التمويل المقدم من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) منحة R01-HL088424؛ المحاربين القدامى جائزة الجدارة لشؤون PPY.

1. الاسفنجة تحضير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هيدرات الإسفنج خلال إثارة بين عشية وضحاها في 0.9٪ (W / V) مائي محلول كلوريد الصوديوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطهير اسفنجات المائية عن طريق جهاز الأوتوكليف لهم. لمدة 75 الأوتوكلاف، مل لمدة 25 دقيقة في 121 درجة مئوية. </li></ol> ملاحظة: الإسفنج تحميل مع العلاج كما هو موضح أدناه هو اختياري. <ol start="3" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في غطاء محرك السيارة العقيمة مع الأدوات المعقمة، واختيار واحدة من الاسفنج الحل باستخدام ملاقط. ضغط الاسفنجة مع ملاقط واستخدام معلومات سرية فراغ لإزالة حل أكبر قدر ممكن من الاسفنجة. وضع انتزعها الاسفنج في نسيج طبق ثقافة، والحرص على ترك مسافة بين الإسفنج. ويمكن استخدام لوحات متعددة جيدا لفصل العلاجات المختلفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة الحل علاج مباشرة على مركز من الإسفنج. اضغط برفق على الإسفنج مع طرف ماصة بعد أن تم وضع حل على الاسفنج، وهذا يساعد على امتصاص الاسفنج الحل. ملاحظة: 6MMقطر بواسطة الإسفنج 2،75 ملم سميكة أن نتبعها هي قادرة على الاستمرار بحد أقصى 25 ميكرولتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم تحميل جميع الإسفنج، يمكن تخزين لوحة هم على الجليد في حين أنها تزرع في الماوس. </li></ol> 2. إجراء العمليات الجراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الحيوان بشكل مناسب وإدارة وقائي مسكن. والإجراء بأكمله تستمر حوالي 20 دقيقة لكل حيوان. للحصول على 30 لترا ز 1،5 الفأر في الدقيقة الواحدة من الأوكسجين مع يستخدم 1.5٪ Isoflurane للحث على المحافظة على والتخدير. عندما الحيوان لم تعد تستجيب لقرصة اختبار رد الفعل، في مكان مخروط الأنف في موقف ضعيف. استخدام ماكينة حلاقة كهربائية لحلاقة (أ) 1 بوصة بواسطة 1 بوصة منطقة في الجانب السفلي بطني أسفل القفص الصدري. مسح نظيفة من قص الشعر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم منطقة حلق عن طريق تنظيف مع betadine تليها الكحول 70٪. كرر هذا التطهير betadine الكحول ثلاث مرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في حين الضغط على الجلد تدريسها، واستخدام مشرط لجعل شق عمودي 1،5-2 مرات دياتدرج متر من الإسفنج، والحذر لئلا يقطع تجويف الجسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملاقط لعقد حافة الجلد وتبدأ ببطء فصل الجلد من العضلات على جانبي الفتحة باستخدام مقص Metzembaum. ينبغي للجيب تذهب عبر عرض من الفأرة ومن القفص الصدري لرجليه الخلفيتين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملاقط لالتقاط الإسفنج الأولى التي يتم وضعها في الحيوانات عن طريق اختلاس من الجانبين. نقل الاسفنجة إلى ملاقط مستقيم بحيث يتم عقد من أعلى وأسفل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملاقط لعقد حافة الجلد ورفع بحيث يمكن إدراجها الاسفنجة. إدراج ببطء الاسفنجة في محاولة لتجنب ملامسة الجلد أو العضلات وتحت مثل الاسفنجة سيكون من الصعب التحرك بمجرد أن لمست الأنسجة. كرر لجميع الإسفنج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمجرد أن يتم إدخال جميع الإسفنج، ومكان اثنين أو ثلاثة من الغرز لإغلاق الجرح. استخدام زوج من ملاقط لعقد كلا الجانبين من شق معا، والخيط sutu<html> إعادة على حد سواء من خلال طبقات الجلد. تشديد رمي 1 يكفي لإغلاق حواف الجلد. الانتهاء من عقدة مربع مع واحدة من أكثر رمي الاتجاه الآخر، وهذه المرة سحب عقدة ضيق. التعادل ثم اثنين عقدة أكثر مربع لإنهاء خياطة (الشكل 2). وضع الغرز إضافية لإغلاق شق كامل. ويمكن استخدام طرق أخرى تربط الجرح مثل dermabond، مقاطع الجرح، أو المواد الغذائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الحيوان من نظام التخدير ورصد في الوقت الذي استأنفت وعيه. وينبغي أن تبدأ بسرعة حيوان التجول والعودة إلى ما قبل المرجع التنقل. أؤكد أنها قادرة بما فيه الكفاية للوصول إلى الغذاء والماء. ويمكن وضع بعض المواد الغذائية مبلل في الجزء السفلي من القفص للمساعدة في التعافي. تواصل رصد حيوان يوميا بحثا عن علامات الضيق أو عدم الراحة، والتحقق من موقع شق ل، عدوى التهاب تفزر و،. اتخاذ الإجراءات المناسبة إذا تم العثور على أية مضاعفات على الانتعاش. </li></ol> 3. اختياري حقن معشوقة = &quot;jove_content&quot;&gt; ملاحظة: مرة واحدة وقد تم زرع الإسفنج إلى الحيوان ويمكن حقنها بمحلول مكون من خلايا، والأدوية، عوامل النمو وما إلى ذلك وهذا ما يسمح لتحليل الآثار المترتبة على مادة المحقونة في أوقات مختلفة لتوفير وإدارة الأنظمة. فإذا ما فعلت الحقن دائما عنصر تحكم استخدامها. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لحقن الاسفنج مع الحل المنشود، أولا تحديد كمية من المواد الخاضعة للإدارة على الماوس. المادة يجب أن تتركز بحيث حجم حقن أقل من نصف إجمالي حجم الاسفنجة يمكن أن تعقد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير حقنة لحقن (بالنسبة للفئران التي نستخدمها إبرة G 28). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوانات في الحصول على الحقن تحت التخدير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن عند الحيوان لم يعد يستجيب لاختبار قرصة أن تعطى الحقن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإعطاء حقن دفع الإبرة في الجلد 45 درجة زاوية شامل في مركز الاسفنجة. ثم دفع إبرة في الاسفنج لن يؤدي الا في منتصف الطريقمن خلال سمكها. والهدف من ذلك هو حقن في وسط الدقيق الاسفنجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لفحص للتأكد من أن الإبرة في الاسفنج، ورفع ببطء الإبرة عموديا. إذا كانت الإبرة في الاسفنجة، الاسفنجة يجب نقل ما يصل مع الإبرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن ببطء في الاسفنج وإزالة إبرة. إذا كان هناك الإسفنج متعددة تتطلب الحقن فمن الممكن أن يتم دفع بعض من السائل تحقن من المواقع السابقة للحقن. </li></ol> 4. إزالة الاسفنجة ملاحظة: أثناء إزالة الاسفنجة، والتعامل مع الاسفنجة بمزيد من الحذر. تجنب اختراق الاسفنج مع الأدوات الجراحية ومنع النزيف في الاسفنج عن طريق تجنب الشرايين الرئيسية في جميع أنحاء الأنسجة المحيطة بها. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد هذا الحيوان هو الموت الرحيم، وإزالة الاسفنجة من خلال عقد الجلد باستخدام الملقط، وجعل شق إغلاق الاسفنج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعناية فصل الإسفنج من الكبسولة المحيطة<html> الثانية وتجنب حصاد الأنسجة المحيطة اضافية الاسفنجة. لفحوصات مثل تسليم المخدرات أو قياس الأشكال، المطلوب أقل دقة عن الختان. </li></ol> 5. ممثل النتائج ويمكن تخزين الإسفنج إزالة تحت ظروف مختلفة تبعا لنوع من التحليل الذي سيتم تنفيذه. لباجتزاء، يمكن أن تكون جزءا لا يتجزأ من الإسفنج في استرجاع وسيلة لتجميد مثل درجة الحرارة المثلى للقطع (أكتوبر) مركب أو وضعها في 10٪ من الفورمالين لتضمين وباجتزاء في كتل البارافين (الشكل 3A وباء). ويتم الحصول على أفضل النتائج لباجتزاء عندما يتم قطع الاسفنج في نصف عبر القطر، وجزءا لا يتجزأ من قطع السطح إلى الأسفل (الشكل رقم 4A وباء). وكان ينبغي أن تؤخذ أجزاء من الاسفنج بحيث كامل عرض الاسفنجة موجودا. 3A ويبين الشكل 2 الإسفنج، وجزءا لا يتجزأ من الاسفنجة اليسار / مقطوع بشكل غير صحيح، وتمت معالجة الاسفنجة اليمين بشكل صحيح. والأنف والحنجرة &quot;&gt; للتحليل، ويمكن وضع اسفنج في أنبوب إيبندورف وتخزينها في -20 درجة مئوية حتى على استعداد لتجهيز يجب وضع الحمض النووي الريبي والكمية الحقيقية الإسفنج تحليل PCR مرة في أنبوب إيبندورف، فلاش المجمدة، وتخزينها في. - 80 درجة مئوية وبالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام المواد الحافظة 1 الحمض النووي الريبي، مثل RNAlater من QIAGEN، لتحقيق الاستقرار في الحمض النووي الريبي لتخزين آمن عند ارتفاع درجات الحرارة. السائل بالجروح التي يمكن جمعها عن طريق الضغط على الإسفنج عبر أنبوب، وتجميع معا من السائل ويمكن أيضا أن الإسفنج متعددة للحصول على عينة تمثيلية. الخلايا الحية، مثل الضامة، الخلايا الليفية والخلايا اللمفية، يمكن استخراجها من الإسفنج. بعد إزالة من الحيوان، والإسفنج يمكن أن يكون في مكان وسائل الإعلام المناسبة لنوع المطلوب من الخلايا، ويمكن قطع إسفنج تتم معالجتها للافراج عن الخلايا الجسدية من قبل وسائل (أي كولاجيناز) (أي تنميق) أو الأنزيمية. <img alt="الشكل 1." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig1.jpg" /> الشكل 1. Dehydraتيد PVA الأقراص الاسفنج في ثلاثة أحجام مختلفة. <img alt="الشكل 2." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig2.jpg" /> الشكل 2. صورة من نموذج التئام الجروح الماوس يظهر موقف من الجرح الجانبية وأربعة الإسفنج بولي. <img alt="الشكل 3." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig3.jpg" /> الشكل 3. (أ) H &amp; E تلطيخ في 4x و(B) تلوين ثلاثي الألوان في 10X من الإسفنج البارافين مقطوع المضمنة. <img alt="الشكل 4." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig4.jpg" /> الشكل 4. (أ) صورة من قطع الاسفنج في نصف طول القطر. (B) PVA الاسفنج نصف العام، جزءا لا يتجزأ من خفض الجانب السلبي في أكتوبر

<ol>
	<li>Efron, D. T., Barbul, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+sponge+models.">Subcutaneous sponge models.</a> Methods Mol. Med. 78, 83-93 (2003).</li><li>Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+a+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue.">Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue.</a> Wound Repair. 8, 83-96 (2000).</li><li>Sprugel, K. H., McPherson, J. M., Clowes, A. W., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+growth+factors+in+vivo.+I.+Cell+ingrowth+into+porous+subcutaneous+chambers.">Effects of growth factors in vivo. I. Cell ingrowth into porous subcutaneous chambers.</a> Am. J. Pathol. 129, 601-613 (1987).</li><li>Alaish, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+polyvinyl+alcohol+sponge+and+expanded+polytetrafluoroethylene+subcutaneous+implants+as+models+to+evaluate+wound+healing+potential+in+human+beings.">Comparison of the polyvinyl alcohol sponge and expanded polytetrafluoroethylene subcutaneous implants as models to evaluate wound healing potential in human beings.</a> Wound Repair. 3, 292-298 (1995).</li><li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+wound+repair.">Animal models for wound repair.</a> Arch. Dermatol. Res. 290, 1-11 (1998).</li><li>Alfaro, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=sFRP2+suppression+of+bone+morphogenic+protein+(BMP)+and+Wnt+signaling+mediates+mesenchymal+stem+cell+(MSC)+self-renewal+promoting+engraftment+and+myocardial+repair.">sFRP2 suppression of bone morphogenic protein (BMP) and Wnt signaling mediates mesenchymal stem cell (MSC) self-renewal promoting engraftment and myocardial repair.</a> J. Biol. Chem. 285, 35645-35653 (2010).</li><li>Andrade, S. P., Ferreira, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sponge+implant+model+of+angiogenesis.">The sponge implant model of angiogenesis.</a> Methods Mol. Biol. 467, 295-304 (2009).</li><li>Diegelmann, R. F., Lindblad, W. J., Cohen, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subcutaneous+implant+for+wound+healing+studies+in+humans.">A subcutaneous implant for wound healing studies in humans.</a> J. Surg. Res. 40, 229-237 (1986).</li><li>Efron, D. T., Most, D., Shi, H. P., Tantry, U. S., Barbul, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+studying+wound+healing.">A novel method of studying wound healing.</a> J. Surg. Res. 98, 16-20 (2001).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+for+selecting+the+correct+animal+model+for+dermal+wound-healing+studies.">Considerations for selecting the correct animal model for dermal wound-healing studies.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 1087-1096 (2008).</li></ol>

