A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
פרוטוקול זה מתאר את התהליך לגרימת מודל תרדמת איסכמית מוחית באמצעות שיטת חסימה שונה של ארבעה כלי דם.
תרדמת הנגרמת על ידי איסכמיה מוחית היא הסיבוך החמור ביותר של איסכמיה מוחית. חסימת ארבעה כלי דם יכולה לבסס מודל תרדמת איסכמית מוחית לחקר מחלות ופיתוח תרופות. עם זאת, שיטת חסימת ארבעת כלי הדם הנפוצה כוללת בעיקר החדרת עט אלקטרוקואגולציה לתוך הפתח הפטריגואיד הדו-צדדי של החוליה הצווארית הראשונה מאחורי הצוואר כדי לחשמל את עורקי החוליות. תהליך זה טומן בחובו סיכון של אלקטרוקואגולציה לא מלאה, דימום ונזק לגזע המוח ולחוט השדרה. עשרים וארבע שעות לאחר הניתוח, חולדות מורדמות מחדש עוברות קשירת עורק התרדמה לפני הצוואר. שני ניתוחים חושפים את החולדות לסיכון גבוה יותר להדבקה ומאריכים את תקופת הניסוי. במחקר זה, במהלך הליך כירורגי יחיד, נעשה שימוש בחתך צווארי קדמי כדי לאתר את אתר המפתח שבו עורק החוליות חודר לחוליה הצווארית הראשונה. עורקי החוליות הדו-צדדיים עברו אלקטרו-צרוב בתנאי ראייה, ואילו עורקי התרדמה המשותפים הדו-צדדיים הופרדו כדי ליצור קשרים רופפים. כאשר הגפיים של החולדות החלו להתעוות, עורקי התרדמה המשותפים הדו-צדדיים נקשרו במהירות כדי לגרום לתרדמת איסכמית. שיטה זו יכולה למנוע את הסיכון לזיהום הנגרם על ידי שתי פעולות כירורגיות והיא קלה לביצוע עם שיעור הצלחה גבוה, מתן התייחסות שימושית למטפלים הרלוונטיים.
פגיעה מוחית איסכמית היא הפגיעה המוחית הנפוצה ביותר בקליניקה, ומהווה כ-75% מהמקרים של מחלות כלי דם במוח. איסכמיה יכולה להוביל לפגיעות מוח משניות חמורותולמחלות 1,2, ותרדמת היא התסמין החמור ביותר הנגרם על ידי פגיעה מוחית איסכמית היפוקסית. זהו גם המסלול הסופי למצבים קריטיים רבים3. תרדמת היא מחלה קריטית וקשה בקליניקה שקשה לנהל4. ככל שהתרדמת נמשכת זמן רב יותר, כך גדלה הסכנה הפוטנציאלית. התעוררות מהירה היא המטרה העיקרית במניעת הידרדרות והתקדמות המצב. למרות הזרקת naloxone יש מגוון רחב של יישומים קליניים בקידום ערות, זה עדיין יש כמה תופעו....
פרוטוקול הניסוי נערך בהתאם לדרישות הוועדה לטיפול ושימוש מוסדי בחיות מעבדה באוניברסיטת פושאן (מספר רשומה: 2023-643656). במחקר זה נעשה שימוש בחולדות זכרים מסוג Sprague Dawley (SD) (200 גרם ±-20 גרם, בני 6-8 שבועות). כל נתוני המחקר בבעלי חיים נכתבו בהתאם להנחיות ARRIVE (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). פרטי הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר מפורטים בטבלת החומרים.
1. השתלת אלקטרודות EEG
בשל דלקת וגירוי אחר הנגרם על ידי השתלת אלקטרודות, EEG עשוי להיות לא יציב, ולכן החולדות צריך להתאושש במשך 3 ימים. חולדות עם EEG ו- EMG תקינים לאחר 3 ימים יכולות להיכלל להכנת דגם תרדמת. כאשר החולדות הורדמו, פעילות ה-EEG וה-EMG דוכאה מעט, אך התנהלה בצורה חלקה. לא היה שינוי משמעותי בפעילו.......
חסימת ארבעה כלי דם גורמת לפגיעה מוחית איסכמית והיפוקסית גלובלית, שיכולה לדמות תרדמת חריפה, דום לב, חנק, הלם, הפרעות קצב חמורות ומצבים קליניים קריטיים אחרים הנגרמים על ידי איסכמיה מוחית בפרקטיקה הקלינית. בינתיים, חסימה של ארבעה כלי דם יכולה להוביל לנזק בעיקר בהיפוקמפוס
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82173781 ו -82373835), פרויקט מחקר פוסט-דוקטורט (BKS212055), פרויקט חדשנות מדע וטכנולוגיה של פושאן הלשכה למדע וטכנולוגיה (2320001007331), קרן המחקר הבסיסית והיישומית של גואנגדונג (2019A1515010806), פרויקטי שדה מרכזיים (ייצור חכם) של אוניברסיטאות כלליות במחוז גואנגדונג (2020ZDZX2057), ופרויקטי המחקר המדעי (חדשנות אופיינית) של כללי אוניברסיטאות במחוז גואנגדונג (2019KTSCX195).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
16 channel microfiber photoelectrode array | Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd | 2605 | |
4-0 Surgical suture | Nantong Holycon Medical Devices Co.,Ltd. | B-104 | |
6-0 Surgical suture | Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd. | JM1216-742417 | |
EEG electrode | Kedou Brain machine Technology Co., LTD | KD-EEGEMG | |
Electrocoagulation pen | CONPUVON Company | 465 | |
Lunion Stage Automatic Sleep Staging System | Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd. | 1336 | |
Miniature hand-held skull drill | Rayward Life Technology Co., Ltd | 87001 | |
Penicillin sodium | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 17121709-2 | |
SD rats | SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd. | 180-220g | |
Skull nail | GLOBALEBIO,LTD | / | |
Stereotaxic instrument | Rayward Life Technology Co., Ltd | 68801 | |
Zoletil 50 | Vic Trading (Shanghai) Co., LTD | BN 88SHA |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved