The present study was supported by grants from Kidney Research UK (ST4/2011), the Cunningham Trust (CT11/14) and the Mrs EA Hogg's Charitable Trust.

ملاحظة: تم إجراء التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي تفرضها الحيوانات (الإجراءات العلمية) لسنة 1986 وأجريت باستخدام الإجراءات العقيمة (تعقيمها) الأدوات الجراحية والمواد الاستهلاكية. في حين أن نموذج الفئران من الكلى IRI المعروضة هنا كان يؤديها على الذكور عمره 8 أسابيع BALB / ج الماوس فإنه لا يمكن أن يؤديها بتكاثر على مجموعة متنوعة من سلالات الفئران من كلا الجنسين وعادة ما تتراوح أعمارهم بين 7 - 15 أسابيع، مع سن الأمثل الوجود 8 أسابيع. تم الحصول على البيانات الواردة في المقطع نتائج ممثلة من كل من BALB / ج الفئران وFVB. ويستخدم تطبيق المالحة استعد للحفاظ على الأمعاء ومنطقة الجراحية رطبة ولكن يجب أن يتم رصدها بعناية والاحتفاظ بها إلى أدنى حد ممكن مثل التطبيق المفرط للسوائل يمكن أن يؤدي إلى خفض مصطنعة من المصل أو البلازما مستويات الكرياتينين، والذي هو مهم قراءات تجريبية. 1. إعداد الحيوانية وفتح البطن &lt;رأ&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفأر مع هيدروكلوريد الكيتامين (70 ملغ / كلغ) وهيدروكلوريد medetomidine (1 ملغ / كلغ) الغشاء البريتونى وتأكيد عمق التخدير عن طريق فقدان ردود الفعل مثل قرصة أخمص قدميه. مدة الطائرة مخدر الناتج هو 4 ساعات. هذا هو كافية لتنفيذ العملية الجراحية بأكملها وليس هناك حاجة التخدير التكميلي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الشعر المحيطة بمنطقة شق، تأكد من أن المنطقة خالية من الشعر فضفاضة، وتطهير الجلد في منطقة البطن باستخدام محلول مخفف الكلورهيكسيدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس على وسادة ساخنة الجراحية في موقف ضعيف وتحديد أطرافه العلوية والسفلية لوحة باستخدام المنخفضة تك شريط لاصق. تأكد من أن الأطراف العلوية ويحتفظ في الوضع الطبيعي لمنع ضغط الرئة. في جميع أنحاء الداخلي مراقبة الماوس للحروق الحرارية. إذا كان ذلك ممكنا فمن المستحسن أن مصدر الحرارة غير كهربائية يمكن استخدامها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة هيدروكلوريد البوبرينورفين مسكن (0.06 ملغ / كلغ)تحت الجلد وتطبيق مواد التشحيم العين إلى العين لمنع جفاف القرنية. تدار المسكنات قبل الجراحة من أجل مساعدة الانتعاش بعد الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام الأنسجة التي تفصل مقص أو شفرة المشرط جعل شق خط الوسط البطن وبصراحة فصل الجلد من الصفاق. هذا يسمح للجلد والغشاء البريتوني أن تخاط بشكل منفصل خلال إغلاق الجرح. يتم إجراء شق في ألبا اوعائي الخط مما يتيح الوصول إلى التجويف البريتوني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لخلق رؤية واضحة للمنطقة الجراحية إدراج ضام وثنى الماوس. </li></ol> 2. قسم الحالب واستئصال الكلية اليمنى <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع برفق الأمعاء نحو الجانب الأيسر من تجويف البطن باستخدام قطعة قطن معقمة تعقيمها مبلل بمحلول ملحي لفضح الكلى والحالب الحق. تغطية الأمعاء مع الستائر مبلل لمنع جفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع الحالب الحق مع ملقط الزاوية. Ligate الحالب باستخدام حق مرتين 6/0 سيلخياطة مضفر ك. لإجراء التجارب على المدى الطويل، واستخدام الخيوط الجراحية القابلة للامتصاص لجميع العمليات الجراحية في البطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم الحالب بين الغرز. بينما تقاطع الحالبي المثاني يجب منع البول من تسرب في الصفاق من المثانة هو ligated الحالب كضمانة ضد أي تسرب بعد العملية خلال تجارب طويلة الأجل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للسماح سهولة الوصول عند إجراء استئصال الكلية اليمنى، ودفع برفق حتى الكبد وإلى اليمين باستخدام قطعة من القطن مبللة وعقد في مكان باستخدام شاش مبلل لفضح الشريان الكلوي الأيمن والوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بصراحة تشريح النسيج الضام والدهون على طول الجانب الإنسي من الكلية اليمنى بقدر الشريان الكلوي الأيمن والوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء قناة تحت الشريان والوريد الكلوي عن طريق تحريك بعناية ملقط الزاوية تحت الأوعية الدموية. توجيه ملقط تحت مع النصائح مغلقة وبلطف إزالة مع نصائح مفتوحة من أجل تسهيل تشكيل القناة.<html></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 2.6 حتى نصائح من ملقط تكون مرئية من خلال الأنسجة الضامة فقط فوق الشريان الكلوي والوريد. مرة واحدة واضحة فرك بلطف نصائح من ملقط ضد نصائح من مجموعة أخرى من ملقط الزاوية لكسر بلطف النسيج الضام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع الشريان الكلوي والوريد يمكن الوصول إليها بشكل واضح أنها يمكن الآن المغطي. الشريحة بعناية ملقط الزاوية تحت الشريان الكلوي والوريد مع نصائح مغلقة. مرة واحدة في مكان فتح نصائح من ملقط وتوجيه مقطع قضيب تخثر الدم بين نصائح وبحزم تطبيق مقطع تخثر الدم على الشريان الكلوي والوريد على مقربة من الكلى. بدلا من الشريان والوريد الكلوي يمكن ligated باستخدام 6/0 خياطة الحرير مضفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم الشريان الكلوي المغطي والوريد على مقربة من الكلى، والتي يمكن أن تحذف الآن مع أي النسيج الضام تمسكا المتبقية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة أي الشاش تستخدم لعقد الكبد والأمعاء مع استبدال قطعة قطن. </li></ol>&gt; 3. نقص الأوكسجين الكلى اليسار وإعادة إشباع الخلايا <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع برفق الأمعاء نحو الجانب الأيمن من التجويف البطني مع مسحات القطن لفضح الكلية اليسرى والحالب، وتغطي مع الستائر مبلل. إذا لزم الأمر يمكن نحيد البنكرياس بشاش مبلل للسماح سهولة الوصول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام تشريح حادة لكسر بلطف الأنسجة الضامة الأمامية والخلفية إلى الشريان الكلوي الأيسر والوريد، ثم إنشاء قناة تحت السفن بطريقة مماثلة لتلك التي وصفها في شعبة الحالب واستئصال الكلية اليمنى الخطوة 2.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لحث على نقص الأوكسجين من الكلية اليسرى عن طريق تطبيق مقطع serrafine الصغيرة على الشريان الكلوي والوريد. ناجحة نقص الأوكسجين يمكن التأكد بصريا من قبل سواد موحدة التدريجي في الكلى. الأوعية الدموية بالإضافة إلى الشريان الكلوي الأيسر والوريد يمكن أن يقدم أحيانا على الكلى. إذا كان موجودا، وسوف تحتاج أيضا هذه الأوعية الدموية إضافية ليتم المغطي باستخدام مقاطع serrafine الصغيرة من أجل بنجاحلحث على نقص الأوكسجين في الكلى بأكمله. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استبدال الأمعاء وبعناية ضمان أنه لا توجد التقلبات المفاجئة التي قد تؤدي إلى نتائج المساومة المعوية ونقص الأوكسجين. مؤقتا إغلاق الصفاق مع خياطة واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقص الأوكسجين التالية الحث على الفور وضع الماوس على بطانية homeothermic مع الثرمستور المستقيم تعلق على وحدة التحكم التي من شأنها الحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية لمدة المطلوب من نقص الأوكسجين. لتحديد الطول المناسب من نقص الأوكسجين اللازمة للحث على الدرجة المطلوبة من الإصابة الكلوية والفشل الكلوي فمن المستحسن أن يتم تنفيذ المعايرة لكل سلالة والمشغل الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل نهاية فترة الدماغية قريبا إعادة فتح الغشاء البريتوني ووضع بعناية الأمعاء للسماح بالوصول إلى المشبك وعرض الكلى. الإدراج من ضام، كما هو موضح في الفيديو، وليس من الضروري وأجريت فقط لأغراض العرض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة البنودأمبير بعد فترة من نقص الأوكسجين أبرمت. مباشرة بعد إزالة الكلى سوف تتغير بسرعة اللون من المارون الظلام إلى الوردي الداكن صحية تشير ضخه ناجحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضمان مرة أخرى أن الأمعاء لا الملتوية قبل إغلاق الصفاق مع غرزة بطانية باستخدام 6/0 مضفر الحرير خياطة. ثم إغلاق الجلد باستخدام مقاطع الجلد المعدني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتقليل خطر العدوى بعد العمليات الجراحية، وتطبيق مطهر مثل محلول اليود / الكحول لمنطقة العمليات الجراحية. </li></ol> 4. الإنعاش والعناية بعد الجراحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التخدير عكس جزئيا مع هيدروكلوريد atipamezole (2 ملغ / كلغ) تحت الجلد وإدارة السوائل مع الحقن تحت الجلد من حرارة 1 مل المالحة لمنع الجفاف بعد الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد الفئران بعناية حتى أنها قد استعاد وعيه، وتظهر في حالة تأهب قادرون على تصحيح نفسها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمح أبقى الفئران لاسترداد في مربع ساخنة في 29 درجة مئوية، في الموضعated في بيئة هادئة، لمدة 24 ساعة. سوف الفئران لديها ضعف القدرة على التنظيم الحراري بسبب التخدير، وبالتالي فمن الأهمية بمكان أن يتم إيواؤهم في درجة حرارة مرتفعة لتمكين الانتعاش فعالة. ويمكن أيضا توفير الغذاء مبلل لتشجيع تناول السوائل والتغذية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتوفير تجارب الانتعاش على المدى الطويل المسكنات الجارية وإزالة مقاطع الجلد 7 أيام بعد الجراحة. </li></ol> 5. تقييم الوظيفية والهيكلية إصابة الكلى والتجديد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن جمع الدم من الوريد الذيل خلال التجارب أو عن طريق ثقب في القلب في وقت القتل الرحيم في نهاية التجربة. قياس وظيفة الكلى من الكرياتينين في مصل الدم، وذلك باستخدام طريقة كرياتيناز مقرها، واليوريا والنيتروجين في الدم (BUN) على الطرد المركزي محلل البيوكيميائية كما هو موضح سابقا 7. يحتاج وظيفة الكلى من الفئران صحية طبيعية يتم تحديدها قبل تأسيس نموذج للفشل الكلوي وهذا يمكن أن تختلف بشكل ملحوظ dependiنانوغرام على طريقة التحليل المستخدمة مثل رد الفعل جافي وطرق كرياتيناز أساس لقياس الكرياتينين تعطي نتائج مختلفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دراسة هيكل الكلوي عن طريق التشريح المرضي على البارافين جزءا لا يتجزأ من الكلى أقسام الأنسجة ملطخة Haematoxylin ويوزين (H &amp; E) أو حمض شيف الدوري (PAS). الاستيلاء على ما بين 5-10 الصور في التكبير 200X داخل الشريط الخارجي للالنخاع الخارجي (OSOM) لكل الماوس. تقييم مستوى الإصابة في OSOM كما جرح في هذه المنطقة هذا النموذج لأنه عرضة لنقص الأكسجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام أي من أنظمة التهديف اثنين المفصلة أدناه لقياس نخر أنبوبي حاد (ATN) أو التجديد. ويتضح التشكل ممثل التصنيفات المستخدمة في هذه الأنظمة في الشكل 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام نظام ثنائي بسيط ليسجل ATN. على أساس من النزاهة الخلوية وعلامة التشكل والاعتماد الأنابيب إما قابلة للحياة (مورفولوجيا الخلايا سليمة) أو نخرية (الأسواق العالمية ضغطها خلية للخطرgrity، مورفولوجيا الخلايا الشاذة أو فقدان الخلايا). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعبير عن عدد من الأنابيب نخرية كنسبة مئوية من إجمالي عدد الأنابيب (نخرية الأنابيب٪). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصنيف التجديد باستخدام نظام آخر يعتمد على سلامة الخلية، مورفولوجيا وعدد النوى. علامة والاعتماد الأنابيب كما صحية، نخرية أو جرحوا أو استرداد وفقا للمعايير الواردة في الخطوات التالية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كما هو الحال مع نظام التسجيل ATN (المفصل في الخطوة 5.4) الأنابيب علامة مع الخلايا الطبيعية سليمة صحية، في حين الأنابيب التي تبين سلامة الخلايا للخطر، ينبغي أن سجل مورفولوجيا الخلايا الشاذة أو فقدان الخلية العلني كما نخرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصنيف الأنابيب كما أصيب إذا كان لديهم ضعيفة السيتوبلازم التي تحتوي على عدد قليل من النوى. في المقابل، تعين الأنابيب التي تحتوي على أكثر النوى مع أكثر مورفولوجيا الخلايا العادية كما تتعافى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعبير عن كل تصنيف نبيب كنسبة مئوية من إجمالي عدد نبيب. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Kinsey, G. R., Li, L., Okusa, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+acute+kidney+injury.">Inflammation in acute kidney injury.</a> Nephron Exp Nephrol. 109, (2008).</li><li>Wei, Q., Dong, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+ischemic+acute+kidney+injury:+technical+notes+and+tricks.">Mouse model of ischemic acute kidney injury: technical notes and tricks.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 303, (2012).</li><li>Ferenbach, D. A., Kluth, D. C., Hughes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemeoxygenase-1+and+renal+ischaemia-reperfusion+injury.">Hemeoxygenase-1 and renal ischaemia-reperfusion injury.</a> Nephron Exp Nephrol. 115, (2010).</li><li>Ferenbach, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+induction+of+macrophage+hemeoxygenase-1+is+protective+during+acute+kidney+injury+in+aging+mice.">The induction of macrophage hemeoxygenase-1 is protective during acute kidney injury in aging mice.</a> Kidney Int. 79, 966-976 (2011).</li><li>Ferenbach, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage/monocyte+depletion+by+clodronate,+but+not+diphtheria+toxin,+improves+renal+ischemia/reperfusion+injury+in+mice.">Macrophage/monocyte depletion by clodronate, but not diphtheria toxin, improves renal ischemia/reperfusion injury in mice.</a> Kidney Int. 82, 928-933 (2012).</li><li>Ferenbach, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+expressing+heme+oxygenase-1+improve+renal+function+in+ischemia/reperfusion+injury.">Macrophages expressing heme oxygenase-1 improve renal function in ischemia/reperfusion injury.</a> Mol Ther. 18, 1706-1713 (2010).</li><li>Keppler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+creatinine+determination+in+mice+and+rats:+an+enzymatic+method+compares+favorably+with+a+high-performance+liquid+chromatography+assay.">Plasma creatinine determination in mice and rats: an enzymatic method compares favorably with a high-performance liquid chromatography assay.</a> Kidney Int. 71, 74-78 (2007).</li><li>Vinuesa, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+involvement+in+the+kidney+repair+phase+after+ischaemia/reperfusion+injury.">Macrophage involvement in the kidney repair phase after ischaemia/reperfusion injury.</a> J Pathol. 214, 104-113 (2008).</li><li>Friedewald, J. J., Rabb, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+cells+in+ischemic+acute+renal+failure.">Inflammatory cells in ischemic acute renal failure.</a> Kidney Int. 66, 486-491 (2004).</li><li>Gandolfo, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxp3++regulatory+T+cells+participate+in+repair+of+ischemic+acute+kidney+injury.">Foxp3+ regulatory T cells participate in repair of ischemic acute kidney injury.</a> Kidney Int. 76, 717-729 (2009).</li><li>Burne, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+CD4++T+cell+as+a+major+pathogenic+factor+in+ischemic+acute+renal+failure.">Identification of the CD4+ T cell as a major pathogenic factor in ischemic acute renal failure.</a> J Clin Invest. , 1283-1290 (2001).</li><li>Burne-Taney, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B+cell+deficiency+confers+protection+from+renal+ischemia+reperfusion+injury.">B cell deficiency confers protection from renal ischemia reperfusion injury.</a> J Immunol. 171, 3210-3215 (2003).</li><li>Kinsey, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulatory+T+cells+suppress+innate+immunity+in+kidney+ischemia-reperfusion+injury.">Regulatory T cells suppress innate immunity in kidney ischemia-reperfusion injury.</a> J Am Soc Nephrol. 20, 1744-1753 (2009).</li><li>Li, L., Okusa, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages,+dendritic+cells,+and+kidney+ischemia-reperfusion+injury.">Macrophages, dendritic cells, and kidney ischemia-reperfusion injury.</a> Semin Nephrol. 30, 268-277 (2010).</li><li>Lin, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+Wnt7b+is+critical+for+kidney+repair+and+regeneration.">Macrophage Wnt7b is critical for kidney repair and regeneration.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107, 4194-4199 (2010).</li><li>Lee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+macrophage+phenotypes+contribute+to+kidney+injury+and+repair.">Distinct macrophage phenotypes contribute to kidney injury and repair.</a> J Am Soc Nephrol. 22, 317-326 (2011).</li><li>Kumar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dexamethasone+ameliorates+renal+ischemia-reperfusion+injury.">Dexamethasone ameliorates renal ischemia-reperfusion injury.</a> J Am Soc Nephrol. 20, 2412-2425 (2009).</li><li>Sharples, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythropoietin+protects+the+kidney+against+the+injury+and+dysfunction+caused+by+ischemia-reperfusion.">Erythropoietin protects the kidney against the injury and dysfunction caused by ischemia-reperfusion.</a> J Am Soc Nephrol. 15, 2115-2124 (2004).</li><li>Gueler, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statins+attenuate+ischemia-reperfusion+injury+by+inducing+heme+oxygenase-1+in+infiltrating+macrophages.">Statins attenuate ischemia-reperfusion injury by inducing heme oxygenase-1 in infiltrating macrophages.</a> Am J Pathol. 170, 1192-1199 (2007).</li><li>Delbridge, M. S., Shrestha, B. M., Raftery, A. T., ElNahas, A. M., Haylor, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+body+temperature+in+a+rat+model+of+renal+ischemia-reperfusion+injury.">The effect of body temperature in a rat model of renal ischemia-reperfusion injury.</a> Transplant Proc. 39, 2983-2985 (2007).</li></ol>