ليس لدينا ما يكشف.

<p class="jove_content"&gt; هذا النموذج من الاسفنج التئام الجروح لديه اختلافات متعددة، ويمكن لا يمكن أن يؤديها في الكثير من مختلف الأنواع بما في ذلك البشر والاسفنج وكذلك يتم زرع ظهريا<sup&gt; 1،2،8</sup&gt;. للدراسات في البشر، وبعض الأنواع الأخرى، قد الإسفنج يجب أن توضع في أنبوب السيليكون المسامي لمنع الاسفنج من يتم تغليف والسماح لسهولة إزالة<sup&gt; 4،8</sup&gt;. ويمكن تغيير مكان زرع الاسفنجة بناء على النتائج المرجوة ومهارة فني. ويمكن غرس الظهرية تسمح للإسفنج على التحرك تحت الجلد، في حين يزرع بطني أكثر صعوبة نظرا لاحتمال قطع طريق إلى تجويف البطن. يمكن تعيين الإسفنج مع القسطرة بحيث تسليم المخدرات هو ثابت، وتسيطر عليها، مما يلغي الحاجة لحقن متعددة<sup&gt; 9</sup&gt;. ويمكن حتى أصغر، والإسفنج أنبوبي يتم حقنه من خلال إبرة<sup&gt; 8</sup&gt;. ولا يقتصر تكوين الإسفنج &#39;إلى كحول البولي فينيل فقط. ويمكن تحضيرها من العديد من المواد على وجه الحصر أو في تركيبة<sup&gt; 7</sup&gt;.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; ومن المهم للغاية لإعداد الاسفنج والتنسيب في الحيوان لتكون متسقة وفهمها بشكل صحيح. إذا تم قطع الإسفنج من أوراق يجب أن تكون من الوزن مماثلة للمقارنة. إذا كان الاسفنج هو أن محملة الخلايا أو العلاج، ويجب أن يوضع المبلغ في كل اسفنجة على وجه الدقة. لا يمكن للعملية الشفاء تختلف استنادا إلى موقع للتوظيف من الاسفنجة في الحيوان وتضميد الجراح وسوف تنخفض المسافة من زيادات رأس<sup&gt; 1،10</sup&gt;.</p

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المادة </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> PVA الإسفنج </td><td> ميدترونيك </td><td> CF120 </td><td> حجم والمسامية من الاسفنجة يعتمد على التجربة </td></tr><tr><td> مشرط حجم شفرة 15 </td><td> الإنسي دينار بحريني </td><td> 371115 </td><td></td></tr><tr><td> Metzembaum مقص </td><td> الحرارية العلمية </td><td> 79-211 </td><td></td></tr><tr><td> المرقأة الملقط </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 13004-14 </td><td></td></tr><tr><td> إبرة حامل </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 12004-16 </td><td></td></tr><tr><td> 5-0 النايلون خاط </td><td> Ethilon </td><td> 698 </td><td></td></tr><tr><td> أكتوبر compouالثانية </td><td> الأنسجة تيك </td><td> 4583 </td><td></td></tr></tbody></table>

the polyvinyl alcohol sponge model implantation

التئام الجروح هو معقد، عملية متعددة الخطوات التي تنطوي على العديد من أنواع الخلايا، وعوامل النمو والمركبات 1-3. وبسبب هذا التعقيد، ودراسات التئام الجروح هي الأكثر شمولا عندما نفذت في الجسم الحي. وهناك العديد من النماذج في الجسم الحي المتاحة لدراسة حاد التئام الجروح، بما في ذلك الجراحي، والفضاء، استئصالية الميت، وحروق. نماذج الفضاء القتلى هم الاصطناعي، ويزرع التي يسهل اختراقها والتي تستخدم لدراسة تشكيل الأنسجة وآثار المواد على الجرح. بعض النماذج الفضاء الميت تستخدم عادة تشمل البولي فينيل الكحول (PVA) الإسفنج، واسطوانات شبكة أسلاك الفولاذ، وسعت بولي تترافلوروإيثيلين مادة (ePTFE)، و1،2 Cellstick. كل نموذج الفضاء الميت والقيود الخاصة بها على أساس تركيب المواد الأولية وغرس الأساليب. وشبكة أسلاك الفولاذ نموذج اسطوانة لديه مرحلة متخلفة من تسلل بعد غرس ويتطلب قدرا طويلة من الزمن قبل تشكيل النسيج الحبيبي begiنانوثانية 1. ويتم تحليل أفضل مراحل لاحقة من التئام الجروح باستخدام نموذج 1،4 ePTFE. وCellstick ليفة السليلوز داخل نموذج أنبوب السيليكون الذي يستخدم عادة لدراسة الجروح جراحة الإنسان وجرح السائل 2. ويقتصر الاسفنجة بولي لدراسات حاد لأنه مع الوقت أن تبدأ في إثارة رد فعل الجسم الغريب الذي يؤدي إلى رد فعل الخلية العملاقة في الحيوان 5. خلافا لغيرها من المواد، والإسفنج PVA سهلة لإدخال وإخراج، مصنوعة من مواد خاملة وغير القابلة للتحلل، وحتى الآن هي لينة بما يكفي لتكون مقطوع للتحليل النسيجي 2،5. في التئام الجروح الاسفنجة بولي أمر مفيد للغاية لتحليل تحبيب تكوين الأنسجة، وترسب الكولاجين، وجرح تكوين السائل، وآثار المواد على عملية الشفاء 1،2،5. بالإضافة إلى استخدامه في دراسة مجموعة واسعة من سمات من التئام الجروح، كما تم الاسفنجة بولي المستخدمة في العديد من أنواع أخرى من الدراسات. انها ساعةكما استخدمت للتحقيق في الأوعية الدموية السرطانية، تسليم المخدرات وبقاء الخلية الجذعية وengraftment 1،2،6،7. مع تحريف الكبير، الاستخدام المكثف قبل، والنتائج التي يمكن استنساخه، الاسفنجة بولي هو نموذج مثالي ل1،2 العديد من الدراسات. هنا، فإننا سوف تصف إعداد وغرس واسترجاعها من الأقراص الاسفنجة بولي (الشكل 1) في الفأر نموذج من التئام الجروح.

Watch this Scientific Journal Video about The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation at JoVE.com

The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

يوصف أداة مفيدة لتحليل آثار المخدرات، وعوامل النمو، و / أو خلايا التلاعب في نموذج حيواني لإصلاح الجرح. وتستخدم هذه التقنية الخصائص من الاسفنج البولي فينيل (PVA) لتقديم المشروبات الكحولية، وتحتوي على علاج المطلوب، وأيضا توفير منبر يمكن استئصاله وتحليلها.

الاسفنجة كحول البولي فينيل نموذج زرع

Wound healing is a complicated, multistep process involving many cell types, growth factors and compounds1-3. Because of this complexity, wound healing ...

the-polyvinyl-alcohol-sponge-model-implantation

Research

JoVE Journal

Medicine

19.7K Views.  Vanderbilt University School of Medicine. يوصف أداة مفيدة لتحليل آثار المخدرات، وعوامل النمو، و / أو خلايا التلاعب في نموذج حيواني لإصلاح الجرح. وتستخدم هذه التقنية الخصائص من الاسفنج البولي فينيل (PVA) لتقديم المشروبات الكحولية، وتحتوي على علاج المطلوب، وأيضا توفير منبر يمكن استئصاله وتحليلها.

Video: The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, including mental retardation due to disordered and damaged brain development. Fetal alcohol spectrum disorder (FASD) is a term used to cover a continuum of birth defects that occur due to maternal alcohol consumption, and occurs in approximately 4% of children born in the United States. With 50% of child-bearing age women reporting consumption of alcohol, and half of all pregnancies being unplanned, unintentional exposure is a continuing issue2. In order to best understand the damage produced by ethanol, plus produce a model with which to test potential interventions, we developed a model of developmental ethanol exposure using the zebrafish embryo. Zebrafish are ideal for this kind of teratogen study3-8. Each pair lays hundreds of eggs, which can then be collected without harming the adult fish. The zebrafish embryo is transparent and can be readily imaged with any number of stains. Analysis of these embryos after exposure to ethanol at different doses and times of duration and application shows that the gross developmental defects produced by ethanol are consistent with the human birth defect. Described here are the basic techniques used to study and manipulate the zebrafish FAS model.

In order to understand the molecular mechanisms of the ethanol-induced developmental damage, we have developed a zebrafish model of ethanol exposure and are exploring the physical, cellular, and genetic alterations that occur after ethanol exposure1. We then seek to find potential interventions and rapidly test them in this animal model.

تقييم التغييرات المشوهة في نموذج الزرد من التعرض الكحول الجنينية

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

نموذج الفئران من زرع دعامات في الشريان السباتي لدراسة عودة التضيق

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Implantation of the Syncardia Total Artificial Heart

With advances in technology, the use of mechanical circulatory support devices for end stage heart failure has rapidly increased. The vast majority of such patients are generally well served by left ventricular assist devices (LVADs). However, a subset of patients with late stage biventricular failure or other significant anatomic lesions are not adequately treated by isolated left ventricular mechanical support. Examples of concomitant cardiac pathology that may be better treated by resection and TAH replacement includes: post infarction ventricular septal defect,&#160;aortic root aneurysm / dissection, cardiac allograft failure, massive ventricular thrombus, refractory malignant arrhythmias (independent of filling pressures), hypertrophic / restrictive cardiomyopathy, and complex congenital heart disease. Patients often present with cardiogenic shock and multi system organ dysfunction. Excision of both ventricles and orthotopic replacement with a total artificial heart (TAH) is an effective, albeit extreme, therapy for rapid restoration of blood flow and resuscitation. Perioperative management is focused on end organ resuscitation and physical rehabilitation. In addition to the usual concerns of infection, bleeding, and thromboembolism common to all mechanically supported patients, TAH patients face unique risks with regard to renal failure and anemia. Supplementation of the abrupt decrease in brain natriuretic peptide following ventriculectomy appears to have protective renal effects. Anemia following TAH implantation can be profound and persistent. Nonetheless, the anemia is generally well tolerated and transfusion are limited to avoid HLA sensitization. Until recently, TAH patients were confined as inpatients tethered to a 500 lb pneumatic console driver. Recent introduction of a backpack sized portable driver (currently under clinical trial) has enabled patients to be discharged home and even return to work. Despite the profound presentation of these sick patients, there is a 79-87% success in bridge to transplantation.

The purpose of this manuscript is to briefly review indications, management, and outcomes for the total artificial heart. Video operative techniques for device implantation are presented.

زرع القلب الاصطناعي إجمالي Syncardia

With advances in technology, the use of mechanical circulatory support devices for end stage heart failure has rapidly increased. The vast majority of ...

Implantation of Total Artificial Heart in Congenital Heart Disease

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital heart disease (CHD), the malformed heart presents a challenge to TAH implantation. 
In the case presented here, a 17 year-old patient with congenital transposition of the great arteries (CCTGA) experienced progressively worsening HF due to his congenital condition. He was hospitalized multiple times and received an implantable cardioverter defibrillator (ICD). However, his condition soon deteriorated to end-stage HF with multisystem organ failure. 
Due to the patient's grave clinical condition and the presence of complex cardiac lesions, the decision was made to proceed with a TAH. The abnormal arrangement of the patient's ventricles and great arteries required modifications to the TAH during implantation.
With the TAH in place, the patient was able to return home and regain strength and physical well-being while awaiting a donor heart. He was successfully bridged to heart transplantation 5 months after receiving the device. This report highlights the TAH is feasible even in patients with structurally abnormal hearts, with technical modification.

This is a case report of a patient with congenitally corrected transposition of the great arteries (CCTGA) who received a total artificial heart (TAH) as a bridge to heart transplant. The TAH was successfully implanted with modifications to accommodate the patient's congenitally malformed heart.

زرع القلب الاصطناعي في إجمالي أمراض القلب الخلقية

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

زرع الوريد الأجوف السفلي مداخلة الكسب غير المشروع في نموذج الفأر

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). At the most severe end of the spectrum is Fetal Alcohol Syndrome (FAS), characterized by growth retardation, craniofacial dysmorphology, and neurobehavioral deficits. Studies with animal models, including rodents, have elucidated many molecular and cellular mechanisms involved in the pathophysiology of FASDs. Ethanol administration to pregnant rodents has been used to model human exposure during the first and second trimesters of pregnancy. Third trimester ethanol consumption in humans has been modeled using neonatal rodents. However, few rodent studies have characterized the effect of ethanol exposure during the equivalent to all three trimesters of human pregnancy, a pattern of exposure that is common in pregnant women. Here, we show how to build vapor chambers from readily obtainable materials that can each accommodate up to six standard mouse cages. We describe a vapor chamber paradigm that can be used to model exposure to ethanol, with minimal handling, during all three trimesters. Our studies demonstrate that pregnant dams developed significant metabolic tolerance to ethanol. However, neonatal mice did not develop metabolic tolerance and the number of fetuses, fetus weight, placenta weight, number of pups/litter, number of dead pups/litter, and pup weight were not significantly affected by ethanol exposure. An important advantage of this paradigm is its applicability to studies with genetically-modified mice. Additionally, this paradigm minimizes handling of animals, a major confound in fetal alcohol research.

We demonstrate the construction of alcohol vapor chambers using readily available materials that simultaneously house 6 mouse cages. We further describe their use in a mouse model of fetal alcohol exposure equivalent to all 3&#160;trimesters of human pregnancy. This paradigm exposes animals during gestation and postnatal days 1-12.

بناء غرف بخار يستخدم لفضح الفئران إلى الكحول خلال ما يعادلها من جميع الأثلاث الثلاثة للتنمية البشرية

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

نموذج الفئران من فخذي الشريان إصابة سلك مع غرس المحيطة بالأوعية تسليم المخدرات التصحيح

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of the role of the tumor microenvironment in treatment response, collectively point to the need for immune-competent orthotopic models for pre-clinical testing of these new therapies. This paper demonstrates how to establish an orthotopic immune-competent rat model of pleural malignant mesothelioma. Monitoring disease progression in orthotopic models is confounded by the internal location of the tumors. To longitudinally monitor disease progression and its effect on circulating immune cells in this and other rat models of cancer, a single tube flow cytometry assay requiring only 25 &#181;l whole blood is described. This provides accurate quantification of seven immune parameters: total lymphocytes, monocytes and neutrophils, as well as the T-cell subsets CD4 and CD8, B-cells and Natural Killer cells. Different subsets of these parameters are useful in different circumstances and models, with the neutrophil to lymphocyte ratio having the greatest utility for monitoring disease progression in the mesothelioma model. Analyzing circulating immune cell levels using this single tube method may also assist in monitoring the response to immune-based treatments and understanding the underlying mechanisms leading to success or failure of treatment.

The generation of an orthotopic rat model of pleural malignant mesothelioma by implantation of II-45 mesothelioma cells into the pleural cavity of immune competent rats is presented. A flow cytometric method to analyze seven immune cell subsets in these animals from a 25 &#181;l&#160;blood sample is also described.

مثلي زرع والأجهزة الطرفية المناعي رصد خلية في نموذج II-45 مسانج الجرذ ورم الظهارة المتوسطة

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Surgical Training for the Implantation of Neocortical Microelectrode Arrays Using a Formaldehyde-fixed Human Cadaver Model

This protocol describes a procedure to assist surgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain. Recent technological progress has enabled the fabrication of microelectrode arrays that allow recording the activity of multiple individual neurons in the neocortex of the human brain. These arrays have the potential to bring unique insight onto the neuronal correlates of cerebral function in health and disease. Furthermore, the identification and decoding of volitional neuronal activity opens the possibility to establish brain-computer interfaces, and thus might help restore lost neurological functions. The implantation of neocortical microelectrode arrays is an invasive procedure requiring a supra-centimetric craniotomy and the exposure of the cortical surface; thus, the procedure must be performed by an adequately trained neurosurgeon. In order to provide an opportunity for surgical training, we designed a procedure based on a human cadaver model. The use of a formaldehyde-fixed human cadaver bypasses the practical, ethical and financial difficulties of surgical practice on animals (especially non-human primates) while preserving the macroscopic structure of the head, skull, meninges and cerebral surface and allowing realistic, operating room-like positioning and instrumentation. Furthermore, the use of a human cadaver is closer to clinical daily practice than any non-human model. The major drawbacks of the cadaveric simulation are the absence of cerebral pulsation and of blood and cerebrospinal fluid circulation. We suggest that a formaldehyde-fixed human cadaver model is an adequate, practical and cost-effective approach to ensure proper surgical training before implanting microelectrode arrays in the living human neocortex.

We designed a procedure in which a formaldehyde-fixed human cadaver is used to assist neurosurgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain.

التدريب الجراحي لغرس صفائف ميكروليكترودي نيوكورتيكال باستخدام نموذج ثابت فورمالدهايد الجثث البشرية

This protocol describes a procedure to assist surgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain. ...

Cochlear Implantation in the Guinea Pig

Cochlear implants are highly efficient devices that can restore hearing in subjects with profound hearing loss. Due to improved speech perception outcomes, candidacy criteria have been expanded over the last few decades. This includes patients with substantial residual hearing that benefit from electrical and acoustical stimulation of the same ear, which makes hearing preservation during cochlear implantation an important issue. Electrode impedances and the related issue of energy consumption is another major research field, as progress in this area could pave the way for fully implantable auditory prostheses. To address these issues in a systematic way, adequate animal models are essential. Therefore, the goal of this protocol is to provide an animal model of cochlear implantation, which can be used to address various research questions. Due to its large tympanic bulla, which allows easy surgical access to the inner ear, as well as its hearing range which is relatively similar to the hearing range of humans, the guinea pig is a commonly used species in auditory research. Cochlear implantation in the guinea pig is performed via a retroauricular approach. Through the bullostomy a cochleostomy is drilled and the cochlear implant electrode is inserted into the scala tympani. This electrode can then be used for electrical stimulation, determination of electrode impedances and the measurement of compound action potentials of the auditory nerve. In addition to these applications, cochlear implant electrodes can also be used as drug delivery devices, if a topical delivery of pharmaceutical agents to the cells or fluids of the inner ear is intended.

The goal of this protocol is to provide an animal model of cochlear implantation, which can be used to address a multitude of research questions. Potential applications include the evaluation of pharmaceutical interventions or electrical stimulation for beneficial effects on hearing thresholds or electrode impedances.