوعية الدموية المشيمية الجديدة (CNV) ، وسحق العصب البصري (ONC) ، وتنكس الشبكية الناجم عن الضوء ، والتهاب القزحية المناعي الذاتي التجريبي (EAU). تساعد هذه التقنية الباحثين في مجال العين على تحديد التغيرات الهيكلية لشبكية القوارض بشكل ملائم وموثوق وقابل للتتبع.
تظهر أمراض العين التي تصيب قاع العين دائما تشوهات نموذجية في أنواع معينة من الخلايا في شبكية العين ، مثل الخلايا المستقبلة للضوء ، وخلايا العقدة الشبكية ، والخلايا الموجودة في الأوعية الدموية للشبكية ، والخلايا في الأوعية الدموية المشيمية ، والتي قد تؤثر لاحقا على حدة البصر للمرضى1. لتجنب ضعف البصر الذي لا رجعة فيه ، يلزم التشخيص في الوقت المناسب والعلاجات المناسبة1. تم استخدام التصوير المقطعي البصري (OCT) على نطاق واسع في العيادة لتقييم مجموعة من أمراض العين ، بما في ذلك الضمور البقعي المرتبط بالعمر ، والتهاب الشبكية الصباغي ، والزرق ، والتهاب القزحية ، وانفصال الشبكية ، من بين أمور أخرى2،3،4. هذا النوع من تقنيات التصوير غير الغازية والكفاءة العالية والقابلة للتكيف ضروري أيضا لتقييم ظروف المرض في الوقت المناسب فيالتجارب 5،6،7،8،9،10.
يستخدم التصوير المقطعي للتماسك البصري الموجه بالصور (OCT) قياس التداخل لإنتاج صور مقطعية لشبكية العين الحيوانية بدقة طولية تبلغ 1.8 ميكرومتر ودقة محورية تبلغ 2 ميكرومتر. لها ثلاث مزايا على الأقل في التحقيق في التغيرات المعمارية للشبكية2،3،4،5،6،7،8،9،10. أولا ، إنها تقنية غير جراحية تسمح للباحثين بمتابعة موقع الاهتمام في نفس شبكية العينالحيوانية 5،6،7،8،9،10. ثانيا ، تقلل هذه السمة بشكل كبير من حجم العينة لكل تجربة3. وفي الوقت نفسه ، فإنه يوفر الكثير من الوقت والجهد في المشاريع البحثية2،3،4،5،6،7،8،9،10. ثالثا ، يكتسب OCT الموجه بالصور صورا لقاع العين الملونة أثناء التقاط صور OCT ، مما يوفر نتائج دقيقة وموثوقة للمستخدمين.
تصف هذه المخطوطة إجراءات جمع الصور وتحليل البيانات ل OCT الموجه بالصور وتشرح تطبيقها في نماذج الفئران والجرذان من الأوعية الدموية المشيمية الجديدة (CNV) 11،12 ، سحق العصب البصري (ONC) 13،14،15،16 ، تنكس الشبكية الناجم عن الضوء17،18،19،20،21، والتهاب القزحية المناعي الذاتي التجريبي (EAU) 22،23. باستخدام هذه التقنية متعددة الاستخدامات ، يمكن للباحثين التقاط صور OCT عالية الدقة بالإضافة إلى صور قاع العين بسهولة وكفاءة.
تتوافق جميع الإجراءات الحيوانية مع بيان جمعية أبحاث الرؤية وطب العيون حول استخدام في أبحاث طب العيون والرؤية وتمت الموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامه في جامعة ونتشو الطبية (WMU). تم منح الفئران والفئران حرية الوصول إلى الماء والطعام بكثافة إضاءة بيئية تبلغ 18 لوكس في دورة ظلام / ضوء مدتها 12 ساعة.
1. تحضير نماذج العين
2. إعداد وحدة OCT
3. تحضير لتجارب OCT
4. تصوير OCT الموجه بالصور
ملاحظة: تم تقسيم واجهة البرنامج إلى ثلاثة أجزاء: صورة المجال الساطع ، وعلامات تبويب التحكم OCT ، وشاشة OCT (الشكل 2).
5. قياس السماكة والتحليل الكمي
ملاحظة: يحتوي OCT هذا على برنامج تحليل مدمج. يمكن تقسيم صور OCT وتحليلها باستخدام هذا البرنامج (الشكل 3).
يمكن استخدام OCT الموجه بالصور لمراقبة تطور بقعة الليزر في الأوعية الدموية المشيمية الجديدة التي يسببها الليزر (CNV) في الفئران. كما هو موضح في الشكل 1 ، مرت الأوعية الدموية لحديثي الولادة عبر غشاء بروخ وكذلك طبقة ظهارة صبغة الشبكية (RPE) وشكلت ندبة ليفية بعد إ...
يوفر هذا البروتوكول إرشادات لجمع الصور وقياس سمك OCT الموجه بالصور. من خلال إظهار نماذج القوارض الأربعة الأكثر شيوعا لأمراض العين ، وجد الباحثون أن OCT الموجه بالصور يوفر أداء ممتازا في فحص التغيرات الهيكلية الجذرية في الشبكية. في الواقع ، مع الصور عالية الدقة ، يمكن العثو?...
لا يوجد لدى أي من المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.
يشكر المؤلفون أعضاء المختبر الرئيسي للدولة لطب العيون والبصريات وعلوم الرؤية على دعمهم الفني وتعليقاتهم المفيدة فيما يتعلق بالمخطوطة. تم دعم هذا العمل من خلال منح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82101169 ، 81800857 ، 81870690) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية لمقاطعة تشجيانغ في الصين (LGD22H120001 ، LTGD23H120001 ، LTGC23H120001) ، وبرنامج مكتب ونتشو للعلوم والتكنولوجيا في الصين (Y20211159) ، ومشروع دعم العلوم والتكنولوجيا في قويتشو (Qiankehezhicheng [2020] 4Y146) ومشروع المختبر الرئيسي للدولة لطب العيون ، البصريات وعلوم الرؤية (رقم K03-20220205).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
BALB/c mouse | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Animal model preparations | |
C57BL/6JNifdc mouse | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Animal model preparations | |
Carbomer Eye Gel | Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch & Lomb | Moisten the cornea | |
Complete Freund’s adjuvant | Sigma | F5881 | EAU experiment |
Experimental platform | Phoenix Technology Group | Animal model preparations | |
hIRBP161-180 | Shanghai Sangon Biological Engineering Technology & Services Co., Ltd. | EAU experiment | |
Ketamine | Ceva Sante Animale | General anesthesia | |
Laser box | Haag-Streit Group | Merilas 532α | Animal model preparations |
Lewis rat | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Animal model preparations | |
Mycobacterium Tuberculosis H37RA | Sigma | 344289 | EAU experiment |
Phoneix Micron IV with image-guided OCT and image-guided laser | Phoenix Technology Group | Animal model preparations | |
Tissue forceps | Suzhou Mingren Medical Instrument Co., Ltd | MR-F101A-5 | Animal model preparations |
Tropicamide Phenylephrine Eye Drops | SANTEN OY, Japan | Eye dilatation | |
Vannas scissors | Suzhou Mingren Medical Instrument Co., Ltd | MR-S121A | Animal model preparations |
Xylazine | Ceva Sante Animale | General anesthesia |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved