A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
يصف هذا البروتوكول عملية إحداث نموذج غيبوبة إقفارية دماغية باستخدام طريقة انسداد رباعية الأوعية المعدلة.
الغيبوبة الناجمة عن نقص التروية الدماغي هي أخطر مضاعفات نقص التروية الدماغية. يمكن أن يؤدي انسداد الأوعية الرباعية إلى إنشاء نموذج غيبوبة إقفارية دماغية لأبحاث الأمراض وتطوير الأدوية. ومع ذلك ، فإن طريقة الانسداد الرباعية الشائعة الاستخدام تتضمن بشكل أساسي إدخال قلم تخثير كهربائي في الثقبة الجناحية الثنائية للفقرة العنقية الأولى خلف الرقبة للتخثر الكهربائي للشرايين الفقرية. تنطوي هذه العملية على خطر عدم اكتمال التخثير الكهربائي والنزيف وتلف جذع الدماغ والحبل الشوكي. بعد أربع وعشرين ساعة من الجراحة ، تخضع الفئران المعاد تخديرها لربط الشريان السباتي أمام الرقبة. عمليتان جراحيتان يعرضان الفئران لخطر أكبر للإصابة بالعدوى وتزيد من الفترة التجريبية. في هذه الدراسة ، خلال إجراء جراحي واحد ، تم استخدام شق عنق الرحم الأمامي لتحديد الموقع الرئيسي حيث يخترق الشريان الفقري فقرة عنق الرحم الأولى. تم الكي كهربائيا للشرايين الفقرية الثنائية في ظل ظروف بصرية ، بينما تم فصل الشرايين السباتية المشتركة الثنائية لوضع عقدة فضفاضة. عندما بدأت أطراف الفئران في الوخز ، تم ربط الشرايين السباتية المشتركة الثنائية بسرعة للحث على غيبوبة إقفارية. يمكن لهذه الطريقة تجنب خطر العدوى الناجمة عن عمليتين جراحيتين ويسهل إجراؤها بمعدل نجاح مرتفع ، مما يوفر مرجعا مفيدا للممارسين المعنيين.
إصابات الدماغ الإقفارية هي أكثر إصابات الدماغ شيوعا في الممارسة السريرية ، حيث تمثل ما يقرب من 75٪ من حالات أمراض الأوعية الدموية الدماغية. يمكن أن يؤدي نقص التروية إلى إصابات وأمراض دماغية ثانويةشديدة 1،2 ، والغيبوبة هي أشد الأعراض الناجمة عن إصابة الدماغ نقص الأكسجين الإقفارية. إنه أيضا المسار النهائي للعديد من الحالات الحرجة3. الغيبوبة مرض خطير وشديد في الممارسة السريرية يصعبإدارته 4. كلما طالت مدة الغيبوبة ، زاد الخطر المحتمل. الاستيقاظ الفوري هو الهدف الأساسي في منع تدهور الحالة وتطورها. على الرغم من أن حقن النالوكسون له مجموعة واسعة من التطبيقات السريرية في تعزيز اليقظة ، إلا أنه لا يزال له بعض الآثار الجانبية5. لذلك ، فإن تطوير عقاقير مأمونة وفعالة تعزز اليقظة مشكلة ملحة تحتاج إلى معالجة. يعد إنشاء نموذج غيبوبة إقفارية دماغية بسيط وسهل التشغيل أمرا ضروريا لتوضيح التسبب في الغيبوبة الإقفارية ولتطوير الأدوية6،7،8.
الغرض من هذه الدراسة هو تقديم نموذج لإحداث غيبوبة إقفارية عالمية من خلال التخثير الكهربائي للشرايين الفقرية الثنائية (VA) والربط المؤقت للشرايين السباتية المشتركة الثنائية (CCA) ، وهو أمر بسيط وسهل الاستخدام للمبتدئين. تضمن البروتوكول السابق تعريض الثقبة الجناحية الثنائية للفقرة العنقية الخلفية الأولى أثناء العملية الأولى وحرق الثقبة الجناحية كهربائيا لمنع VAs الثنائية. تم إجراء عملية ثانية بعد 24 ساعة للحث على غيبوبة إقفارية كاملة عن طريق ربط CCAs الثنائية9،10،11،12. ومع ذلك ، بسبب الاختفاء ، هناك خطر عدم اكتمال التخثير الكهربائي والنزيف وجذع الدماغ وإصابة الحبل الشوكي ، بالإضافة إلى فترة تجريبية طويلة. لذلك ، من الضروري معالجة هذه المسائل.
هنا ، نقدم طريقة محسنة لنمذجة الغيبوبة الإقفارية. يتضمن الإجراء الرئيسي عمل شق متوسط في الرقبة الأمامية ، وإجراء استئصال كهربائي للأجهزة الافتراضية الثنائية في ظل ظروف بصرية ، وربط CCAs الثنائية لفترة وجيزة خلال عملية واحدة لمنع تدفق الدم إلى الدماغ بأكمله ، مما يتسبب في تثبيط مخطط كهربية الدماغ (EEG) السريع ويؤدي إلى غيبوبة. تؤدي هذه الطريقة أيضا إلى غيبوبة مستمرة لفترة وجيزة بعد إعادة التروية. هذا الإجراء سهل التنفيذ ، وصديق للمبتدئين ، ويقلل من خطر الإصابة بالصدمات الثانوية في ، وبالتالي تقصير الفترة التجريبية.
البروتوكول مناسب لدراسة الغيبوبة الإقفارية العالمية الناجمة عن السكتة القلبية. كما أنها مثالية لدراسة الخرف الإقفاري ، ويرجع ذلك أساسا إلى أن منطقة الدماغ الحصين حساسة للغاية لنقص التروية. وبالتالي ، يمكن أن يؤدي نقص التروية الدماغية العابر إلى تلف أو حتى فقدان الخلايا العصبية في الحصين13 ، مما يؤدي إلى خلل وظيفي معرفي. لذلك ، يمكن أن يوفر البروتوكول مرجعا للممارسين الذين يدرسون نقص التروية الدماغية والغيبوبة الإقفارية والخرف الإقفاري.
تم إجراء البروتوكول التجريبي وفقا لمتطلبات استخدام المختبر ولجنة رعاية واستخدام المؤسسية في جامعة فوشان (رقم السجل: 2023-643656). تم استخدام ذكور فئران Sprague Dawley (SD) (200 جم ± 20 جم ، 6-8 أسابيع) في هذه الدراسة. تمت كتابة جميع بيانات الأبحاث على وفقا لإرشادات ARRIVE (أبحاث: الإبلاغ عن التجارب في الجسم الحي). يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في الدراسة في جدول المواد.
1. زرع أقطاب مخطط كهربية الدماغ
2. العملية الجراحية لنموذج الغيبوبة الإقفارية الدماغية
3. استعادة
بسبب الالتهاب والتحفيز الآخر الناجم عن زرع الأقطاب الكهربائية ، قد يكون مخطط كهربية الدماغ غير مستقر ، لذلك تحتاج الفئران إلى التعافي لمدة 3 أيام. يمكن تضمين الفئران ذات مخطط كهربية الدماغ وتخطيط كهربية العضل الطبيعي بعد 3 أيام لإعداد نموذج الغيبوبة. عندما تم تخدير الفئر...
يؤدي انسداد الأوعية الرباعية إلى إصابات الدماغ الإقفارية ونقص الأكسجين ، والتي يمكن أن تحاكي الغيبوبة الحادة ، والسكتة القلبية ، والاختناق ، والصدمة ، وعدم انتظام ضربات القلب الشديد ، وغيرها من الحالات السريرية الحرجة التي يسببها نقص التروية الدماغية في الممارسة السر?...
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82173781 و 82373835) ، ومشروع أبحاث ما بعد الدكتوراه (BKS212055) ، ومشروع الابتكار في العلوم والتكنولوجيا التابع لمكتب فوشان للعلوم والتكنولوجيا (2320001007331) ، ومؤسسة قوانغدونغ للبحوث الأساسية والتطبيقية (2019A1515010806) ، والمشاريع الميدانية الرئيسية (التصنيع الذكي) للجامعات العامة في مقاطعة قوانغدونغ (2020ZDZX2057) ، ومشاريع البحث العلمي (الابتكار المميز) للعام جامعات في مقاطعة قوانغدونغ (2019KTSCX195).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
16 channel microfiber photoelectrode array | Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd | 2605 | |
4-0 Surgical suture | Nantong Holycon Medical Devices Co.,Ltd. | B-104 | |
6-0 Surgical suture | Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd. | JM1216-742417 | |
EEG electrode | Kedou Brain machine Technology Co., LTD | KD-EEGEMG | |
Electrocoagulation pen | CONPUVON Company | 465 | |
Lunion Stage Automatic Sleep Staging System | Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd. | 1336 | |
Miniature hand-held skull drill | Rayward Life Technology Co., Ltd | 87001 | |
Penicillin sodium | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 17121709-2 | |
SD rats | SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd. | 180-220g | |
Skull nail | GLOBALEBIO,LTD | / | |
Stereotaxic instrument | Rayward Life Technology Co., Ltd | 68801 | |
Zoletil 50 | Vic Trading (Shanghai) Co., LTD | BN 88SHA |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved