The authors have no acknowledgements.

ملاحظة: تم تنفيذ كافة الإجراءات الحيوانية بموافقة اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة سينسيناتي وفقا لدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية من المعاهد الوطنية للصحة (NIH النشر لا . 85-23، منقحة 1996). 1. الموت ببطء وتعقيم ماوس <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في المربع المنسدل تحتوي على جرعة supratheraputic من الأيزوفلورين والسماح ليستنشق إلى تأثير. بمجرد الموت الرحيم الماوس، وإزالة من مربع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلخل Cervically كوسيلة الثانية من القتل الرحيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم السطح الخارجي للالماوس عن طريق تطهير الحيوان مع الايثانول 70٪. </li></ol> 2. تحديد وعزل ثلاثة مستودعات الدهنية مختلفة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> براون الدهنية الأنسجة (BAT) العزلة: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من الفراء هو الرطب من التطهير الكحول للمساعدة في قطع طريق البشرة والجلد لايروبية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في موقف ضعيف مع ظهرها على الطاولة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستيلاء على الجلد مباشرة تحت الحجاب الحاجز مع ملقط، ورفع وشق مع مقص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع مستعرض حول محيط من الماوس لفضح الصفاق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كشف على شكل فراشة BAT مستودع كتبها لحب النصف العلوي من الفأرة. عقد أقل الزوائد والبطن في يد واحدة وسحب الجلد حتى نحو الرأس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توجيه الماوس، بحيث يتم وضعه عرضة على الطاولة. يجب الحرص على عدم تلوث مستودع يتعرض مع الشعر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأدوات الجراحية النظيفة وتغير إلى زوج جديد من القفازات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد موقع كتف والمناظر مستودع. إزالة بعناية أي الدهنية بيضاء سطحية فوق فراشة ثم تشريح فراشة من الدهون البني بين الكتفين. كن حذرا لتجنب العضلات المرتبطة بشكل وثيق مع الدهون البني. ملاحظة: إن استخدام المجهر تشريح يوصى به لإزالة ثهايت الدهنية، وكذلك في فصل الدهنية البني من كتف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الدهون مستودع ونقل إلى أنبوب microcentrifuge 2 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا RNA أو البروتين هو ليكون استخراجه، وتجميد الأنسجة عن طريق الغمر في النيتروجين السائل وتخزينها في -80 ° C. تجميد العينة في وقت واحد لمنع تدهور. إذا زراعة، وتغطي الأنسجة في DMEF-12 وتعيين على الجليد حتى يتم جمع جميع العينات للثقافة (معلومات إضافية). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل تحت الجلد الدهنية الأنسجة (SQ)، والأبيض الدهنية الأنسجة مستودع (WAT): <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع على زوج جديد من القفازات حتى لا عبر تلويث بين مستودعات الدهون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الكشف عن الأربية، ومستودعات SQ الثلاثي من قبل دي تغطية بقفاز النصف السفلي من الماوس. عقد الزوائد العليا والصدر في يد واحدة وسحب الجلد إلى أسفل نحو القدمين مع جهة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توجيه الماوس في موقف ضعيف مع الحرص على عدم تلوث مستودع يتعرض مع الشعر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> surgica نظيفةأدوات لتر والتغيير إلى زوج جديد من القفازات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بعناية المثلثات من الدهون SQ. يجب الحرص على عدم تلويث العينة مع العضلات، والدهون والغدد الثديية المجاورة أو عن طريق قطع أي السفن وتلوث العينة مع الدم. ويوصى باستخدام المجهر تشريح إذا لم يتم تعريف الحدود بشكل واضح: ملاحظة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مخازن الدهون ونقل إلى 2 مل أنابيب microcentrifuge. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا RNA أو البروتين هو ليكون استخراجه، وتجميد الأنسجة عن طريق الغمر في النيتروجين السائل وتخزينها في -80 ° C. تجميد العينة في وقت واحد لمنع تدهور. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتلطيخ، إصلاح أو تضمين في أكتوبر إذا زراعة، وتغطي الأنسجة في DMEF-12 وتعيين على الجليد حتى يتم جمع جميع العينات للثقافة (معلومات إضافية). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل نوعين من الدهون الحشوية الدهنية الأنسجة (VAT) والأبيض الدهنية الأنسجة (WAT) مستودع: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع على زوج جديد من القفازات حتى لا عبر تلويث بين مستودعات الدهون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع الخيال العلميssors، وقطع الصفاق بشكل مستعرض، مباشرة تحت الحجاب الحاجز. قطع الصفاق من الحجاب الحاجز إلى منتصف المستقيم coronally لفضح أعضاء البطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد موقع الخصية أو المبيض وتحديد المرفقة الأنسجة الدهنية البيضاء، والمعروفة باسم الدهنية بربخي في الذكور أو الدهنية الغدد التناسلية عند الإناث. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأدوات الجراحية النظيفة وتغير إلى زوج جديد من القفازات </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بعناية على حد سواء مستودعات الدهون بربخي من الخصيتين، epididymides، والأوعية الناقلة. أو إذا كان أنثى، تشريح بعناية كل من منصات الدهون الغدد التناسلية من المبيض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مخازن الدهون وتحويلها إلى 2 مل أنابيب ميكروسنتريفوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا RNA أو البروتين هو ليكون استخراجه، وتجميد الأنسجة عن طريق الغمر في النيتروجين السائل وتخزينها في -80 ° C. تجميد العينة في وقت واحد لمنع تدهور. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتلطيخ، إصلاح أو تضمين في أكتوبر إذا زراعة، وتغطي الأنسجة في DMEF-12 وتعيين على الجليد حتى يتم جمع جميع العينات للثقافة (معلومات إضافية). </لى&gt; </ol></li></ol> 3. عزل المحيطة بالأوعية الدهنية الأنسجة (PVAT) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العزلة من القلب: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الماوس في موقف ضعيف مع الزوائد العلوية والسفلية الممتدة إلى الخارج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الزوائد آمنة باستخدام الشريط الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تحديد المواقع الماوس كما المذكورة أعلاه، وخلق التوتر من خلال رفع حتى على عملية الخنجري مع ملقط. قطع أفقيا من خلال الحجاب الحاجز، ويعرض الجزء السفلي من التجويف الصدري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع الحفاظ على التوتر، من خلال رفع حتى على عملية الخنجري، قطع طريق القفص الصدري متفوق نحو الرأس، فقط لجانب من عظمة القص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التقاط القفص الصدري فقط أقل شأنا من الترقوة، وقطع على طول أدنى من الترقوة من نحو الإبطين في كلا الاتجاهين. وينبغي أن يكون التجويف الصدري ومحتوياته (القلب، الرئتين، الخ) الآن واضحة للعيان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنظيف التجويف الصدري من الدم دخيلة والسوائل باستخدام الجا معقمuze لامتصاص السوائل. إذا جمع الأجهزة أو الأوعية يجب التأكد من وافر (معلومات إضافية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم مسح المنطقة من السوائل، وقطع الأوعية القصبات الهوائية وربط لإزالة الرئتين، مما يسمح التعرض أفضل للقلب. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعريب واستئصال الأبهر المحيطة بالأوعية الدهنية الأنسجة (PVAT): <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأجهزة التالية من أجل تحديد أفضل الأجزاء السفلية من الشريان الأورطي: الكبد والمعدة والطحال والبنكرياس والأمعاء والقولون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أولا نبدأ مع تحديد المعدة والمريء. قطع المريء عند تقاطع المعدي المريئي لتحرير المعدة من الجسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبعد ذلك، التعرف على الأمعاء ومساريق المحيطة بها. قطع سطحي من خلال مساريق، كما أنها تقع بشكل وثيق جدا إلى الجزء الكلوي من الشريان الأبهر، ثم &quot;تشغيل الامعاء.&quot; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع القولون تحرير أقرب إلى المستقيم ممكن. وهكذا، وتحرير المعدة والأمعاء والقولون من الماوس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعادةتحريك المعدة والأمعاء والقولون والبنكرياس والطحال من خلال قطع مساريق إرفاق والسفن. البنكرياس والطحال يجب أن تأتي مجانا مع المعدة والأمعاء والقولون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكبد من خلال قطع الأوردة الكبدية وربط مساريق، وإزالة كل الفصوص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع بعيدا الطبقة الحشوية والدهون تحيط الكلى. ترك الكلى تعلق على الشريان الأورطي في الجسم الحي لتكون بمثابة علامات الجغرافية لشرائح مختلفة من الشريان الأورطي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شطف المنطقة مع معقم برنامج تلفزيوني 1X وإزالة جميع السوائل عن طريق امتصاص مع شاش معقم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام مقص الصغرى وملقط الدقيقة، فصل الشريان الأورطي من التعلق الظهري للعمود الفقري والتعلق بطني لالمريء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الشريان الأورطي عن طريق اتباع وفصل الشريان الأورطي طول الشريان الأورطي النازل من الأصل في القلب إلى التشعب في المنطقة الحرقفي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد وعزل السفن تحت الترقوة. عزل هذه السفنمن الرقبة إلى جذر الأبهر لفضح أفضل تقاطع الأبهر والجذور في القلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الغدة الصعترية ثم قطع الشريان العضدي الرأسي، والشريان السباتي المشترك اليسار، والشريان تحت الترقوة الأيسر، مما يسمح للحركة القلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمساعدة المجهر تشريح، عرض الأنسجة الدهنية المحيطة بالأوعية (PVAT) طبقة المحيطة الشريان الأورطي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع الحرص الشديد على عدم قرصة أو الضغط على PVAT، بلطف سحب الطريق PVAT من الشريان الأورطي مع ملقط الدقيقة. خفض بلطف المرفق من PVAT إلى الشريان الأورطي مع مقص الصغرى بدءا من منطقة الصدر فقط متفوقة إلى حيث يقع الحجاب الحاجز. ملاحظة: ينصح المجهر تشريح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر هذه العملية على طول الشريان الأورطي، والانتهاء في المنطقة الأبهر infrarenal، التي تقع على بعد متفوقة على التشعب الحرقفي السفينة الأبهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان المطلوب قوس الأبهر PVAT، وتستخدم نفس الأسلوب لإزالة PVAT من أقل جurvature من القوس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع عينات PVAT إلى 2 مل أنبوب microcentrifuge (ق). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا RNA أو البروتين هو ليكون استخراجه، وتجميد الأنسجة عن طريق الغمر في النيتروجين السائل وتخزينها في -80 ° C. تجميد العينة في وقت واحد لمنع تدهور. إذا زراعة، وتغطي الأنسجة في DMEF-12 وتعيين على الجليد حتى يتم جمع جميع العينات للثقافة (معلومات إضافية). ملاحظة: مستودعات الدهنية إضافية للنظر اذا كانت مهتمة في تحليل شامل مستودع الدهنية وتشمل: خلف الصفاق، المساريقي، ثربي، التامور والمأبضية. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+in+the+United+States,+2009-2010.">Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010.</a> NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).</li><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+and+trends+in+the+distribution+of+body+mass+index+among+US+adults,+1999-2010.">Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index among US adults, 1999-2010.</a> 307 (5), 491-497 (2012).</li><li>Cawley, J., Meyerhoefer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medical+care+costs+of+obesity:+an+instrumental+variables+approach.">The medical care costs of obesity: an instrumental variables approach.</a> Journal of Health Economics. 31 (1), 219-230 (2012).</li><li>Marder, W., Chang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Childhood+Obesity:+Costs,+Treatment+Patterns,+Disparities+in+Care,+and+Prevalent+Medical+Conditions.">Childhood Obesity: Costs, Treatment Patterns, Disparities in Care, and Prevalent Medical Conditions.</a> Thomson Medstat Research Brief. , (2006).</li><li>Cortez, M., Carmo, L. S., Rogero, M. M., Borelli, P., Fock, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-fat+diet+increases+IL-1,+IL-6,+and+TNF-&#945;+production+by+increasing+NF-&#954;B+and+attenuating+PPAR-&#947;+expression+in+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells.">A high-fat diet increases IL-1, IL-6, and TNF-&#945; production by increasing NF-&#954;B and attenuating PPAR-&#947; expression in bone marrow mesenchymal stem cells.</a> Inflammation. 36 (2), 379-386 (2013).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Hung, C. M., Sparks, C. A., Tang, Y., Li, H., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTEN+loss+in+the+Myf5+lineage+redistributes+body+fat+and+reveals+subsets+of+white+adipocytes+that+arise+from+Myf5+precursors.">PTEN loss in the Myf5 lineage redistributes body fat and reveals subsets of white adipocytes that arise from Myf5 precursors.</a> Cell Metab. 16 (3), 348-362 (2012).</li><li>Sethi, J. K., Vidal-Puig, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+Adipose+tissue+function+and+plasticity+orchestrate+nutritional+adaptation.">Thematic review series: adipocyte biology. Adipose tissue function and plasticity orchestrate nutritional adaptation.</a> J Lipid Res. 48 (6), 1253-1262 (2007).</li><li>Aarsland, A., Chinkes, D., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+and+whole-body+fat+synthesis+in+humans+during+carbohydrate+overfeeding.">Hepatic and whole-body fat synthesis in humans during carbohydrate overfeeding.</a> Am J Clin Nutr. 65 (6), 1774-1782 (1997).</li><li>Park, A., Kim, W. K., Bae, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinction+of+white,+beige+and+brown+adipocytes+derived+from+mesenchymal+stem+cells.">Distinction of white, beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells.</a> World J. Stem Cells. 6 (1), 33-42 (2014).</li><li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+adipocytes+are+a+distinct+type+of+thermogenic+fat+cell+in+mouse+and.">Beige adipocytes are a distinct type of thermogenic fat cell in mouse and.</a> 150 (2), 366-376 (2012).</li><li>Giralt, M., Villarroya, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White,+brown,+beige/brite:+different+adipose+cells+for+different+functions.">White, brown, beige/brite: different adipose cells for different functions.</a> Endocrinology. 154 (9), 2992-3000 (2013).</li><li>Casteilla, L., P&#233;nicaud, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods Mol. Biol. 456, 23-38 (2008).</li><li>Grant, R., Youm, Y. H., Ravussin, A., Dixit, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+adipose+tissue+leukocytosis+in+obesity.">Quantification of adipose tissue leukocytosis in obesity.</a> Methods Mol. Biol. 1040, 195-209 (2013).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests or other conflicts of interest.

