PPy için Gazi İşleri liyakat ödülü; Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hibe R01-HL088424 tarafından sağlanan fon.

1. Sünger Hazırlama <ol><li> % 0.9 (w / v) doymuş sulu sodyum klorür çözeltisi gece boyunca karıştırıldı hidrat süngerler. </li><li> Onları otoklavlayarak sulu sünger sterilize edin. 121 azından 25 dakika süreyle 75 mL, otoklav ° C. </li></ol> Not: aşağıda tarif edildiği gibi bir tedavi ile Yükleme süngerler, isteğe bağlıdır. <ol start="3"><li> Steril alet ile steril bir başlık, bir cımbız kullanarak çözüm itibaren bir sünger pick up. Cımbız ile süngeri sıkın ve sünger mümkün olduğunca çözüm kaldırmak için bir vakum ucu kullanın. Süngerler arasında boşluk bırakmak için dikkatli olmak, bir doku kültürü çanak sünger dışarı sıkılmış yerleştirin. Çoklu kuyucuğu farklı tedavilerin ayırmak için kullanılabilir. </li><li> Doğrudan bir sünger merkezi üzerine tedavisi çözeltisi Pipeti. Çözüm sünger yerleştirildi sonra pipet süngeri hafifçe bastırın, bu sünger çözüm absorbe yardımcı olur. Not: 6mmKullandığımız 2.75 mm kalınlığında sünger tarafından çapı 25 ul maksimum tutun edebiliyoruz. </li><li> Tüm süngerler yüklendikten sonra onlar fare implante kadar, içinde bulundukları plaka buz üzerinde saklanabilir. </li></ol> 2. Cerrahi Prosedür <ol><li> Uygun hayvan uyutmak ve önleyici analjezik yönetmek. Bütün prosedür hayvan başına yaklaşık 20 dakika sürecek. Ile oksijen dakikada 30 g fare 1.5 litre için İzofluran% 1.5 anestezi teşvik ve korumak için kullanılır. Hayvan artık tutam refleks testi, yatar pozisyonda burun konisi yer duyarlı olduğu zaman. Göğüs kafesi altındaki alt ventral tarafta alana 1 inç tarafından 1 inç tıraş için elektrikli tıraş makinesi kullanın. Kesim saç silerek temizleyin. </li><li> % 70 alkol takip betadin ile temizleyerek traş alanı sterilize edin. Bu betadin-alkol temizlik üç kez tekrarlayın. </li><li> Cilt tutan öğretti iken, dikey bir kesi 1.5-2 kat dia yapmak için neşter kullanınsünger metre vücut boşluğunda kesmek için değil temkinli olma, eklenecek. </li><li> Tenine tutmak için bir cımbız kullanmak ve yavaş Metzembaum makasla kesi her iki tarafında kas cilt ayırma başlar. Cep arka ayakları ile fare genişliği boyunca ve göğüs kafesi gitmek gerekir. </li><li> Taraftan hafifçe sıkıştırarak hayvan yerleştirilmesini ilk süngeri almak için bir cımbız kullanın. Bunun üst ve alttan tutulur, böylece bir düz cımbızla için sünger transfer edin. </li><li> Tenine tutmak ve sünger eklenir, böylece bir şekilde kaldırmak için cımbız kullanın. Yavaş yavaş onu sünger doku dokundu sonra taşımak zor olacaktır altındaki ve deri veya kas dokunmadan çalışan sünger yerleştirin. Tüm süngerler için tekrarlayın. </li><li> Bir kez tüm süngerleri yerine insizyon kapatmak için, iki veya üç dikiş eklenmiş. Birlikte kesi her iki tutun ve sutu iplik cımbız kullanınCildin her iki katmanları üzerinden yeniden. Deri kenarları kapatmak için yeterli İlk atışta sıkın. Bir daha diğer yönü, sıkı düğüm çekerek bu sefer atışı ile kare düğüm bitirin. Sonra sütür (Şekil 2) bitirmek için iki kare knot kravat. Tüm insizyon kapatmak için ek sütürler yerleştirin. Diğer yara bağ yöntemleri gibi dermabond, yara klipler, ya da zımba olarak kullanılabilir. </li><li> Anestezi sisteminden hayvan çıkarın ve bilinç devam ederken izlemek. Hayvan hızlı yürüyebilen başlayacak ve pre-op hareketlilik dönmelidir. Yeterince yiyecek ve su ulaşabiliyorlar emin olmak. Bazı nemlendirilmiş gıda geri kazanım yardımcı kafesinin alt yerleştirilebilir. Sıkıntı veya rahatsızlık belirtileri için günlük hayvan izlemeye devam edin ve infeksiyon, inflamasyon ve açılması için kesi yeri kontrol edin. Kurtarma için herhangi bir komplikasyon bulunursa gerekli işlemi yapın. </li></ol> 3. İsteğe bağlı Enjeksiyon <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Not: süngerler hayvan implante edilmiş bir kez de hücreleri, ilaç, büyüme faktörleri gibi bir çözeltisi ile enjekte edilebilir Bu çeşitli iletim süreleri ve uygulama sırasında püskürtülen maddenin etkisi analizi için olanak rejimler. Enjeksiyonlar yapılır ise bir kontrol her zaman kullanılmalıdır. <ol><li> Istenen bir çözüm sünger enjekte için, önce fare yönetmek için maddenin miktarını belirlemek. Madde enjeksiyon hacmi yarısından az toplam hacmi tutabilir sünger olacak şekilde konsantre edilmesi gerekmektedir. </li><li> Enjeksiyon (bir 28 G iğne kullanmak fare için) bir şırınga hazırlayın. </li><li> Anestezi altında enjeksiyonlar almak için hayvan yerleştirin. </li><li> Hayvan artık kıskı testi yanıt zaman püskürtme verilebilir. </li><li> Enjeksiyon sünger merkezinde 45 derecelik bir açıyla kapsamlı deriyi iğne itin vermek. Sonra sadece yarım gidiyor sünger içine iğne itinkalınlığı boyunca. Amaç sünger tam merkezine enjekte edilmesidir. </li><li> Iğne sünger olduğundan emin olmak için kontrol etmek için, yavaş yavaş dikey iğne kaldırın. İğne sünger ise, sünger iğne ile hareket etmesi gerekir. </li><li> Yavaşça sünger içine enjekte ve iğne çıkarılır. Enjeksiyonları gerektiren birden süngerler varsa bu sıvı enjekte bazı enjeksiyon önceki sitelerin basılmış olacaktır mümkündür. </li></ol> 4. Sünger Kaldırma Not: sünger çıkartılması sırasında, ekstra dikkatli sünger anlaştım. Cerrahi aletler ile sünger nüfuz kaçının ve çevre doku çapında büyük arterler kaçınarak süngeri aşırı kanama engeller. <ol><li> Hayvan ötenazi sonra, bir cımbız kullanarak ve bir kesi sünger yakın hale cilt tutarak sünger kaldırın. </li><li> Çevreleyen kapsül gelen süngerler dikkatle ayırın<html> nd sünger çevreleyen ekstra doku hasat kaçının. Bu tür ilaç dağıtım veya morfometri gibi testlerde, az doğruluk eksizyonu için gereklidir. </li></ol> 5.. Temsilcisi Sonuçlar Kaldırılır süngerler yapılacaktır analiz türüne bağlı olarak farklı koşullar altında muhafaza edilebilir. Kesit için, alınan süngerler gibi Optimal Kesme Sıcaklığı (OCT) bileşik olarak dondurulması için orta gömülü olabilir veya parafin bloklar (Şekil 3A ve B) gömülmesi, kesit% 10 formalin yerleştirilir. Sünger çapı boyunca ikiye kesip (Şekil 4A ve B) yüzey kısmak gömülü olduğunda kesimi için iyi sonuçlar elde edilir. Sünger olduğu tüm genişliği mevcutsa bu nedenle sünger bölümleri alınmalıdır. Şekil 3A, iki süngerler gösterir, sol sünger gömülü / kesitli yanlış ve sağda düzgün sünger işlendi edildi. ent &quot;&gt; işlem için hazır olana kadar analiz için, süngerler bir Eppendorf tüp yerleştirilebilir ve -20 ° C&#39;de muhafaza RNA ve kantitatif gerçek zamanlı PCR analizi süngerler bir Eppendorf tüp, flaş dondurulmuş, yerleştirilir ve saklanmalıdır için. - Buna ek olarak 80 ° C&#39;ye, örneğin QIAGEN gelen RNAlater gibi, bir RNA koruyucu madde, daha yüksek sıcaklıklarda, güvenli depolama için RNA stabilize etmek için kullanılabilir. Yara sıvısı bir tüp içinde süngerler sıkma ile toplanmış, ve gelen sıvının bir araya birleştirilmesi edilebilir temsili bir numune elde etmek için birden fazla süngerler. gibi fibroblast, makrofaj ve lenfosit gibi Canlı hücreler, ayrıca süngerler elde edilebilir. hayvan çıkarıldıktan sonra, sünger hücrelerinin istenen türü için uygun bir ortam içinde yer olabilir. Süngerler olabilir Fiziksel (yani kıyma) veya enzimatik (yani kollajenaz) yöntemleri ile hücreleri çıkarmak için işlenir. <img alt="Şekil 1.." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig1.jpg" /> Şekil 1. DehidratasyonaÜç farklı boyutta ted PVA sünger diskler. <img alt="Şekil 2." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig2.jpg" /> Şekil 2. Yanal yara ve dört PVA sünger konumunu gösteren fare yara iyileşmesi modeli resmi. <img alt="Şekil 3." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig3.jpg" /> Şekil 3. 4x (A) H &amp; E boyama ve kesitler parafin sünger 10x (B) trikrom. <img alt="Şekil 4." src="/files/ftp_upload/3885/3885fig4.jpg" /> Şekil 4. (A) çapı boyunca yarısında sünger kesim resmi. (B) PVA sünger yarısında, Ekim yan kısmak gömülü.

<ol>
	<li>Efron, D. T., Barbul, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+sponge+models.">Subcutaneous sponge models.</a> Methods Mol. Med. 78, 83-93 (2003).</li><li>Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+a+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue.">Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue.</a> Wound Repair. 8, 83-96 (2000).</li><li>Sprugel, K. H., McPherson, J. M., Clowes, A. W., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+growth+factors+in+vivo.+I.+Cell+ingrowth+into+porous+subcutaneous+chambers.">Effects of growth factors in vivo. I. Cell ingrowth into porous subcutaneous chambers.</a> Am. J. Pathol. 129, 601-613 (1987).</li><li>Alaish, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+polyvinyl+alcohol+sponge+and+expanded+polytetrafluoroethylene+subcutaneous+implants+as+models+to+evaluate+wound+healing+potential+in+human+beings.">Comparison of the polyvinyl alcohol sponge and expanded polytetrafluoroethylene subcutaneous implants as models to evaluate wound healing potential in human beings.</a> Wound Repair. 3, 292-298 (1995).</li><li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+wound+repair.">Animal models for wound repair.</a> Arch. Dermatol. Res. 290, 1-11 (1998).</li><li>Alfaro, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=sFRP2+suppression+of+bone+morphogenic+protein+(BMP)+and+Wnt+signaling+mediates+mesenchymal+stem+cell+(MSC)+self-renewal+promoting+engraftment+and+myocardial+repair.">sFRP2 suppression of bone morphogenic protein (BMP) and Wnt signaling mediates mesenchymal stem cell (MSC) self-renewal promoting engraftment and myocardial repair.</a> J. Biol. Chem. 285, 35645-35653 (2010).</li><li>Andrade, S. P., Ferreira, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sponge+implant+model+of+angiogenesis.">The sponge implant model of angiogenesis.</a> Methods Mol. Biol. 467, 295-304 (2009).</li><li>Diegelmann, R. F., Lindblad, W. J., Cohen, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subcutaneous+implant+for+wound+healing+studies+in+humans.">A subcutaneous implant for wound healing studies in humans.</a> J. Surg. Res. 40, 229-237 (1986).</li><li>Efron, D. T., Most, D., Shi, H. P., Tantry, U. S., Barbul, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+studying+wound+healing.">A novel method of studying wound healing.</a> J. Surg. Res. 98, 16-20 (2001).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+for+selecting+the+correct+animal+model+for+dermal+wound-healing+studies.">Considerations for selecting the correct animal model for dermal wound-healing studies.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 1087-1096 (2008).</li></ol>

Biz ifşa hiçbir şey yok.

<p class="jove_content"&gt; Yara iyileşmesi sünger modeli birden fazla varyasyon vardır; insanlarda ve süngerler gibi birçok farklı türde yapılabilir da dorsal implante edilebilir<sup&gt; 1,2,8</sup&gt;. İnsanlarda ve diğer bazı türlerde çalışmaları için, sünger kapsüllenmektedir gelen sünger önlemek ve çıkarılması kolay izin vermek için bir emici tüp yer silikon gerekebilir<sup&gt; 4,8</sup&gt;. Sünger implantasyon yeri istenen sonuçları ve teknisyen beceri göre değiştirilebilir. Dorsal implantasyon ventral implantların karın boşluğuna ile kesme olasılığı nedeniyle daha zor iken süngerleri, deri altına taşımak için izin verebilirsiniz. Ilaç dağıtım çoklu enjeksiyon ihtiyacını ortadan kaldırarak, sabit ve kontrollü böylece süngerler kateter ile kurulabilir<sup&gt; 9</sup&gt;. Daha küçük, tüp süngerler bile bir iğne aracılığıyla enjekte edilebilir<sup&gt; 8</sup&gt;. Süngerler &#39;bileşimin yalnızca polivinil alkol ile sınırlı değildir. Bunlar özellikle bir çok malzemelerden veya kombinasyon halinde hazırlanabilir<sup&gt; 7</sup&gt;.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; Bu sünger hazırlanması ve tutarlı ve doğru anlaşılması için hayvan yerleştirme için çok önemlidir. Süngerler yaprak kesilir, onlar karşılaştırılabilirlik için benzer ağırlığı olmalıdır. Sünger hücreleri veya bir tedavi ile yüklenecek ise, her bir sünger yerleştirilen miktarını kesin olmalıdır. Iyileşme süreci kafa artar uzaklık olarak azalacak hayvan ve şifa sünger yerleştirme konumuna göre değişebilir<sup&gt; 1,10</sup&gt;.</p

<table border="1"><tbody><tr><td> Malzeme Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> PVA Sünger </td><td> Medtronic </td><td> CF120 </td><td> Sünger boyutu ve gözeneklilik deney bağlıdır </td></tr><tr><td> Neşter bıçağı boyutu 15 </td><td> Medial BD </td><td> 371115 </td><td></td></tr><tr><td> Metzembaum makas </td><td> Thermo Scientific </td><td> 79-211 </td><td></td></tr><tr><td> Hemostat Forseps </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 13004-14 </td><td></td></tr><tr><td> İğne tutucu </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 12004-16 </td><td></td></tr><tr><td> 5-0 naylon sütür </td><td> Ethilon </td><td> 698 </td><td></td></tr><tr><td> Ekim Compound </td><td> Doku-Tek </td><td> 4583 </td><td></td></tr></tbody></table>

the polyvinyl alcohol sponge model implantation

Yara iyileşmesi birçok hücre tipleri, büyüme faktörleri ve 1-3 bileşikleri içeren karmaşık, çok aşamalı bir süreçtir. In vivo olarak yürütülen zaman Çünkü bu karmaşıklık, yara iyileşmesi çalışmaları en kapsamlı vardır. In vivo insizyonel, eksizyonel, ölü boşluk dahil olmak üzere akut yara iyileşmesi, çalışma mevcut modeller, ve yanık birçok vardır. Ölü boşluk modelleri yara dokusu oluşumu ve maddelerin etkilerini incelemek amacıyla kullanılan yapay gözenekli implantlar vardır. Yaygın olarak kullanılan ölü boşluk Bazı modellerin polivinil alkol (PVA) süngerler, çelik hasır silindir, genişletilmiş politetrafloroetilen (ePTFE) malzeme ve Cellstick 1,2 içerir. Her ölü alan model, malzemenin kompozisyonu ve implantasyon yöntemlerine dayalı kendi sınırlamaları vardır. Çelik hasır silindirli model implantasyonu sonrası infiltrasyon bir lag fazı vardır ve granülasyon dokusu oluşumu Begi önce uzun bir zaman gerektirirns 1. Yara iyileşmesi ileriki aşamalarında en iyi ePTFE modeli 1,4 kullanılarak analiz edilmektedir. Cellstick tipik insan ameliyat yaraları çalışmak için kullanılan ve akışkan 2 sarılır bir silikon tüp model içinde bir selüloz sünger. Süresi ile 5 hayvan dev bir hücre reaksiyonu neden olan bir yabancı cisimlerin tepkisi provoke başlar, çünkü PVA sünger, akut çalışmaları ile sınırlıdır. Diğer malzemelerin aksine, PVA sünger takmak ve çıkarmak, inert ve biyolojik malzemelerden yapılan ve henüz histolojik analiz için 2,5 kesitli olmak için yeterince yumuşak kolaydır. Yara olarak PVA sünger şifa granülasyon dokusu oluşumu analiz etmek için çok yararlıdır, kollajen depolanması, yara sıvısı kompozisyon ve iyileşme süreci 1,2,5, kimyasal maddelerin etkileri. Yara iyileşmesi niteliklerini geniş bir dizi okuyan içinde kullanımı yanı sıra, PVA sünger, aynı zamanda çalışmaları diğer birçok türde kullanılmıştır. Bu holarak tümör anjiyogenezi, ilaç dağıtım ve kök hücre sağkalım ve engraftman 1,2,6,7 araştırmak için kullanılmıştır. Onun büyük alterability, önceden yaygın olarak kullanılması ve tekrarlanabilir sonuçlar ile, PVA sünger pek çok çalışmada 1,2 için ideal bir modeldir. Burada, hazırlık, implantasyon ve yara iyileşmesi bir fare modelinde PVA sünger diskler (Şekil 1) alımı anlatacağız.

Watch this Scientific Journal Video about The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation at JoVE.com

The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

Ilaçlar, büyüme faktörleri ve / veya yara tamir bir hayvan modelinde manipüle hücrelerin etkilerini analiz etmek için yararlı bir araç tanımlanmıştır. Bu teknik sunar ve içeren ve ayrıca arzu edilen tedavi çıkarıldı ve analiz edilmesi için bir platform sağlamak için bir polivinil alkol (PVA) sünger özellikleri kullanmaktadır.

Polivinil Alkol Sünger Model İmplantasyonu

Wound healing is a complicated, multistep process involving many cell types, growth factors and compounds1-3. Because of this complexity, wound healing ...

the-polyvinyl-alcohol-sponge-model-implantation

Research

JoVE Journal

Medicine

19.7K Görüntüleme.  Vanderbilt University School of Medicine. Ilaçlar, büyüme faktörleri ve / veya yara tamir bir hayvan modelinde manipüle hücrelerin etkilerini analiz etmek için yararlı bir araç tanımlanmıştır. Bu teknik sunar ve içeren ve ayrıca arzu edilen tedavi çıkarıldı ve analiz edilmesi için bir platform sağlamak için bir polivinil alkol (PVA) sünger özellikleri kullanmaktadır.

Video: The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, including mental retardation due to disordered and damaged brain development. Fetal alcohol spectrum disorder (FASD) is a term used to cover a continuum of birth defects that occur due to maternal alcohol consumption, and occurs in approximately 4% of children born in the United States. With 50% of child-bearing age women reporting consumption of alcohol, and half of all pregnancies being unplanned, unintentional exposure is a continuing issue2. In order to best understand the damage produced by ethanol, plus produce a model with which to test potential interventions, we developed a model of developmental ethanol exposure using the zebrafish embryo. Zebrafish are ideal for this kind of teratogen study3-8. Each pair lays hundreds of eggs, which can then be collected without harming the adult fish. The zebrafish embryo is transparent and can be readily imaged with any number of stains. Analysis of these embryos after exposure to ethanol at different doses and times of duration and application shows that the gross developmental defects produced by ethanol are consistent with the human birth defect. Described here are the basic techniques used to study and manipulate the zebrafish FAS model.

In order to understand the molecular mechanisms of the ethanol-induced developmental damage, we have developed a zebrafish model of ethanol exposure and are exploring the physical, cellular, and genetic alterations that occur after ethanol exposure1. We then seek to find potential interventions and rapidly test them in this animal model.

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Tıp

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Implantation of the Syncardia Total Artificial Heart

With advances in technology, the use of mechanical circulatory support devices for end stage heart failure has rapidly increased. The vast majority of such patients are generally well served by left ventricular assist devices (LVADs). However, a subset of patients with late stage biventricular failure or other significant anatomic lesions are not adequately treated by isolated left ventricular mechanical support. Examples of concomitant cardiac pathology that may be better treated by resection and TAH replacement includes: post infarction ventricular septal defect,&#160;aortic root aneurysm / dissection, cardiac allograft failure, massive ventricular thrombus, refractory malignant arrhythmias (independent of filling pressures), hypertrophic / restrictive cardiomyopathy, and complex congenital heart disease. Patients often present with cardiogenic shock and multi system organ dysfunction. Excision of both ventricles and orthotopic replacement with a total artificial heart (TAH) is an effective, albeit extreme, therapy for rapid restoration of blood flow and resuscitation. Perioperative management is focused on end organ resuscitation and physical rehabilitation. In addition to the usual concerns of infection, bleeding, and thromboembolism common to all mechanically supported patients, TAH patients face unique risks with regard to renal failure and anemia. Supplementation of the abrupt decrease in brain natriuretic peptide following ventriculectomy appears to have protective renal effects. Anemia following TAH implantation can be profound and persistent. Nonetheless, the anemia is generally well tolerated and transfusion are limited to avoid HLA sensitization. Until recently, TAH patients were confined as inpatients tethered to a 500 lb pneumatic console driver. Recent introduction of a backpack sized portable driver (currently under clinical trial) has enabled patients to be discharged home and even return to work. Despite the profound presentation of these sick patients, there is a 79-87% success in bridge to transplantation.

The purpose of this manuscript is to briefly review indications, management, and outcomes for the total artificial heart. Video operative techniques for device implantation are presented.

Syncardia Total Yapay Kalp İmplantasyonu

With advances in technology, the use of mechanical circulatory support devices for end stage heart failure has rapidly increased. The vast majority of ...

Implantation of Total Artificial Heart in Congenital Heart Disease

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital heart disease (CHD), the malformed heart presents a challenge to TAH implantation. 
In the case presented here, a 17 year-old patient with congenital transposition of the great arteries (CCTGA) experienced progressively worsening HF due to his congenital condition. He was hospitalized multiple times and received an implantable cardioverter defibrillator (ICD). However, his condition soon deteriorated to end-stage HF with multisystem organ failure. 
Due to the patient's grave clinical condition and the presence of complex cardiac lesions, the decision was made to proceed with a TAH. The abnormal arrangement of the patient's ventricles and great arteries required modifications to the TAH during implantation.
With the TAH in place, the patient was able to return home and regain strength and physical well-being while awaiting a donor heart. He was successfully bridged to heart transplantation 5 months after receiving the device. This report highlights the TAH is feasible even in patients with structurally abnormal hearts, with technical modification.

This is a case report of a patient with congenitally corrected transposition of the great arteries (CCTGA) who received a total artificial heart (TAH) as a bridge to heart transplant. The TAH was successfully implanted with modifications to accommodate the patient's congenitally malformed heart.

Konjenital Kalp Hastalıklarında Total Yapay Kalp İmplantasyonu

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). At the most severe end of the spectrum is Fetal Alcohol Syndrome (FAS), characterized by growth retardation, craniofacial dysmorphology, and neurobehavioral deficits. Studies with animal models, including rodents, have elucidated many molecular and cellular mechanisms involved in the pathophysiology of FASDs. Ethanol administration to pregnant rodents has been used to model human exposure during the first and second trimesters of pregnancy. Third trimester ethanol consumption in humans has been modeled using neonatal rodents. However, few rodent studies have characterized the effect of ethanol exposure during the equivalent to all three trimesters of human pregnancy, a pattern of exposure that is common in pregnant women. Here, we show how to build vapor chambers from readily obtainable materials that can each accommodate up to six standard mouse cages. We describe a vapor chamber paradigm that can be used to model exposure to ethanol, with minimal handling, during all three trimesters. Our studies demonstrate that pregnant dams developed significant metabolic tolerance to ethanol. However, neonatal mice did not develop metabolic tolerance and the number of fetuses, fetus weight, placenta weight, number of pups/litter, number of dead pups/litter, and pup weight were not significantly affected by ethanol exposure. An important advantage of this paradigm is its applicability to studies with genetically-modified mice. Additionally, this paradigm minimizes handling of animals, a major confound in fetal alcohol research.

We demonstrate the construction of alcohol vapor chambers using readily available materials that simultaneously house 6 mouse cages. We further describe their use in a mouse model of fetal alcohol exposure equivalent to all 3&#160;trimesters of human pregnancy. This paradigm exposes animals during gestation and postnatal days 1-12.

İnsani Gelişim her üç trimesterde Eşdeğeri sırasında Alkol Fare Expose Kullanılan Buhar Odaları İnşaatı

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

Bir Perivasküler Drug Delivery Patch İmplantasyonunda ile Femoral Arter Tel Yaralanma sıçan Modeli

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of the role of the tumor microenvironment in treatment response, collectively point to the need for immune-competent orthotopic models for pre-clinical testing of these new therapies. This paper demonstrates how to establish an orthotopic immune-competent rat model of pleural malignant mesothelioma. Monitoring disease progression in orthotopic models is confounded by the internal location of the tumors. To longitudinally monitor disease progression and its effect on circulating immune cells in this and other rat models of cancer, a single tube flow cytometry assay requiring only 25 &#181;l whole blood is described. This provides accurate quantification of seven immune parameters: total lymphocytes, monocytes and neutrophils, as well as the T-cell subsets CD4 and CD8, B-cells and Natural Killer cells. Different subsets of these parameters are useful in different circumstances and models, with the neutrophil to lymphocyte ratio having the greatest utility for monitoring disease progression in the mesothelioma model. Analyzing circulating immune cell levels using this single tube method may also assist in monitoring the response to immune-based treatments and understanding the underlying mechanisms leading to success or failure of treatment.

The generation of an orthotopic rat model of pleural malignant mesothelioma by implantation of II-45 mesothelioma cells into the pleural cavity of immune competent rats is presented. A flow cytometric method to analyze seven immune cell subsets in these animals from a 25 &#181;l&#160;blood sample is also described.

II-45 singenik Rat Mezotelyoma Modelinde Ortotopik Yerleştirilmesi ve Periferik Bağışıklık Hücre İzleme

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Surgical Training for the Implantation of Neocortical Microelectrode Arrays Using a Formaldehyde-fixed Human Cadaver Model

This protocol describes a procedure to assist surgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain. Recent technological progress has enabled the fabrication of microelectrode arrays that allow recording the activity of multiple individual neurons in the neocortex of the human brain. These arrays have the potential to bring unique insight onto the neuronal correlates of cerebral function in health and disease. Furthermore, the identification and decoding of volitional neuronal activity opens the possibility to establish brain-computer interfaces, and thus might help restore lost neurological functions. The implantation of neocortical microelectrode arrays is an invasive procedure requiring a supra-centimetric craniotomy and the exposure of the cortical surface; thus, the procedure must be performed by an adequately trained neurosurgeon. In order to provide an opportunity for surgical training, we designed a procedure based on a human cadaver model. The use of a formaldehyde-fixed human cadaver bypasses the practical, ethical and financial difficulties of surgical practice on animals (especially non-human primates) while preserving the macroscopic structure of the head, skull, meninges and cerebral surface and allowing realistic, operating room-like positioning and instrumentation. Furthermore, the use of a human cadaver is closer to clinical daily practice than any non-human model. The major drawbacks of the cadaveric simulation are the absence of cerebral pulsation and of blood and cerebrospinal fluid circulation. We suggest that a formaldehyde-fixed human cadaver model is an adequate, practical and cost-effective approach to ensure proper surgical training before implanting microelectrode arrays in the living human neocortex.

We designed a procedure in which a formaldehyde-fixed human cadaver is used to assist neurosurgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain.

Bir insan Kadavra formaldehit sabit modeli kullanarak Neocortical elektrot dizilerin implantasyonu için cerrahi eğitim

This protocol describes a procedure to assist surgeons in training for the implantation of microelectrode arrays into the neocortex of the human brain. ...

Cochlear Implantation in the Guinea Pig

Cochlear implants are highly efficient devices that can restore hearing in subjects with profound hearing loss. Due to improved speech perception outcomes, candidacy criteria have been expanded over the last few decades. This includes patients with substantial residual hearing that benefit from electrical and acoustical stimulation of the same ear, which makes hearing preservation during cochlear implantation an important issue. Electrode impedances and the related issue of energy consumption is another major research field, as progress in this area could pave the way for fully implantable auditory prostheses. To address these issues in a systematic way, adequate animal models are essential. Therefore, the goal of this protocol is to provide an animal model of cochlear implantation, which can be used to address various research questions. Due to its large tympanic bulla, which allows easy surgical access to the inner ear, as well as its hearing range which is relatively similar to the hearing range of humans, the guinea pig is a commonly used species in auditory research. Cochlear implantation in the guinea pig is performed via a retroauricular approach. Through the bullostomy a cochleostomy is drilled and the cochlear implant electrode is inserted into the scala tympani. This electrode can then be used for electrical stimulation, determination of electrode impedances and the measurement of compound action potentials of the auditory nerve. In addition to these applications, cochlear implant electrodes can also be used as drug delivery devices, if a topical delivery of pharmaceutical agents to the cells or fluids of the inner ear is intended.

The goal of this protocol is to provide an animal model of cochlear implantation, which can be used to address a multitude of research questions. Potential applications include the evaluation of pharmaceutical interventions or electrical stimulation for beneficial effects on hearing thresholds or electrode impedances.