The authors have no competing or conflicting interests to disclose.

IRI الكلوي هو أحد أهم أسباب آكي مع عدم وجود علاج محدد المتاحة. وكانت الدراسة التجريبية الكلوي IRI بالمعلومات للغاية مع العمل السابق مما يدل على دور الضامة، والخلايا الجذعية، الخلايا الليمفاوية وخلايا T-التنظيمية وكذلك الخلايا وسطاء في تحريض كل من الإصابة الحادة ومرحلة ...

نقص الأوكسجين إصابة ضخه (IRI) هو وضع شيوعا من إصابة لأجهزة متعددة بما في ذلك الكلى والقلب والدماغ. الكلوي IRI قد يؤدي إلى إصابة الكلى الحاد (آكي) في المرضى ولا علاج محدد هو متاح. آكي نتيجة IRI لديه المرضية المعقدة التي تنطوي على كل من الاستجابة المناعية الفطرية والتكيفية 1. نموذج تجريبي من الكلى IRI يوفر القدرة على تشريح الخلايا الرئيسية والوسطاء المتورطين في التسبب في آكي فضلا عن تجديد الكلوي اللاحقة التي تستتبعه خلال الأيام اللاحقة. وعلاوة على ذلك من آثار العوامل العلاجية الرواية على عمليات المرض يمكن تقييمها. الهدف العام للنموذج التجريبي للالكلوي IRI الموصوفة هنا هو للحث على حد سواء وظيفية وهيكلية إصابة حادة في الكلى. وقد استخدمت بعض المحققين النموذج الذي ينطوي على تحريض IRI الثنائية 2. على الرغم من أن نموذج IRI الكلوي الثنائية الاستخدام، ورن من جانب واحدآل IRI نموذج لديه ميزة لاستئصال الكلية اليمنى التي يجري الاضطلاع بها في وقت الجراحة. يخدم الأنسجة استئصال الكلية اليمنى قيمة عن الأنسجة التحكم في الدراسات التي تنطوي على خطوة المعالجة إما أن الحث أو يقمع التعبير عن الجينات أو البروتينات. على سبيل المثال، وقد استخدمنا هذا النموذج لتقييم آثار شروط مسبقة من الهيم arginate (HA) قبل 24 ساعة من الحقن الكلوي IRI 3. وأكد تحريض الناجح لسيتوبروتيكتيفي انزيم الهيم أوكسيجيناز-1-(HO-1) بواسطة HA قبل المعهد الجمهوري الدولي في حق السيطرة استئصال الكلية الأنسجة 4. انخفاض HA الكلوي في الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين IRI في جزء عبر آلية تعتمد HO-1. وبالمثل، وقد استخدمنا هذا النموذج في الدراسات نضوب البلاعم لدراسة دور الضامة في الكلى IRI 5. ويمكن استخدام تحليل المناعى للأنسجة استئصال الكلية اليمنى لتأكيد فعالية منهجية الاجتثاث. وبالتالي، يمكن الأنسجة استئصال الكلية اليمنى استخدامها لكلا تأكيد وتحديد مستوى طnduction أو تثبيط جزيء من الفائدة في كل حيوانات التجارب الفردية. وهذا النموذج تكون ذات فائدة للباحثين الذين يستخدمون المخدرات أو غيرها من المركبات لتعديل التعبير عن الجينات أو البروتينات الخ قبل تحريض الكلوي IRI. وقد استخدمت دراسات أخرى شقوق الجهة للوصول إلى الكليتين. نموذج الموصوفة هنا يستخدم عملية جراحية في البطن خط الوسط واحد لأداء كل من استئصال الكلية اليمنى وإحداث نقص الأوكسجين ضخه من الكلية اليسرى. ويوفر هذا النهج الجراحية التصور ممتازة من الملعب الجراحية بما في ذلك السويقات الكلوي ويتغير لونها التي تتبع الكلوي عنيق لقط. تجربتنا مع نشر نموذج 4-6 يشير إلى أن الفئران يتعافى سريعا من الجراحة مع قرب معدل البقاء على قيد الحياة بنسبة 100٪. أخيرا، وتحليل الحركية للنموذج على مدى فترة من 7 أيام إلى أن هذا النموذج يسلك استعادة كل من وظيفة الكلى ووحدة أنبوبي، معانتشار الخلايا أنبوبي كبير.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="676">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:125px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;"></td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Tissue scissors</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>14072 - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Micro-Adson forceps (Rat toothed)</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11019 - 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">S&#38;T JFA-5bTC Forceps - SuperGrip Angled</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>00649-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Colibri retractor</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>17000 - 04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Micro clip applicator</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Micro serrafines&#160;</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18055-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Olsen-Hegar needle holder</td>
			<td style="width:125px;">Fine Science Tools</td>
			<td>12002 - 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;"></td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;">Hemoclip Plus Ligating Clips Small</td>
			<td style="width:125px;">Weck</td>
			<td style="width:119px;">533837</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:265px;">Autoclip Wound Clip System, 9mm</td>
			<td style="width:125px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">PY2 52-3748</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:265px;">Silk Black Braided Suture, Size 6-0</td>
			<td style="width:125px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">723288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;">Standard Heat Matt</td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:265px;">Homeothermic Blanket &#38; Control Unit</td>
			<td style="width:125px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;"></td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;">Lacri-Lube</td>
			<td style="width:125px;">Allergan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:265px;">Vetasept Chlorhexidine&#160;&#160;</td>
			<td style="width:125px;">AnimalCare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vetalar : Ketamine hydrochloride</td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>100mg/ml solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Domitor : medetomidine hydrochloride&#160;</td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>1mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;">Vetergesic : Buprenorphine hydrochloride&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>0.3mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antisedan : Atipamezole hydrochoride</td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>5mg/ml</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

renal ischaemia reperfusion injury: a mouse model of injury and regeneration

الكلوي إصابة نقص الأوكسجين ضخه (IRI) هو سبب شائع للإصابة الكلى الحاد (آكي) في المرضى وانسداد تدفق الدم الكلوي أمر لا مفر منه خلال زرع الكلى. نماذج تجريبية أن بدقة وبتكاثر ألخص الكلوي IRI تشكل عاملا حاسما في تشريح الفيزيولوجيا المرضية لآكي وتطوير عوامل علاجية جديدة. قدم هنا هو نموذج الفأر من IRI الكلوي الذي يؤدي في استنساخه آكي. ويتحقق ذلك من خلال نهج خط الوسط البطن لعملية جراحية مع شق واحد مما يتيح كل من استئصال الكلية اليمنى والذي يوفر الأنسجة السيطرة ولقط من عنيق الكلوي الأيسر للحث على نقص الأوكسجين من الكلية اليسرى. من خلال رصد دقيق للموقف المشبك ودرجة حرارة الجسم خلال فترة نقص الأوكسجين هذا النموذج يحقق إصابة الوظيفية والهيكلية استنساخه. الفئران ضحى 24 ساعة بعد الجراحة إثبات فقدان وظائف الكلى مع ارتفاع في مستوى الكرياتينين في مصل الدم أو البلازما وكذلك البنىتلف الكلى تورال مع نخر أنبوبي حاد واضح. يحسن وظائف الكلى وإصابات الأنسجة الحادة يحل خلال 7 أيام التالية IRI الكلوي مثل أن هذا النموذج يمكن أن تستخدم لدراسة التجديد الكلى. وقد استخدمت هذا النموذج من IRI الكلوي لدراسة الفيزيولوجيا المرضية الجزيئية والخلوية من آكي فضلا عن تحليل للتجديد الكلوي اللاحقة.

إصابة أنبوبي والانتعاش يمكن تقييمها بواسطة H &amp; E PAS أو تلطيخ أقسام الأنسجة التالية الكلوي IRI. تصنف الأنابيب التي تقع داخل OSOM كما صحية، والجرحى، نخرية أو استرداد وفقا لمورفولوجيا الخلايا والنزاهة وعدد النوى (الشكل 1). إصابة الوظيفية والهيكلية في هذا النموذج ي?...

Watch this Scientific Journal Video about Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration at JoVE.com

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

The mouse model of renal ischaemia reperfusion injury described here comprises of a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia that results in acute kidney injury. This model uses a midline laparotomy approach with all steps performed via one incision.

الكلوي ونقص الأوكسجين إعادة إشباع الخلايا الإصابات: نموذج الفأر من الإصابات والتجديد

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

renal-ischaemia-reperfusion-injury-mouse-model-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

49.3K Views.  University of Edinburgh. The mouse model of renal ischaemia reperfusion injury described here comprises of a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia that results in acute kidney injury. This model uses a midline laparotomy approach with all steps performed via one incision.

Video: Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused by whole-body hypoperfusion.5,6 Successful reproduction of whole-body hypoperfusion in rodent models has been fraught with 
difficulty.7-9,9,10 Models which employ focal ischemia have repeatedly demonstrated results which do not translate to the clinical setting, and larger 
animal models which allow for whole body hypoperfusion lack access to the full toolset of genetic manipulation possible in the mouse.11,12 However, in recent 
years a mouse model of cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation has emerged which can be adapted to model AKI.13 This model reliably reproduces 
physiologic, functional, anatomic, and histologic outcomes seen in clinical AKI, is rapidly repeatable, and offers all of the significant advantages of a murine surgical 
model, including access to genetic manipulative techniques, low cost relative to large animals, and ease of use. Our group has developed extensive experience 
with use of this model to assess a number of organ-specific outcomes in AKI.14,15

A powerful model for perioperative and critical care related acute kidney injury is presented. Using whole body hypoperfusion induced by cardiac arrest it is possible to nearly replicate the histologic and functional changes of clinical AKI.

توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

نقص التروية-ضخه نموذج من إصابة الكلى الحاد والتليف آخر الاصابات في الفئران

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

نموذج الفئران من المعوية الإسكيمية-ضخه إصابة

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, diabetic retinopathy, and retinal vascular occlusions. Rodent models of I/R injury are providing significant insights into mechanisms and treatment strategies for human I/R injury, especially with regard to neurodegenerative damage in the retinal neurovascular unit. Presented here is a protocol for inducing retinal I/R injury in mice through elevation of intraocular pressure (IOP). In this protocol, the ocular anterior chamber is cannulated with a needle, through which flows the drip of an elevated saline reservoir. Using this drip to raise IOP above systolic arterial blood pressure, a practitioner temporarily halts inner retinal blood flow (ischemia). When circulation is reinstated (reperfusion) by removal of the cannula, severe cellular damage ensues, resulting ultimately in retinal neurodegeneration. Recent studies demonstrate inflammation, vascular permeability, and capillary degeneration as additional elements of this model. Compared to alternative retinal I/R methodologies, such as retinal arterial ligation, retinal I/R injury by elevated IOP offers advantages in its&#160;anatomical specificity, experimental tractability, and technical accessibility, presenting itself as a valuable tool for examining neuronal pathogenesis and therapy in the retinal neurovascular unit.

This article describes a procedure for inducing retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure in mice. Retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure serves to model human pathologies characterized by compromised oxygen and nutrient delivery in the retina, enabling researchers to examine potential cellular mechanisms and treatments for human diseases of the retinal neurovascular unit.

نموذج الفأر من الشبكية الإسكيمية-ضخه إصابة خلال ارتفاع ضغط العين

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

A Mouse Model of Single and Repetitive Mild Traumatic Brain Injury

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal neurological deficits and even amnesia. Athletes participating in contact sports are at high risk of exposure to large number of mTBIs. In terms of the level of injury in a sporting athlete, a mTBI is defined as a mild injury that does not cause gross pathological changes, but does cause short-term neurological deficits that are spontaneously resolved. Despite previous attempts to model mTBI in mice and rats, many have reported gross adverse effects including skull fractures, intracerebral bleeding, axonal injury and neuronal cell death. Herein, we describe our highly reproducible animal model of mTBI that reproduces clinically relevant symptoms. This model uses a custom made pneumatic impactor device to deliver a closed-head trauma. This impact is made under precise velocity and deformation parameters, creating a reliable and reproducible model to examine the mechanisms that contribute to effects of single or repetitive concussive mTBI.

Athletes absorb several hundred mild traumatic brain injuries (mTBI)/concussions every year; however, the consequence of these on the brain is poorly understood. Therefore, an animal model of single and repetitive mTBI that consistently replicates clinically relevant symptoms provides the means to advance the study of mTBI and concussion.

A نموذج الفأر من إصابات الدماغ الصدمة خفيفة ومتكررة خفيفة

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via recanalization of the coronary artery is the most effective strategy for reducing the size of ischemic myocardium. The coronary microvasculature cannot be visualized and imaged&#160;in vivo, but there are several invasive and noninvasive techniques that can be used to assess parameters which depend directly on coronary microvascular function. The endothelial function after ischemia reperfusion can be assessed also at the level of the coronary circulation via the coronary flow reserve (CFR).&#160;In this study, peak velocity of left anterior descending (LAD) coronary arteries was measured in rats in vivo via Transthoracic Doppler Echocardiography during resting and stress challenge (induced by Dobutamine). A normal heart can increase its coronary blood flow up to four times above the resting values during stress induction. Following ischemia reperfusion, we found a significantly diminished CFR, which can be used as a marker of coronary microvascular dysfunction. CFR has opened a window on the importance of microvascular dysfunction and has been shown to predict cardiovascular risk independent of whether the severe obstructive disease is present.

Coronary flow reserve (CFR), is defined as the ratio of maximal coronary blood flow to the resting coronary blood flow. We present a protocol for evaluating CFR in rats via ultrasound, which offers the opportunity to predict cardiovascular risk factors in the absence of obstructive coronary disease.

تقييم احتياطي التدفق التاجي بعد إعادة ضخ الإقفارية عضلة القلب في الفئران

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Delayed Intramyocardial Delivery of Stem Cells after Ischemia Reperfusion Injury in a Murine Model

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, cardiac stem cell therapy is studied by delivering SCs concurrently with the induction of myocardial injury. However, this approach presents two significant limitations: the early hostile pro-inflammatory ischemic environment may affect the survival of transplanted SCs, and it does not represent the subacute infarction scenario where SCs will likely be used. Here we describe a two-part series of surgical procedures for the induction of ischemia-reperfusion injury and delivery of mesenchymal stem cells (MSCs). This method of stem cell administration may allow for the longer viability and retention around damaged tissue by circumventing the initial immune response. A model of ischemia reperfusion injury was induced in mice accompanied by the delivery of mesenchymal stem cells (3.0 x 105), stably expressing the reporter gene firefly luciferase under the constitutively expressed CMV promoter, intramyocardially 7 days later. The animals were imaged via ultrasound and bioluminescent imaging for confirmation of injury and injection of cells, respectively. Importantly, there was no added complication rate when performing this two-procedure approach for SC delivery. This method of stem cell administration, collectively with the utilization of state-of-the-art reporter genes, may allow for the in vivo study of viability and retention of transplanted SCs in a situation of chronic ischemia commonly seen clinically, while also circumventing the initial pro-inflammatory response. In summary, we established a protocol for the delayed delivery of stem cells into the myocardium, which can be used as a potential new approach in promoting regeneration of the damaged tissue.

Stems cells are continuously investigated as potential treatments for individuals with myocardial damage, however, their decreased viability and retention within injured tissue can impact their long-term efficacy. In this manuscript we describe an alternative method for stem cell delivery in a murine model of ischemia reperfusion injury.

تأخر التسليم داخل القلب للخلايا الجذعية بعد إصابة إعادة ضخ الإقفاري في نموذج مورين

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods for choosing appropriate cuff sizes for the pulmonary vein (PV), pulmonary artery (PA), or bronchus (Br) are varied, thus making the determination of proper cuff size during rat lung transplantation an exercise of trial and error. By standardizing the cuffing technique to use the smallest effective cuff appropriate for the size of the vessel or bronchus, one can make the transplantation procedure safer, faster, and more successful. Since diameters of the PV, PA, and Br are related to the body weight of the rat, we present a strategy to choosing an appropriate size using a weight-based guide. Since lung volume is also related to body weight, we recommend that this relationship should also be considered when choosing the proper volume of air for donor lung inflation during warm ischemia as well as for the proper volume of PBS to be instilled during bronchoalveolar lavage (BAL) fluid collection. We also describe methods for 4th intercostal space dissection, wound closure, and sample collection from both the native and transplanted lobes.

Here, we present optimizations to a rat lung transplantation model that serve to improve outcomes. We provide a size guide for cuffs based on body weight, a measurement strategy to ascertain the 4th intercostal space, and methods of wound closure and BAL (bronchoalveolar lavage) fluid and tissue collection.

نموذج زرع رئة الفئران لإصابة نقص التروية / التروية الدافئة: تحسينات لتحسين النتائج

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

An Effective Mouse Model of Unilateral Renal Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models are the only available resources that mimic the complexities of the IRI-associated damage encountered in vivo. This paper describes an effective mouse model of unilateral renal IRI that delivers highly reproducible data. Ischemia is induced by occluding the right renal pedicle for 30 min followed by reperfusion. In addition to the surgical procedure, a sequential overview of the expected physiological and histopathological changes following renal IRI will be provided by comparing data from seven different reperfusion times (4 h, 8 h, 16 h, 1 day, 2 days, 4 days, and 7 days). Critical data for planning experiments ahead, such as mean surgical time, average anesthetic consumption, and body weight changes over time, will be shared. This work will help researchers implement a reliable renal IRI model and select the appropriate reperfusion time that aligns with their intended investigative goals.

Renal ischemia-reperfusion injury is associated with high morbidity and mortality in hospitalized patients. Here, we present a simple and effective mouse model of unilateral renal ischemia-reperfusion injury and provide a sequential overview of representative pathological changes observed in the kidney.

نموذج فعال للفأر لإصابة نقص التروية الكلوية أحادية الجانب

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models ...