نموذج فأر لالتهاب الجيب بعد استئصال المستقيم والقولون ومفاغرة الجيب اللفائفي الشرجي باستخدام كبريتات ديكستران الصوديوم

Summary

يصف هذا البروتوكول طريقة إنشاء نموذج الفئران من التهاب الجيب. تم إنشاء نموذج الجيب اللفائفي عن طريق إجراء جراحة مفاغرة الجيب اللفائفي الشرجي (IPAA) باستخدام تقنيات الجراحة المجهرية. بعد الجراحة ، عولج الجرذ بنسبة 4٪ من كبريتات ديكستران الصوديوم (DSS) لمدة 4 أيام.

Abstract

التهاب القولون التقرحي (UC) هو مرض مزمن بوساطة المناعة يصيب القولون والمستقيم بالكامل مع مسار انتكاسي وتحويل ، مما يسبب مراضة مدى الحياة. عندما يكون العلاج الطبي غير فعال ، خاصة في حالات النزيف المعدي المعوي الحاد أو الانثقاب أو تضخم القولون السام أو التسرطن ، تصبح الجراحة خط الدفاع الأخير لعلاج جامعة كاليفورنيا. يوفر الاستئصال الكلي للقولون والمستقيم ومفاغرة الجيب اللفائفي الشرجي (IPAA) أفضل فرصة للعلاج على المدى الطويل. التهاب الجيب هو أكثر مضاعفات ما بعد الجراحة شيوعا ومزعجة. في هذا التحقيق ، يتم استخدام الجراحة المجهرية لإنشاء نموذج الجيب اللفائفي في الفئران التجريبية عن طريق جراحة IPAA. بعد ذلك ، يتم إنشاء نموذج فئران مستدام من التهاب الجيب عن طريق إحداث التهاب في الجيب اللفائفي مع كبريتات ديكستران الصوديوم (DSS). يتم التحقق من صحة التأسيس الناجح لالتهاب جيب الفئران من خلال تحليل الحالة العامة بعد الجراحة ، والوزن ، وتناول الطعام والماء ، وبيانات البراز ، بالإضافة إلى أمراض أنسجة الحقيبة ، والكيمياء المناعية ، وتحليل العوامل الالتهابية. يوفر هذا النموذج الحيواني التجريبي لالتهاب الجيب أساسا لدراسة التسبب في المرض وعلاج الحالة.

Introduction

التهاب الجيب هو التهاب غير محدد يؤثر على الجيب اللفائفي وهو أحد المضاعفات السائدة بعد استئصال المستقيم والقولون الكلي ومفاغرة الجيب اللفائفي الشرجي (IPAA) لدى الأفراد المصابين بالتهاب القولون التقرحي (UC) ^1،2،3. هذه الحالة لها معدل حدوث مرتفع نسبيا يصل إلى 50٪ ويمكن أن تسبب مظاهر سريرية مختلفة ، بما في ذلك الإسهال وآلام البطن وفقدان الدم البرازي والحمى. لا يزال السبب الدقيق لالتهاب الجيب بعيد المنال ، على الرغم من أن بعض الباحثين يعتقدون أن التحول في الأكياس النباتية قد يؤدي إلى تنشيط المناعة والالتهاب اللاحق^4،

Protocol

تم إجراء جميع التجارب على وفقا لسياسات اللجان الأخلاقية للمستشفى العام بجامعة تيانجين الطبية. تم استخدام ذكور الفئران Sprague-Dawley الذين تتراوح أعمارهم بين 9 و 12 أسبوعا ، والتي تزن حوالي 320-360 جم ، لهذه الدراسة. يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.

1. اختيار وصيانتها

1. حدد صحيا (وزن الجسم ~ 220-240 جم).
2. تأكد من أنها تفي بمعايير المستوى المحدد الخالي من مسببات الأمراض (SPF) ¹⁵ ويتم تربيتها بشكل تكيفي لمدة لا تقل عن أسبوعين في بيئة ذات تهوية كافية (من 8 إلى 12 تغييرا للهواء في الساعة) ، ودرجة حرارة مريحة (20-....

النتائج

تقييم الحالة العامة للفئران النموذجية للكيس اللفائفي بعد التأسيس
بعد أن اجتاز المشغل منحنى التعلم الجراحي IPAA ، تحملت الفئران الجراحة جيدا ، مع مدة جراحية تبلغ 192.94 دقيقة ± 27.15 دقيقة ، وحدثت مضاعفات أقل بعد الجراحة. خلال فترة ما بعد الجراحة المبكرة ، شهدت الفئرا.......

Discussion

التهاب القولون التقرحي (UC) هو التهاب معوي مزمن يتميز بألم شرسوفي متكرر وإسهال وبراز دموي مخاطي. يؤثر في المقام الأول على المستقيم وقد يشمل القولون المتقدم بدرجات متفاوتة. تلعب الجراحة دورا حاسما في إدارة UC^17،18،19. منذ أن ق.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anhydrous ethanol	Tianjin Fengchuan Chemical Reagent Technology Co., Ltd	China	Hematoxin-eosin Staining
Dextran Sulfate Sodium	Yeasen	60316ES76	Used to induce pouch inflammation
Formaldehyde solution	Tianjin Zhiyuan Reagent Company	China	Hematoxin-eosin Staining
Gauze	Jiangxi Zhonggan Medical Equipment Company	China	Used for animal microsurgery
Hematoxylin	Beijing Zhongshan Jinqiao Company	China	Hematoxin-eosin Staining
Interferon γ  Detection reagent kit	Cloud-clone	SEA049Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-10 detection kit	Cloud-clone	SEA056Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-17 detection kit	Cloud-clone	SEA063Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-6 detection kit	Cloud-clone	SEA079Ra	Detecting inflammatory factors
Iodophor	Tangpai Medical Equipment Co., Ltd	China	Used for animal microsurgery
Microscopic manipulation instruments	Aesculap	Germany	Used for animal microsurgery
Occludin	abcam	ab216327	Immunohistochemical testing
Sewing needle	Yangzhou Fuda Medical Equipment Co., Ltd	China	Used for animal microsurgery
tumor necrosis factor α Detection reagent kit	Cloud-clone	SEA133Ra	Detecting inflammatory factors
Two person binocular surgical microscope	OPTON	Germany	Used for animal microsurgery
Xylene	Tianjin Yingda Rare and Precious Reagent Factory	China	Hematoxin-eosin Staining