A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

الهدف من هذا البروتوكول هو إنشاء نموذج لتليف عضلات الفم والوجه. مقارنة الأنسجة بين الفئران ماستر وعضلة الظنبوب الأمامية بعد إصابة التجمد أكدت تليف عضلات العضلة. سيسهل هذا النموذج إجراء مزيد من التحقيق في الآلية الكامنة وراء تليف عضلات الفم والوجه.

Abstract

تشكل عضلة الفم والوجه مجموعة فرعية من الأنسجة العضلية الهيكلية ، مع مسار تطوري متميز وأصل تطوري. على عكس عضلات الأطراف المشتقة من السوميت ، تنشأ عضلات الفم والوجه من الأقواس المتفرعة ، مع مساهمات حصرية من القمة العصبية القحفية. كشفت دراسة حديثة أن التجديد يختلف أيضا في مجموعة عضلات الفم والوجه. ومع ذلك ، لا يزال يتعين الكشف عن الآلية التنظيمية الأساسية. تركز نماذج تجديد العضلات الهيكلية الحالية بشكل أساسي على الأطراف وعضلات الجذع. في هذا البروتوكول ، تم استخدام الثلج الجاف للحث على إصابة التجمد في عضلة عظمة الفأر وعضلة الظنبوب الأمامية لإنشاء نموذج تليف عضلات الفم والوجه. كانت الديناميات الزمنية للخلايا الساتلية العضلية والأسلاف الليفية الأديبوجينية مختلفة بين العضلتين ، مما أدى إلى ضعف تجديد الألياف العضلية وترسب المصفوفة خارج الخلية المفرط. بمساعدة هذا النموذج ، يمكن إجراء تحقيق أعمق في تجديد العضلات في منطقة الفم والوجه لتطوير مناهج علاجية للمرضى الذين يعانون من أمراض الفم والوجه.

Introduction

تعتبر عضلات الفم والوجه ضرورية في الأنشطة الفسيولوجية اليومية مثل المضغ والكلام والتنفس وتعبيرات الوجه1. ومع ذلك ، في التشوهات الخلقية الفموية الوجهية ، تظهر هذه العضلات تغيرات ضامرة وتليفية ، مما يؤدي إلى ضعف صحة الجسم والإدراك الاجتماعي2. لا تزال الجراحة الترميمية للوجه هي علاج الخط الأول ، ولكن ما يصل إلى 30-70٪ من مرضى ما بعد الجراحة لا يزالون يعانون من فقدان العضلات واختلال وظيفي في العضلات 3,4 يعزى فشل تجديد عضلات الفم والوجه إلى عوامل جوهرية لا يمكن تصحيحها بالجراحة وحدها.

ظهور عضلات الفم والوجه هو حداثة تطورية ، يرافق رأس الفقا....

Protocol

تمت مراجعة جميع الإجراءات الحيوانية في هذه الدراسة والموافقة عليها من قبل اللجنة الأخلاقية لمدرسة غرب الصين لطب الأسنان ، جامعة سيتشوان (WCHSIRB-D-2020-114). تم تربية ذكور الفئران C57BL / 6 (5 أسابيع) في منشأة يتم التحكم فيها بالرطوبة (53 ± 2٪) ويتم التحكم في درجة حرارتها (23 ± 2 درجة مئوية) وكانت في دورة الضوء / الظلام لمدة 12 ساعة. انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المواد والكواشف والأدوات المستخدمة في هذا البروتوكول.

1. إصابة التجمد

  1. التخدير: قم بتخدير الفئران بكرات قطنية مبللة بالإيزوفلوران وحقن تيلتامين-زولازيبام داخل الصفاق بجرعة 50 مجم / كجم. تم توفير التسكين قبل وبعد الجرا....

النتائج

كشف تلطيخ HE و Sirius Red (الشكل 4 والشكل التكميلي S1) عن تجديد كامل لعضلات TA في نموذج إصابة التجمد هذا. في المقابل ، أظهر MAS ضعف تجديد الألياف العضلية وترسب المصفوفة خارج الخلية المفرط. تظهر أنسجة عضلة MAS و TA السليمة في الشكل 4A ، B ، حيث تكو?.......

Discussion

هناك مجموعة متنوعة من نماذج الإصابة لدراسة تجديد العضلات والهيكل العظمي ، بما في ذلك استخدام المحفزات الفيزيائية والكيميائية والجراحية10،11،12،13،14،15،16. السموم ا.......

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذه الدراسة بمنح من لجنة الصحة والعافية في مقاطعة سيتشوان (رقم المنحة: 21PJ063) والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة: 82001031).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1 mL syringeShifeng Medical Apparatus and Instrument (Chengdu, Sichuan, China)1-ml syringe/
AcetoneChron ChemicalsAceton/
Adhesion microscope slidesCitotest Scientific188105/
Animal depilatoryPhygene ScientificPH1877/
BSA (bovine serum albumin)Solarbio Life SciencesA8010/
DAPISolarbio Life SciencesC0065/
Donkey anti-goat Alexa Fluor 488Abcamab1501291:200
donkey serumSolarbio Life SciencesSL050/
Dry IceSinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China)rice-shaped dry ice/
IFKine Red Donkey anti-rabbitAbbkine Scientific CompanyA244211:200
Insulation barrels (big)ThermosD600/
Insulation barrels (small)Polar Ware250B/
IsofluraneRWD Life Technology Company (Shenzhen, Guangdong, China)R510-22/
IsopentaneMACKLINM813375/
LamininSigma-AldrichL93931:1000
Liquid nitrogenSinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China)//
M.O.M kitVector LaboratoriesBMK-2202
Mice  Dashuo Biological Technology Company(Chengdu, Sichuan, China)5 weeks old/
mounting mediumSolarbio Life SciencesS2100/
Nertral balsamSolarbio Life SciencesG8590/
Pax7Developmental Studies Hybridoma Bank Pax71:5
PdgfraR&D systemsAF10621:40
Sirus Red Staining KitSolarbio Life SciencesG1472/
Surgical instruments (forceps, scissors, needle holder, scalpel, and suture)Zhuoyue Medical Instrument (Suqian, Jiangsu, China)//
Tissue-tek OCTSakura4583/
TritonShanghai Scigrace BiotechABIO-Biofroxx-0006A/
ZoletilVirbacZoletil 50/

References

  1. Yoshioka, K., Kitajima, Y., Seko, D., Tsuchiya, Y., Ono, Y. The body region specificity in murine models of muscle regeneration and atrophy. Acta Physiologica. 231 (1), e13553 (2021).
  2. Worley, M. L., Patel, K. G., Kilpatrick, L. A. Cleft lip and palate.....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved