수정된 4혈관 폐색에 의해 유도된 대뇌 허혈성 혼수 모델

요약

이 프로토콜은 수정된 4개 혈관 폐색 방법을 사용하여 뇌 허혈성 혼수 모델을 유도하는 과정을 설명합니다.

초록

뇌허혈로 인한 혼수상태는 뇌허혈의 가장 심각한 합병증입니다. 4혈관 폐색은 질병 연구 및 약물 개발을 위한 대뇌 허혈성 혼수 모델을 확립할 수 있습니다. 그러나 일반적으로 사용되는 4개 혈관 폐색법은 주로 목 뒤의 첫 번째 경추의 양측 익상편에 전기응고 펜을 삽입하여 척추 동맥을 전기응고하는 것입니다. 이 과정은 불완전한 전기 응고, 출혈, 뇌간과 척수 손상의 위험을 수반합니다. 수술 24시간 후, 다시 마취된 쥐는 목 앞에서 경동맥 결찰술을 받습니다. 두 번의 수술은 쥐를 더 높은 감염 위험에 노출시키고 실험 기간을 늘립니다. 이 연구에서는 단일 수술 과정에서 척추 동맥이 첫 번째 경추를 관통하는 핵심 부위를 찾기 위해 전방 경추 절개를 사용했습니다. 양측 척추 동맥은 육안 조건에서 전기 소작되었고, 양측 총경동맥은 느슨한 매듭을 배치하기 위해 분리되었습니다. 쥐의 팔다리가 경련을 일으키기 시작하자 양측 총경동맥을 재빨리 결찰하여 허혈성 혼수를 유발했습니다. 이 방법은 두 번의 외과 수술로 인한 감염 위험을 피할 수 있으며 높은 성공률로 수행하기 쉽기 때문에 관련 의사에게 유용한 참고 자료를 제공합니다.

서문

허혈성 뇌 손상은 임상에서 가장 흔한 뇌 손상으로, 뇌혈관 질환 사례의 약 75%를 차지합니다. 허혈은 심각한 이차성 뇌 손상 및^{질병으로 이어질} 수 있으며(^1,2), 혼수는 허혈성 저산소성 뇌 손상으로 인한 가장 심각한 증상입니다. 또한 많은 심각한 상태에 대한 최종 경로이기도 합니다³. 혼수상태는 임상실습에서 관리가 어려운 중대하고 심각한 질병이다⁴. 혼수상태가 오래 지속될수록 잠재적인 위험은 더 커집니다. 신속한 각성은 상태의 악화와 진행을 예방하는 주요 목표입니다. 날록손 주사는 각성을 촉진하는 데 광범위한 임상적 응용이 가능하지만, 여전히 몇 가지 부작용이 있다⁵. 따라서 안전하고 효과적인 각성 촉진 약물의 개발은 시급히 해결해야 할 문제입니다. 간단하고 조작하기 쉬운 뇌 허혈성 혼수 모델을 확립하는 것은 허혈성 혼수의 발병 기전을 밝히고 약물 개발에 필수적이다 ^6,7,8....

프로토콜

실험프로토콜은 포산대학교 실험동물이용위원회와 기관동물보호이용위원회(기록번호: 2023-643656)의 요구사항에 따라 진행되었다. 이 연구에는 수컷 Sprague Dawley(SD) 쥐(200g ± 20g, 6-8주령)가 사용되었습니다. 모든 동물 연구 데이터는 ARRIVE(Animal Research: Reporting In Vivo Experiments) 지침에 따라 작성되었습니다. 연구에 사용된 시약 및 장비의 세부 사항은 재료 표에 나열되어 있습니다.

1. EEG 전극 이식

1. 마취 15분 전에 0.05mg/kg의 아트로핀을 피하 주사하여 분비물로 인한 호흡 폐색 및 질식을 예방합니다. 쥐를 마취시키기 위해 20mg/kg 졸레틸과 5mg/kg 자일라진을 근육 주사한다¹⁴. 핀셋을 사용하여 쥐의 발가락을 고정하여 깊은 마취를 확인합니다.
2. 머리 면도기로 쥐의 머리에서 머리카락을 제거합니다. 비관통 이어 바를 사용하여 뇌 입체 장치에 쥐의 머리를 고정합니다. 멸균 면봉을 사용하여 에탄올과 포비돈 요오드를 수술 부위에 3회 도포하여 피부를 소독합니다....

토론

4척 폐색은 전신 허혈성 및 저산소성 뇌 손상을 유발하며, 이는 임상 실습에서 뇌 허혈로 인한 급성 혼수, 심정지, 질식, 쇼크, 중증 부정맥 및 기타 중요한 임상 상태를 시뮬레이션할 수 있습니다. 한편, 4개 혈관 폐색은 주로 해마(^{hippocampus)17,18})에 손상을 일으킬 수 있는데, 해마는 인지 기억(cognitive memory)을 담당하는 주요 기능적 뇌 영?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 channel microfiber photoelectrode array	Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd	2605
4-0 Surgical suture	Nantong Holycon Medical Devices Co.,Ltd.	B-104
6-0 Surgical suture	Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd.	JM1216-742417
EEG electrode	Kedou Brain machine Technology Co., LTD	KD-EEGEMG
Electrocoagulation pen	CONPUVON Company	465
Lunion Stage Automatic Sleep Staging System	Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd.	1336
Miniature hand-held skull drill	Rayward Life Technology Co., Ltd	87001
Penicillin sodium	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	17121709-2
SD rats	SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd.	180-220g
Skull nail	GLOBALEBIO,LTD	/
Stereotaxic instrument	Rayward Life Technology Co., Ltd	68801
Zoletil 50	Vic Trading (Shanghai) Co., LTD	BN 88SHA