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Modelo de Coma Isquêmico Cerebral Induzido por Oclusão Modificada de Quatro Vasos
Neste Artigo
Resumo
Este protocolo descreve o processo de indução de um modelo de coma isquêmico cerebral usando um método modificado de oclusão de quatro vasos.
Resumo
O coma causado por isquemia cerebral é a complicação mais grave da isquemia cerebral. A oclusão de quatro vasos pode estabelecer um modelo de coma isquêmico cerebral para pesquisa de doenças e desenvolvimento de medicamentos. No entanto, o método de oclusão de quatro vasos comumente usado envolve principalmente a inserção de uma caneta de eletrocoagulação no forame pterigóideo bilateral da primeira vértebra cervical atrás do pescoço para eletrocoagular as artérias vertebrais. Esse processo acarreta o risco de eletrocoagulação incompleta, sangramento e danos ao tronco encefálico e à medula espinhal. Vinte e quatro horas após a cirurgia, os ratos reanestesiados são submetidos à ligadura da artéria carótida na frente do pescoço. Duas cirurgias expõem os ratos a um risco maior de infecção e aumentam o período experimental. Neste estudo, durante um único procedimento cirúrgico, uma incisão cervical anterior foi usada para localizar o local-chave onde a artéria vertebral penetra na primeira vértebra cervical. As artérias vertebrais bilaterais foram eletrocauterizadas em condições visuais, enquanto as artérias carótidas comuns bilaterais foram separadas para colocar nós soltos. Quando os membros dos ratos começaram a se contorcer, as artérias carótidas comuns bilaterais foram rapidamente ligadas para induzir o coma isquêmico. Este método pode evitar o risco de infecção causada por duas operações cirúrgicas e é fácil de realizar com uma alta taxa de sucesso, fornecendo uma referência útil para profissionais relevantes.
Introdução
O traumatismo cranioencefálico isquêmico é a lesão cerebral mais comum na prática clínica, sendo responsável por aproximadamente 75% dos casos de doenças cerebrovasculares. A isquemia pode levar a lesões cerebrais secundárias graves e doenças 1,2, e o coma é o sintoma mais grave causado por lesão cerebral hipóxica isquêmica. É também o caminho final para muitas condições críticas3. O coma é uma doença crítica e grave na prática clínica de difícil manejo4. Quanto mais tempo durar o coma, maior será o perigo potencial. O despertar ....
Protocolo
O protocolo experimental foi conduzido de acordo com os requisitos do Comitê de Uso de Animais de Laboratório e Cuidados e Uso de Animais Institucionais da Universidade de Foshan (número de registro: 2023-643656). Ratos machos da raça Sprague Dawley (SD) (200 g ± 20 g, 6-8 semanas de idade) foram utilizados para este estudo. Todos os dados de pesquisa com animais foram escritos de acordo com as diretrizes ARRIVE (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). Os detalhes dos reagentes e equipamentos usados no estudo estão listados na Tabela de Materiais.
1. Implantação de eletrodos ....
Resultados Representativos
Devido à inflamação e outros estímulos causados pela implantação de eletrodos, o EEG pode ser instável, então os ratos precisam se recuperar por 3 dias. Ratos com EEG e EMG normais após 3 dias podem ser incluídos para a preparação do modelo de coma. Quando os ratos foram anestesiados, a atividade do EEG e EMG foi ligeiramente suprimida, mas prosseguiu suavemente. Não houve alteração significativa na atividade do EEG e EMG após a eletrocoagulação bloqueando os AVs bilate.......
Discussão
A oclusão de quatro vasos induz lesão cerebral isquêmica e hipóxica global, que pode simular coma agudo, parada cardíaca, asfixia, choque, arritmia grave e outras condições clínicas críticas causadas por isquemia cerebral na prática clínica. Enquanto isso, a oclusão de quatro vasos pode causar danos principalmente no hipocampo17,18, que é a principal área funcional do cérebro responsável pela memória cognitiva
Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (82173781 e 82373835), projeto de pesquisa de pós-doutorado (BKS212055), Projeto de Inovação em Ciência e Tecnologia do Departamento de Ciência e Tecnologia de Foshan (2320001007331), Fundação de Pesquisa Básica e Aplicada de Guangdong (2019A1515010806), Principais Projetos de Campo (Manufatura Inteligente) das Universidades Gerais da Província de Guangdong (2020ZDZX2057) e os Projetos de Pesquisa Científica (Inovação Característica) da General Universidades na província de Guangdong (2019KTSCX195).
....Materiais
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 16 channel microfiber photoelectrode array | Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd | 2605 | |
| 4-0 Surgical suture | Nantong Holycon Medical Devices Co.,Ltd. | B-104 | |
| 6-0 Surgical suture | Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd. | JM1216-742417 | |
| EEG electrode | Kedou Brain machine Technology Co., LTD | KD-EEGEMG | |
| Electrocoagulation pen | CONPUVON Company | 465 | |
| Lunion Stage Automatic Sleep Staging System | Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd. | 1336 | |
| Miniature hand-held skull drill | Rayward Life Technology Co., Ltd | 87001 | |
| Penicillin sodium | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 17121709-2 | |
| SD rats | SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd. | 180-220g | |
| Skull nail | GLOBALEBIO,LTD | / | |
| Stereotaxic instrument | Rayward Life Technology Co., Ltd | 68801 | |
| Zoletil 50 | Vic Trading (Shanghai) Co., LTD | BN 88SHA |
Referências
- Hou, Y., et al. Rhodiola crenulata alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury by maintaining BBB integrity and balancing energy metabolism dysfunction. Phytomedicine. 128, 155529 (2024).
- Rong, M., et al.
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