السمنة يمكن أن يؤدي إلى مجموعة واسعة من الحالات المرضية وفهم كامل للدور الذي الدهنية ليست مفهومة تماما يلعب. وبالتالي مواصلة البحث في مجال الدهنية أمر ضروري. النماذج الحيوانية، وتحديدا نماذج الفئران هي مثالية للبحث الأولي في تطور الأمراض واختبار العلاجات الدوائية ?...

جعلت الدهنية وظهور ملحوظ في أضواء وسائل الإعلام، وذلك بسبب الزيادة الهائلة السمنة خلال العقود القليلة الأخيرة من القرن ال20. يؤثر السمنة حاليا أكثر من ثلث البالغين و 17٪ من الأطفال والمراهقين في الولايات المتحدة (US) 1. تغطي جميع المجموعات العرقية، وقد أظهرت البحوث الإحصائية المحيطة وباء السمنة أن السود غير اللاتينيين لديها أعلى معدل تعديل سن السمنة (49.5٪) مقارنة مع المكسيكي الاميركيين (40.4٪)، وجميع اللاتينيين (39.1٪)، وغير البيض من أصل اسباني (34.3٪) 2. تأثير الاقتصادي للسمنة هو أيضا مصدر قلق متزايد لنظام الرعاية الصحية. في عام 2012، أشارت التقديرات إلى أن التكلفة السنوية للرعاية الطبية للسمنة في الولايات المتحدة في عام 2005 وكانت 190200000000 $، ما يقرب من 21٪ من ميزانية الإنفاق الطبي بشكل عام. للأسف، قدرت السمنة في مرحلة الطفولة ليكون مسؤولا عن 14 مليار دولار في التكاليف الطبية المباشرة وحدها. إحصائيا، تقرر أن متوسط ​​تكلفة الطبية للكان الأفراد يعانون من السمنة 2741 $ أعلى في السنة من تلك التي من دون هذا الاعتلال 3-5. السمنة هي عامل خطر رئيسي لمجموعة متنوعة من الظروف مثل: مرض السكري من النوع 2، دسليبيدميا، وأمراض القلب والأوعية الدموية، والسرطان، واضطرابات الهيكل العظمي العضلات والتهاب مزمن. ويرتبط السمنة بعمق إلى التسبب في متلازمة التمثيل الغذائي والأمراض المزمنة الأخرى 6-8. مع مثل هذه الاتصالات جذرية والسلبية بين السمنة وأمراض المصاحبة الأخرى، والبحث العلمي وركزت الانتباه إلى فهم أفضل للالوباء الحالي والأدوار المتنوعة والمحوري الذي يلعبه الدهنية. تاريخيا، كان يعتبر النسيج الشحمي غير منطقي وكان ينظر كمجرد الأنسجة ملء بسيطة. حاليا، وقد تبين الدهنية للعب العديد من الأدوار الأساسية في وظيفة الجسم في: التمثيل الغذائي، وتنظيم الهرمونات، والتهاب والحماية والعزل 9. وتتكون الأنسجة الدهنية في المقام الأول منالخلايا الشحمية، إلا أنه يحتوي أيضا pericytes، والخلايا البطانية، وحيدات، الضامة والخلايا الجذعية المحفزة 8. يتم توزيع الأنسجة الدهنية في جميع أنحاء الجسم في مستودعات متميزة. مستودعات رئيسية يمكن العثور subdermally، تحت الجلد، العضل، وجدانية 10. وقد ثبت مستودعات الدهنية لمحات المحددة للتمثيل الغذائي مستودع، التي أظهرت قابلية مستودع محددة لالسمنة والاضطرابات ذات الصلة 8. تقليديا، تم تصنيف الأنسجة الدهنية إلى نوعين رئيسيين: الأنسجة الدهنية البيضاء (WAT) والأنسجة الدهنية البنية (BAT)؛ على الرغم من أن الأدب الحديث يدل على الوجود من مجموعة ثالثة معمد برايت أو البيج الدهنية 11. وقد تبين الأنسجة الدهنية لدينا ألوان مختلفة، الأشكال التضاريسية، وظائف التمثيل الغذائي، وميزات البيوكيميائية وأنماط وراثية التعبير 10. الخلايا الشحمية في WAT لديها واحدة، كبيرة قطرات الدهون وكميات مختلفة من الميتوكوندريا. WATوجدت يغلب في المحليات تحت الجلد والحشوية من الجسم. وظائف WAT في المقام الأول كموقع لتخزين الطاقة وحماية الجهاز. الخلايا الشحمية في BAT لها التشكل متعددة المساكن والميتوكوندريا وفيرة. يقع BAT في المقام الأول في الرقبة والأوعية الدموية الكبيرة في الصدر، وكذلك كتف 12. BAT وظائف في المقام الأول في السلوكيات إنفاق الطاقة التي تنظم توليد الحرارة 7. وقد تبين الدهنية برايت أو البيج لمشاركة التشكل مماثلة والتعبير إلى BAT ولكن تم العثور أن نشأت من الخلايا الشحمية البيضاء 11. طريقة جراحية وصفها في هذه المخطوطة يوفر الباحثين مع القدرة على تحليل تأثيرات مختلفة أن عوامل مثل: البيئة، والمستحضرات الصيدلانية، وعلم الوراثة، ويكون على الدهنية. وكذلك يلعب مفيد أو ضار دور الدهنية في المرض والصحة العامة. أيضا، وتوفير وسيلة لتحديد وعزل أنواع مختلفة من الأنسجة الدهنية لالسماح لفهم أفضل للعلاقات البيوكيميائية والاختلاف بين مستودعات. هذا يمكن أن تساعد في تحديد العلاقة بين المكان، وظيفة، وأنواع من الدهون داخل الجسم. هذا الأسلوب هو موضح يحقق ذلك عن طريق توفير وسائل التصور الإجمالي، وتحليل التعبير الجيني، وتحليل البروتين التعبير، والفحص النسيجي، والعزلة من خطوط الخلايا الأولية للدراسات في المختبر. حاليا هناك العديد من المقالات التي توفر نظرة ثاقبة سلوك الأيضي للمستودعات الدهنية المختلفة، وكذلك مواقعها التشريحية. ولكنها لا توفر وسيلة متعمقة حول كيفية ترجمة على وجه التحديد، وتحديد، وعزل هذه المستودعات. يوفر هذا الأسلوب الجراحي تقنية دقيقة التي تسمح لعزل مستودعات متعددة مع كمية ضئيلة من تشريح والتلوث مقارنة مع أساليب أخرى مصممة لعزل واحد أو اثنين من مستودعات 13-14. والهدف من هذا البروتوكول هو توفيرطريقة دقيقة لتحديد وعزل أنواع مختلفة من مستودعات الدهون من مواقع التشريحية متعددة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="730">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:175px;">Company</td>
			<td style="width:125px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:188px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">isoflurane</td>
			<td>Med-Vet International&#160;</td>
			<td>#RXISO-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:125px;">07-678-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">DMEF-12</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">D-6421</td>
			<td>Warm in waterbath before putting on tissue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">2 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:175px;">Midsci</td>
			<td style="width:125px;">MCT-200-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">P5368-10PAK</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

localization, identification, and excision of murine adipose depots

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 reached a staggering sum of $190.2 billion in direct medical costs alone. Obesity is a major risk factor for a wide host of diseases. Historically, little was known regarding adipose and its major and essential functions in the body. Brown and white adipose are the two main types of adipose but current literature has identified a new type of fat called brite or beige adipose. Research has shown that adipose depots have specific metabolic profiles and certain depots allow for a propensity for obesity and other related disorders. The goal of this protocol is to provide researchers the capacity to identify and excise adipose depots that will allow for the analysis of different factorial effects on adipose; as well as the beneficial or detrimental role adipose plays in disease and overall health. Isolation and excision of adipose depots allows investigators to look at gross morphological changes as well as histological changes. The adipose isolated can also be used for molecular studies to evaluate transcriptional and translational change or for in vitro experimentation to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to other published techniques due to the design allowing for isolation of multiple depots with simplicity and minimal contamination.

وقد تحقق تحديد الهوية، وتوطين الدهنية تحت الجلد الإربي، الدهنية البني بين الكتفين، الحشوية الدهنية بربخي (الشكل 1)، وكذلك الدهنية قوس الأبهر ماحول الأوعية، الدهنية الأبهر الصدري، الدهنية الأبهري الكظري والدهنية الأبهر infrarenal (الشكل 2) بنجاح باستخد?...

Watch this Scientific Journal Video about Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots at JoVE.com

Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

نظرا لاتصال جذري والسلبية بين السمنة وأمراض المصاحبة الأخرى، يلعب البحوث حول دور الدهنية في المرض وهناك ما يبرر الصحة العامة. نقدم بروتوكول لعزل واستئصال مستودعات الدهنية مما يسمح لدراسة الدهنية باستخدام في الموقع وطرق المختبر.

الأقلمة، تحديد الهوية، واستئصال مستودعات الفئران الدهنية

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

localization-identification-and-excision-of-murine-adipose-depots

Research

JoVE Journal

Medicine

40.8K Views.  University of Cincinnati College of Medicine.  نظرا لاتصال جذري والسلبية بين السمنة وأمراض المصاحبة الأخرى، يلعب البحوث حول دور الدهنية في المرض وهناك ما يبرر الصحة العامة. نقدم بروتوكول لعزل واستئصال مستودعات الدهنية مما يسمح لدراسة الدهنية باستخدام في الموقع وطرق المختبر. 

Video: Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely related to metabolism and energy expenditure, and its dysfunction is one important contributor for obesity and diabetes. Contrary to previous belief, recent PET/CT imaging studies indicated the BAT depots are still present in human adults. PET imaging clearly shows that BAT has considerably high uptake of 18F-FDG under certain conditions. In this video report, we demonstrate that Cerenkov luminescence imaging (CLI) with 18F-FDG can be used to optically image BAT in small animals. BAT activation is observed after intraperitoneal injection of norepinephrine (NE) and cold treatment, and depression of BAT is induced by long anesthesia. Using multiple-filter Cerenkov luminescence imaging, spectral unmixing and 3D imaging reconstruction are demonstrated. Our results suggest that CLI with 18F-FDG is a practical technique for imaging BAT in small animals, and this technique can be used as a cheap, fast, and alternative imaging tool for BAT research.

In this video report, we show the application of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for interscapular brown adipose tissue in mice under activated and depressed conditions.

كيرينكوف التلألؤ التصوير من الأنسجة الدهنية بين الكتفين براون

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated blood is the aorta. The aorta may become affected in diseases such as atherosclerosis and aneurysm. Researchers investigating these diseases would benefit from direct observation of the aorta to characterize disease progression as well as to evaluate efficacy of potential therapeutics. The goal of this protocol is to describe proper isolation and excision of the aorta to aid investigators researching cardiovascular disease. Isolation and excision of the aorta allows investigators to look at gross morphometric changes as wells as allowing them to preserve and stain the tissue to look at histologic changes if desired. The aorta may be used for molecular studies to evaluate protein and gene expression to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to imaging modalities as they have inherent limitations in technology and cost. Additionally, primary isolated cells from a freshly isolated and excised aorta can allowing researchers to perform further in situ and in vitro assays. The isolation and excision of the aorta has the limitation of having to sacrifice the animal however, in this case the benefits outweigh the harm as it is the most versatile technique in the study of aortic disease.

Pathology of the aorta can lead to severe morbidity and mortality, therefore research of disease progression and potential therapies is warranted. Here, we present a protocol to isolate and excise the murine aorta to aid researchers in their investigation of cardiovascular disease.

عزل واستئصال الفئران الأبهر. تقنية متعددة الاستخدامات في دراسة أمراض القلب والأوعية الدموية

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Human Brown Adipose Tissue Depots Automatically Segmented by Positron Emission Tomography/Computed Tomography and Registered Magnetic Resonance Images

Reliably differentiating brown adipose tissue (BAT) from other tissues using a non-invasive imaging method is an important step toward studying BAT in humans. Detecting BAT is typically confirmed by the uptake of the injected radioactive tracer 18F-Fluorodeoxyglucose (18F-FDG) into adipose tissue depots, as measured by positron emission tomography/computed tomography (PET-CT) scans after exposing the subject to cold stimulus. Fat-water separated magnetic resonance imaging (MRI) has the ability to distinguish BAT without the use of a radioactive tracer. To date, MRI of BAT in adult humans has not been co-registered with cold-activated PET-CT. Therefore, this protocol uses 18F-FDG PET-CT scans to automatically generate a BAT mask, which is then applied to co-registered MRI scans of the same subject. This approach enables measurement of quantitative MRI properties of BAT without manual segmentation. BAT masks are created from two PET-CT scans: after exposure for 2 hr to either thermoneutral (TN) (24 &#176;C) or cold-activated (CA) (17 &#176;C) conditions. The TN and CA PET-CT scans are registered, and the PET standardized uptake and CT Hounsfield values are used to create a mask containing only BAT. CA and TN MRI scans are also acquired on the same subject and registered to the PET-CT scans in order to establish quantitative MRI properties within the automatically defined BAT mask. An advantage of this approach is that the segmentation is completely automated and is based on widely accepted methods for identification of activated BAT (PET-CT). The quantitative MRI properties of BAT established using this protocol can serve as the basis for an MRI-only BAT examination that avoids the radiation associated with PET-CT.

The method presented here uses 18F-Fluorodeoxyglucose (18F-FDG) positron emission tomography/computed tomography (PET-CT) and fat-water separated magnetic resonance imaging (MRI), each scanned following 2 hr exposure to thermoneutral (24 &#176;C) and cold conditions (17 &#176;C) in order to map brown adipose tissue (BAT) in adult human subjects.

الإنسان براون الدهنية مستودعات الأنسجة مجزأة تلقائيا من قبل البوزيترون البوزيتروني / التصوير المقطعي والرنين المغناطيسي مسجل صور

Reliably differentiating brown adipose tissue (BAT) from other tissues using a non-invasive imaging method is an important step toward studying BAT in ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular weight metabolites in tissues of the treated host to achieve long-term survival. The semipermeable membrane allows engrafted encapsulated cells to avoid rejection by the immune system. The encapsulation procedure was designed to enable a controlled release of bioactive compounds, such as insulin, other hormones, and cytokines. Here we describe a method for encapsulation of catabolic cells, which consume lipids for heat production and energy dissipation (thermogenesis) in the intra-abdominal adipose tissue of obese mice. Encapsulation of thermogenic catabolic cells may be potentially applicable to the prevention and treatment of obesity and type 2 diabetes. Another potential application of catabolic cells may include detoxification from alcohols or other toxic metabolites and environmental pollutants.

Here, we present a protocol for encapsulation of catabolic cells, which consume lipids for heat production in intra-abdominal adipose tissue and increase energy dissipation in obese mice.

التغليف حرارة Preadipocytes للزراعة إلى الدهنية مستودعات الأنسجة

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. It is hypothesized that pro-atherogenic mediators released from fat tissues particularly in association with central/visceral adiposity may promote pathogenic vascular changes locally and systemically, and the notion that cardiovascular disease may be the consequence of adipose tissue dysfunction continues to evolve. Here, we describe a unique method of videomicroscopy that involves analysis of vasodilator and vasoconstrictor responses of intact small human arterioles removed from the adipose depot of living human subjects. Videomicroscopy is used to examine functional properties of isolated microvessels in response to pharmacological or physiological stimuli using a pressured system that mimics in vivo conditions. The technique is a useful approach to gain understanding of the pathophysiology and molecular mechanisms that contribute to vascular dysfunction locally within the adipose tissue milieu. Moreover, abnormalities in the adipose tissue microvasculature have also been linked with systemic diseases. We applied this technique to examine depot-specific vascular responses in obese subjects. We assessed endothelium-dependent vasodilation to both increased flow and acetylcholine in adipose arterioles (50 - 350 &#181;m internal diameter, 2 - 3 mm in length) isolated from two different adipose depots during bariatric surgery from the same individual. We demonstrated that arterioles from visceral fat exhibit impaired endothelium-dependent vasodilation compared to vessels isolated from the subcutaneous depot. The findings suggest that the visceral microenvironment is associated with vascular endothelial dysfunction which may be relevant to clinical observation linking increased visceral adiposity to systemic disease mechanisms. The videomicroscopy technique can be used to examine vascular phenotypes from different fat depots as well as compare findings across individuals with different degrees of obesity and metabolic dysfunction. The method can also be used to examine vascular responses longitudinally in response to clinical interventions.

Videomicroscopy systems are used to examine functional properties of isolated adipose tissue arterioles in response to physiological and pharmacological stimuli. This technique can be used to examine microvascular phenotypes in different adipose tissue domains in obese humans.

تقييم الدالة Microvascular الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام فيديوميكروسكوبي

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Vessel-sparing Excision and Primary Anastomosis

Urethroplasty is considered to be the standard treatment for urethral strictures since it provides excellent long-term success rates. For isolated short bulbar or posterior urethral strictures, urethroplasty by excision and primary anastomosis (EPA) is recommended. As EPA only requires the excision of the narrowed segment and the surrounding spongiofibrosis, a full-thickness transection of the corpus spongiosum, as performed in the traditional transecting EPA (tEPA), is usually unnecessary. Jordan et al. introduced the idea of a vessel-sparing approach in 2007, aiming to reduce surgical trauma, especially to the dual arterial blood supply of the urethra, and, thus, potentially reducing the risk of postoperative erectile dysfunction or glans ischemia. This approach could also be beneficial for subsequent urethral interventions such as redo urethroplasty using a free graft, in which a well-vascularized graft bed is imperative. Nevertheless, these potential benefits are only assumptions as prospective studies comparing the functional outcome of both techniques with validated questionnaires are currently lacking. Moreover, vessel-sparing EPA (vsEPA) should at least be able to provide similar surgical outcomes as tEPA. The aim of this paper is to give an elaborate, step-by-step overview of how to manage patients with isolated short bulbar or posterior urethral strictures with vsEPA. The main objective of this manuscript is to outline the surgical technique and to report the representative surgical outcome. A total of 117 patients were managed according to the described protocol. The analysis was performed on the entire patient cohort and on the bulbar (n = 91) and posterior (n = 26) vsEPA group separately. Success rates were 93.4% and 88.5% for the bulbar and posterior vsEPA, respectively. To conclude, vsEPA, as outlined in the protocol, provides excellent success rates with low complication rates for isolated short bulbar and posterior urethral strictures.

Here, we present an elaborate and efficient protocol to treat isolated short bulbar or posterior urethral strictures with vessel-sparing excision and primary anastomosis.

الختان تجنيب سفينة وملامسة الأولية

Urethroplasty is considered to be the standard treatment for urethral strictures since it provides excellent long-term success rates. For isolated short ...

Electromagnetic Navigation Transthoracic Nodule Localization for Minimally Invasive Thoracic Surgery

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or excision. Many of these nodules are identified and excised via minimally invasive thoracic surgery; however, subcentimeter and subsolid nodules are frequently difficult to identify intra-operatively. This can be mitigated by the use of electromagnetic transthoracic needle localization. This protocol delineates the step-by-step process of electromagnetic localization from the pre-operative period to the postoperative period and is an adaptation of the electromagnetically guided percutaneous biopsy previously described by Arias et al. Pre-operative steps include obtaining a same day CT followed by the generation of a three-dimensional virtual map of the lung. From this map, the target lesion(s) and an entry site are chosen. In the operating room, the virtual reconstruction of the lung is then calibrated with the patient and the electromagnetic navigation platform. The patient is then sedated, intubated, and placed in the lateral decubitus position. Using a sterile technique and visualization from multiple views, the needle is inserted into the chest wall at the prechosen skin entry site and driven down to the target lesion. Dye is then injected into the lesion and, then, continuously during needle withdrawal, creating a tract for visualization intra-operatively. This method has many potential benefits when compared to the CT-guided localization, including a decreased radiation exposure and decreased time between the dye injection and the surgery. Dye diffusion from the pathway occurs over time, thereby limiting intra-operative nodule identification. By decreasing the time to surgery, there is a decrease in wait time for the patient, and less time for dye diffusion to occur, resulting in an improvement in nodule localization. When compared to electromagnetic bronchoscopy, airway architecture is no longer a limitation as the target nodule is accessed via a transparenchymal approach. Details of this procedure are described in a step-by-step fashion.

Presented here is a protocol for lung nodule localization using dye marking via electromagnetically navigated transthoracic needle access. The technique described here can be accomplished in the peri-operative period to optimize nodule localization and to successful resection when performing minimally invasive thoracic surgery.

الملاحة الكهرومغناطيسية توطين العقيدات عبر الصدر لجراحة الصدر طفيفة التوغل

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal cancer, inflammatory bowel disease, and Parkinson&#8217;s disease. To study the function of the appendix, a gut disease-associated murine appendectomy model has been established and its step-by-step protocol is described here. This report introduces a facile protocol for caecal patch removal in mice followed by the chemical induction of chronic colitis-associated colorectal cancer using a combination of dextran sulfate sodium (DSS) and azoxymethane (AOM). IgA specific cells and IgA concentration were significantly reduced upon removal of the caecal patch in male C57BL/6 mice&#160;compared to those in the sham group. Simultaneously administering 2% DSS and AOM resulted in nearly 80% mice survival in both sham and appendectomy groups without significant body weight loss. Histological results confirmed colonic inflammation and different degrees of adenocarcinoma. This model can be used for the study of the functional role of the appendix in maintaining gut microbiota homeostasis and pathogenesis of gut colitis and malignancies, as well as for the potential development of drug targeting therapies.

The presented protocol describes a facile surgical removal of the appendix (caecal patch) in a mouse followed by the induction of inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer. This murine appendectomy model enables investigation of the biological role of the appendix in the pathogenesis of human gastrointestinal disease.

نموذج استئصال الزائدة الدودية Murine من التهاب القولون المزمن المرتبطة سرطان القولون والمستقيم عن طريق توطين دقيق من التصحيح Caecal

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for islet transplantation in rodent models. However, the tight kidney capsule limits the transplantation of sufficient islets in large animals and humans. The inguinal subcutaneous white adipose tissue (ISWAT), a new subcutaneous space, was found to be a potentially valuable site for islet transplantation. This site has better blood supply than other subcutaneous spaces. Moreover, the ISWAT accommodates a larger islet mass than the kidney capsule, and transplantation into it is simple. This manuscript describes the procedure of mouse islet isolation and transplantation in the ISWAT site of syngeneic diabetic mouse recipients. Using this protocol, murine pancreatic islets were isolated by standard collagenase digestion and a basement membrane matrix hydrogel was used for fixing the purified islets in the ISWAT site. The blood glucose levels of the recipient mice were monitored for more than 100 days. Islet grafts were retrieved at day 100 after transplantation for histological analysis. The protocol for islet transplantation in the ISWAT site described in this manuscript is simple and effective.

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue ISWAT Transplantation Model of Murine Islets

In this protocol, a method of murine islet isolation and transplantation into the inguinal subcutaneous white adipose tissue is described. Isolated syngeneic murine islets are transplanted into a murine recipient using a basement membrane hydrogel. The blood glucose level of the recipients is monitored, and histology analysis of the islet grafts is performed.

الاعلية الجلدية الجلدية الأنسجة الدهنية البيضاء (ISWAT) نموذج زرع الجزر المورين

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...

بروتوكول لعزل وزراعة وتحديد الخلايا المتخصصة الحوافية البشرية

Isolation and Identification of Limbal Niche Cells

Here we report a standard procedure for the isolation and identification of limbal niche cells (LNCs). Limbus tissue obtained from an eye bank was used for LNCs isolation. The tissue was divided into 12 pieces under aseptic conditions and digested for 18 h at 37 &#176;C in the cell culture incubator using collagenase A to obtain cell clusters with LNCs and limbal&#160;epithelial progenitor cells. The cell clusters were further digested for 15 min at 37 &#176;C using 0.25% trypsin-EDTA to obtain single cells and then cultured in modified embryonic stem cell medium (MESCM) on a plastic surface coated with 5% Matrigel. Cells were passaged upon 70% confluence, and LNCs were identified using immunofluorescence, real-time quantitative PCR (qPCR), and flow cytometry. Primary LNCs were isolated and passaged more than 12 times. The proliferation activity of LNCs from P4 to P6 was the highest. LNCs expressed higher stem cell markers than BMMSCs (SCF, Nestin, Rex1, SSEA4, CD73, CD90, MSX1, P75NTR, and PDGFR&#946;). Furthermore, results showed that P4 LNCs uniformly expressed VIM, CD90, CD105, and PDGFR&#946;, but not Pan-CK, which could be used as a marker for the identification of LNCs. Flow cytometric analysis showed that approximately 95%, 97%, 92%, and 11% of LNCs expressed CD73, CD90, CD105, and SCF respectively, while they were&#160;68%, 99%, 20%, and 3% in&#160;BMMSCs. The standard process for LNC&#160;isolation and identification could provide&#160;a reliable laboratory basis for the widespread use of LNCs.

تسليط الضوء على المؤلف: توحيد عزل وتوصيف الخلايا المتخصصة في الأطراف (LNC) لدعم أبحاث LNC على نطاق واسع 

Here, we present a protocol to isolate and identify the human limbal niche cells.

عزل وتحديد الخلايا المتخصصة في الحوفي

Here we report a standard procedure for the isolation and identification of limbal niche cells (LNCs). Limbus tissue obtained from an eye bank was used ...