A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה מתאר את השיטה להקמת מודל חולדה של pouchitis. מודל השקית האיליאלית נוצר על ידי ביצוע ניתוח אנסטומוזה אנאלי (IPAA) באמצעות טכניקות מיקרוכירורגיות. לאחר הניתוח, החולדה טופלה ב-4% דקסטרן סולפט נתרן (DSS) במשך 4 ימים.

Abstract

קוליטיס כיבית (UC) היא מחלה כרונית בתיווך מערכת החיסון הפוגעת בכל המעי הגס ופי הטבעת במסלול התקפי והפוגתי, וגורמת לתחלואה לכל החיים. כאשר הטיפול הרפואי אינו יעיל, במיוחד במקרים של דימום מסיבי במערכת העיכול, ניקוב, מגה-קולון רעיל או סרטן, ניתוח הופך לקו ההגנה האחרון לריפוי UC. כריתה כוללת של המעי הגס ואנסטומוזיס אנאלי (IPAA) מציעים את הסיכוי הטוב ביותר לטיפול ארוך טווח. פוצ'יטיס הוא הסיבוך הנפוץ והבעייתי ביותר לאחר הניתוח. במחקר זה, מיקרו-כירורגיה משמשת ליצירת מודל כיס איליאלי בחולדות ניסיוניות באמצעות ניתוח IPAA. לאחר מכן, מודל חולדה מתמשך של pouchitis נקבע על ידי גרימת דלקת של שקיק ileal עם נתרן dextran סולפט (DSS). ההקמה המוצלחת של פאוצ'יטיס חולדה מאומתת באמצעות ניתוח של מצב כללי לאחר הניתוח, משקל, צריכת מזון ומים, נתוני צואה, כמו גם פתולוגיה של רקמת כיס, אימונוהיסטוכימיה וניתוח גורמים דלקתיים. מודל ניסיוני זה של בעלי חיים של pouchitis מספק בסיס לחקר הפתוגנזה והטיפול במצב.

Introduction

פוצ'יטיס היא דלקת לא ספציפית המשפיעה על כיס האיליאלי והיא סיבוך שכיח לאחר כריתת פרוקטוקולקטומיה מלאה ואנסטומוזיס אנאלי של כיס איליאלי (IPAA) אצל אנשים עם קוליטיס כיבית (UC)1,2,3. מצב זה הוא בעל שיעור התרחשות גבוה יחסית של עד 50% ועלול לגרום לביטויים קליניים שונים, כולל שלשולים, כאבי בטן, איבוד דם בצואה וחום. הגורם המדויק לפוצ'יטיס נותר חמקמק, אם כי כמה חוקרים מאמינים כי שינוי בפלורה של השקית עשוי לעורר הפעלה חיסונית ולאחר מכן דלקת 4,5,6,7.....

Protocol

כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם למדיניות של ועדות האתיקה של בית החולים הכללי של האוניברסיטה הרפואית בטיאן-ג'ין. במחקר זה נעשה שימוש בחולדות Sprague-Dawley זכרים בגילאי 9 עד 12 שבועות, במשקל של כ-320-360 גרם. פרטי הריאגנטים והציוד בהם נעשה שימוש מפורטים בטבלת החומרים.

1. בחירת בעלי חיים ותחזוקתם

  1. בחר חיה בריאה (משקל גוף של ~ 220-240 גרם).
  2. ודא שהם עומדים בקריטריונים של רמה ספציפית ללא פתוגן (SPF)15 ומגודלים באופן אדפטיבי למשך שבועיים לפחות בסביבה עם אוורור הולם (8 עד 12 החלפות אוויר בשעה), טמפרטורה נוחה (20-25 מעלות צלזיוס), לחות ....

תוצאות

הערכת מצב כללית של חולדות מודל כיס איליאלי לאחר ההקמה
לאחר שהמפעיל עבר את עקומת הלמידה הכירורגית IPAA, החולדות סבלו את הניתוח היטב, עם משך ניתוח של 192.94 דקות ± 27.15 דקות, ופחות סיבוכים לאחר הניתוח התרחשו. במהלך התקופה המוקדמת שלאחר הניתוח, חולדות חוו ירידה בצריכה הת.......

Discussion

קוליטיס כיבית (UC) היא דלקת מעיים כרונית המאופיינת בכאבים אפיגסטריים חוזרים, שלשולים וצואה דמית של ריר. זה משפיע בעיקר על פי הטבעת ועשוי לערב את המעי הגס המתקדם בדרגות שונות. ניתוח ממלא תפקיד מכריע בניהול UC 17,18,19. מאז פארקס.......

Disclosures

ללא.

Acknowledgements

ללא

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Anhydrous ethanolTianjin Fengchuan Chemical Reagent Technology Co., LtdChinaHematoxin-eosin Staining
Dextran Sulfate Sodium  Yeasen 60316ES76Used to induce pouch inflammation
Formaldehyde solutionTianjin Zhiyuan Reagent CompanyChinaHematoxin-eosin Staining
GauzeJiangxi Zhonggan Medical Equipment CompanyChinaUsed for animal microsurgery
HematoxylinBeijing Zhongshan Jinqiao CompanyChinaHematoxin-eosin Staining
Interferon γ  Detection reagent kitCloud-cloneSEA049RaDetecting inflammatory factors
Interleukin-10 detection kitCloud-cloneSEA056RaDetecting inflammatory factors
Interleukin-17 detection kitCloud-cloneSEA063RaDetecting inflammatory factors
Interleukin-6 detection kitCloud-cloneSEA079RaDetecting inflammatory factors
IodophorTangpai Medical Equipment Co., LtdChinaUsed for animal microsurgery
Microscopic manipulation instrumentsAesculapGermanyUsed for animal microsurgery
Occludinabcamab216327Immunohistochemical testing
Sewing needleYangzhou Fuda Medical Equipment Co., LtdChinaUsed for animal microsurgery
tumor necrosis factor α Detection reagent kitCloud-cloneSEA133RaDetecting inflammatory factors
Two person binocular surgical microscopeOPTONGermanyUsed for animal microsurgery
XyleneTianjin Yingda Rare and Precious Reagent FactoryChinaHematoxin-eosin Staining

References

  1. Yang, M. L., Brar, M. S., Kennedy, E. D., De Buck Van Overstraeten, A. Laparoscopic versus transanal IPAA for ulcerative colitis: A patient-centered treatment trade-off study. Dis Colon Rectum. 67 (1), 107-113 (2024).
  2. Aktas, M. K., et al.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

207ProctocolectomyIlealDextranIPAA

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved