تم توفير التمويل لهذا العمل من ORWH SCOR P50 DK064540، RO1 DK 051406، RO1 AI 108749-01، F32 DK 101171، وF32 DK 104516-01.

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

اكتسب المجتمع غير معقدة UTI هو عدوى شائعة ومكلفة يمثل عدة ملايين من مرة الرعاية الصحية الأولية في كل عام 46. بالإضافة إلى ذلك، CAUTIs هي العدوى المكتسبة الرعاية الصحية الشائعة التي أصبحت مكلفة لمقدمي الرعاية الصحية باعتبارها مراكز الرعاية الصحية والخدمات الطبية لل?...

An erratum was issued for: <a href="https://www.jove.com/video/52892/establishment-and-characterization-of-uti-and-cauti-in-a-mouse-model">Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model</a>. The Protocol section has been updated.
The ethics statement has been updated from:
Ethics statement: The Washington University Animal Studies Committee approved all mouse infections and procedures as part of protocol number 20120216, which was approved 01/11/2013 and expires 01/11/2016. Overall care of the animals was consistent with The guide for the Care and Use of Laboratory Animals from the National Research Council and the USDA Animal Care Resource Guide. Euthanasia procedures are consistent with the &#8220;AVMA guidelines for the Euthanasia of Animals 2013 edition.&#8221;
to:
Ethics statement: The Washington University Animal Studies Committee approved all mouse infections and procedures as part of protocol number 20150226, which expires 12/10/2018. Overall care of the animals was consistent with The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals from the National Research Council and the USDA Animal Care Resource Guide. Euthanasia procedures are consistent with the &#8220;AVMA guidelines for the Euthanasia of Animals 2013 edition.&#8221;
Step 3 has been updated from:
3. Bacterial Inoculation
<ol>
	<li>Clean the workstation with 70% ethanol and cover area with absorbent paper (or use sterile flow hood).</li>
	<li>Draw up to 0.9 ml of the prepared bacterial inoculum into a 1 ml (TB) syringe (remove air bubbles). Attach a prepared sterile inoculation needle with PE10 tubing, onto the syringe containing the inoculum, then sterilely trim the polyethylene tubing. 
	NOTE: Leave 1 mm of tubing above the tip of the needle to avoid puncturing the bladder.</li>
	<li>Cut a 1 inch square piece of parafilm and put a dab of surgical lubricant (approximately the size of a dime) on top.</li>
	<li>Anesthetize female C3H/HeN mice by putting them in a 32 ounce glass jar containing a tea-infuser ball with cotton balls soaked with 3 ml of isoflurane or vaporizer chamber (following manufactures protocol) until unconscious but still breathing normally (1 breath/sec). 
	NOTE: Some IACUC committees do not approve the use of a jar or vaporizer. Please follow the indication of the IACUC committee of your institution. 
	NOTE: If glass jar with tea-ball and/or nose cone with isoflurane-soakd cotton balls are used, the animal must be carefully observed to avoid anesthetic overdose and death. The advantage of using a vaporizer and anesthesia chamber is that it provides controlled isoflurane administration that avoids accidental overdoses. CAUTION: Isoflurane is an inhalation anesthetic. Use in a well-ventilated area and minimize inhalation.</li>
	<li>Remove the mouse from the jar/vaporizer and place it on its back on a paper towel and spread the legs.</li>
	<li>Cover the nose of the mouse with a nose cone (a tube connected to the vaporizer that provides a controlled isoflurance dose that comes equipped on some vaporizer units) or 50 ml conical tube with a cotton ball containing a small amount (approximately 1-2 ml) of isoflurane.</li>
	<li>Gently palpitate the bladder to induce urination and ensure a voided bladder. Wipe the periurethral area with 100% ethanol wipe. Dab the inoculation needle/syringe, point first, into the surgical lubricant.</li>
	<li>Inoculate each mouse with 50 &#181;l of the bacteria solution by inserting the inoculation needle transurethrally, approximately 12 mm, and pressing down on the syringe plunger gently to dispense the inoculum into the bladder gently (10 &#181;l/sec). Remove the inoculation needle from the mouse. 
	NOTE: Immediate return of inoculum at the urethral opening when beginning to inoculate indicates improper or incomplete insertion of the needle.</li>
	<li>Remove the mouse from nose cone and return it to its cage. Repeat steps 3.3-3.8 for each mouse. When/if switching inoculum conditions/strains, dispose of the syringe and inoculation needle in an approved sharps container and start again step 3.2.&#160;&#160; 
	NOTE: Inoculation with uropathogenic organisms generally does not cause severe pain symptoms. However, in rare instances, administering large doses of pathogens may cause fever, reduction in food and water intake and abnormal behavior. Animal health should be monitored throughout the experiment. If overt pain symptoms are notice, an analgesic, such as Buprenorphine (0.05&#8722;0.1 mg/kg given subcutaneously), can be applied. Procedures should be in accordance with each institution&#8217;s IACUC.</li>
</ol>
to:
3. Bacterial Inoculation
<ol>
	<li>Clean the workstation with 70% ethanol and cover area with absorbent paper (or use sterile flow hood).</li>
	<li>Draw up to 0.9 ml of the prepared bacterial inoculum into a 1 ml (TB) syringe (remove air bubbles). Attach a prepared sterile inoculation needle with PE10 tubing, onto the syringe containing the inoculum, then sterilely trim the polyethylene tubing. 
	NOTE: Leave 1 mm of tubing above the tip of the needle to avoid puncturing the bladder.</li>
	<li>Cut a 1 inch square piece of parafilm and put a dab of surgical lubricant (approximately the size of a dime) on top.</li>
	<li>Anesthetize female C3H/HeN mice by putting them in a vaporizer chamber (following manufactures protocol) until unconscious but still breathing normally (1 breath/sec). 
	NOTE: Some IACUC committees do not approve the use of a vaporizer. Please follow the indication of the IACUC committee of your institution. 
	CAUTION: Isoflurane is an inhalation anesthetic. Use in a well-ventilated area and minimize inhalation.</li>
	<li>Remove the mouse from the vaporizer and place it on its back on a paper towel and spread the legs.</li>
	<li>Cover the nose of the mouse with a nose cone (a tube connected to the vaporizer that provides a controlled isoflurance dose that comes equipped on some vaporizer units) to maintain anesthetization.</li>
	<li>Gently palpitate the bladder to induce urination and ensure a voided bladder. Wipe the periurethral area with 100% ethanol wipe. Dab the inoculation needle/syringe, point first, into the surgical lubricant.</li>
	<li>Inoculate each mouse with 50 &#181;l of the bacteria solution by inserting the inoculation needle transurethrally, approximately 12 mm, and pressing down on the syringe plunger gently to dispense the inoculum into the bladder gently (10 &#181;l/sec). Remove the inoculation needle from the mouse. 
	NOTE: Immediate return of inoculum at the urethral opening when beginning to inoculate indicates improper or incomplete insertion of the needle.</li>
	<li>Remove the mouse from nose cone and return it to its cage. Repeat steps 3.3-3.8 for each mouse. When/if switching inoculum conditions/strains, dispose of the syringe and inoculation needle in an approved sharps container and start again step 3.2.&#160;&#160; 
	NOTE: Inoculation with uropathogenic organisms generally does not cause severe pain symptoms. However, in rare instances, administering large doses of pathogens may cause fever, reduction in food and water intake and abnormal behavior. Animal health should be monitored throughout the experiment. If overt pain symptoms are notice, an analgesic, such as Buprenorphine (0.05&#8722;0.1 mg/kg given subcutaneously), can be applied. Procedures should be in accordance with each institution&#8217;s IACUC.</li>
</ol>

An erratum was issued for: <a href="https://www.jove.com/video/52892/establishment-and-characterization-of-uti-and-cauti-in-a-mouse-model">Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model</a>. The Protocol section has been updated.

Erratum: Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

التهابات المسالك البولية (عدوى المسالك البولية) هي واحدة من الالتهابات البكتيرية الأكثر شيوعا ويمكن تقسيمها إلى فئتين استنادا إلى آلية الاستحواذ والمجتمع والمكتسبة بالمستشفيات المكتسبة UTI. وقد أظهرت عدوى المسالك البولية غالبا ما تحدث في النساء والدراسات الأصحاء المكتسبة من المجتمع وأن ما يقرب من 50٪ من النساء واحد على الأقل UTI في حياتهم 1. بالإضافة إلى ذلك، تكرار مشكلة كبيرة. وقالت امرأة لديها العدوى الحادة الأولي لديه فرصة 25-40٪ من وجود عدوى الثانية في غضون ستة أشهر رغم ذلك مناسبا العلاج بالمضادات الحيوية والعديد من النساء ما زلن أن يكون تكرار متكررة 2. البكتيريا التي تسبب هذه الالتهابات أصبحت أيضا المضادات الحيوية على نحو متزايد مقاومة المزيد من بروتوكولات العلاج التباس 3-6. UTI تؤثر على ملايين الأشخاص في كل عام تكلف ما يقرب من 2.5 مليار دولار في النفقات المتعلقة بالرعاية الصحية في الولايات المتحدة، مما يؤكد تأثير وانتشار المرضاكتسبت 1،7 .Nosocomial عدوى المسالك البولية ترتبط أساسا مع وجود أجسام غريبة مثل القسطرة سكنى. المرتبطة القسطرة البولية (CAUTI) تبقى المكتسبة بالمستشفيات الأكثر شيوعا المكتسبة UTI، وهو ما يمثل ~ 70-80٪ من هذه الإصابات 8. وعلاوة على ذلك، يرتبط CAUTI مع زيادة معدلات الاعتلال والوفيات وهذا هو السبب الأكثر شيوعا للالتهابات مجرى الدم الثانوية 9. ويعتقد UPEC المجتمع المرتبطة المكتسبة عدوى المسالك البولية أن يكون ناجما عن إدخال البكتيريا إلى المثانة من الخزانات في الجهاز الهضمي عن طريق التلاعب الميكانيكية أثناء الجماع الجنسي، وسوء النظافة أو غيرها من ديناميات السكان الميكروبية بين مضيف آخر الكوات 10. مرة واحدة داخل المثانة، UPEC توظيف العديد من عوامل الفوعة، بما في ذلك كبسولة، ونظم الحصول على الحديد، والسموم، البلازميد الفوعة، tRNAs والجزر المرضية وعوامل الاستعمار التي ثبت أنها تلعب دورا في التسبب &lt;سوب&gt; 11-14. حاسمة لإنشاء UPEC الاستعمار، UPEC أيضا ترميز أنواع متعددة من كوصي اللصق فاتحة الطريق (CUP) الشعرة التي تعترف مستقبلات مع خصوصية الفراغية 15. نوع 1 الشعرة، يميل مع adhesin FimH، يتم التعبير من قبل UPEC وربط uroplakins 16 و α-1، β-3 integrins 17، والتي يتم التعبير عنها على سطح اللمعية كل قربة الإنسان والفأر 18 mannosylated. هذه التفاعلات بوساطة FimH تسهل الاستعمار الجرثومي وغزو الخلايا الظهارية السطحية 19،20. مرة واحدة داخل الخلية، يمكن UPEC الهروب إلى السيتوبلازم حيث بكتيريا واحدة يمكن تقسيم بسرعة لتشكيل المجتمع البكتيريا داخل الخلايا (IBC)، التي تقوم عليها النضج، يمكن أن تحتوي على البكتيريا ~ 10 4 21. وقد تجلى تشكيل IBC في لا يقل عن ستة سلالات مختلفة الماوس، C3H / الدجاجة، C3H / HEJ، C57BL / 6، CBA، FVB / NJ وBALB / ج، ومع طائفة واسعة من مختلف تعميم التعليم الابتدائيسلالات C وغيرها المعوية 22-24. لكن الاختلافات الزمنية والمكانية لتشكيل IBC يمكن أن تختلف تبعا لخلفية الماوس والضغط اصابة UPEC. في C3H / الفئران دجاجة مصابة UPEC تنميط سلالات UTI89 أو تشكيل CFT073، IBC يمكن تصور الكتل الحيوية كما صغيرة من البكتيريا في وقت مبكر من 3 HPI (عدوى آخر ساعة). استمر هذا المجتمع لتوسيع ويصل إلى &quot;نقطة الوسط&quot; للتنمية حوالي 6 HPI عندما تحتل قضيب على شكل بكتيريا نسبة كبيرة من مساحة هيولي من خلايا مظلة سطحية متباينة عضال هذه أوائل شكل الحاويات الوسيطة بطريقة متزامن نسبيا مع الأغلبية التي تظهر أبعاد مماثلة والأشكال التضاريسية. ~ 8 HPI البكتيريا في التغيير IBC من العصيات لمكورات التشكل. الحاويات الوسيطة هي عابرة في الطبيعة. وبالتالي، IBC النضج 12-18 النتائج HPI في التوسع المستمر للسكان البكتيريا، تليها filamentation وتشتيت للخروج من واي الخليةث انتشار لاحق إلى الخلايا المجاورة 23. وبالتالي، فإن مكانة IBC يسمح لنمو البكتيريا السريع في بيئة محمية من المضيف الاستجابات المناعية والمضادات الحيوية 25. ويلاحظ في مراحل متميزة من العدوى UPEC التي ينظر إليها في الفئران كما في البشر، مثل الحاويات الوسيطة وfilamentation، ودعم نموذج الفأر من UTI كأداة المفيدة التي يمكن استخدامها لنموذج UTI في البشر 22،26-28. في حين أن الغالبية العظمى من النساء يعانين من التهاب المسالك البولية في حياتهم، ونتيجة هذه الالتهابات يمكن أن تتراوح من الإصابة الذاتي الحد الحاد مع عدم وجود تكرار لالتهاب المثانة المتكرر بشكل متكرر. وعلاوة على ذلك، فقد أظهرت الدراسات حدوث عائلي قوي من التهاب المسالك البولية، مما يشير إلى يساهم عنصر وراثي للحساسية UTI 29. لقد وجدنا أن نتائج UTI اختلاف ينظر في عيادات يمكن يتجلى في نتائج مختلفة من العدوى UPEC التجريبية بين السلالات الفطرية الماوس 30. على سبيل المثال، C3H / الدجاجة، CBAوالفئران DBA، وC3H / HeOuJ عرضة، بطريقة تعتمد على الجرعة المعدية، ليدوم طويلا، التهاب المثانة المزمن يتميز المستمرة، والبكتيريا عيار عالية (&gt; 10 4 مستعمرة (كفو) / مل)، عيار عالية بكتيريا أعباء المثانة بتضحيات&gt; 4 أسابيع بعد الإصابة (WPI)، والتهاب مزمن، ونخر الظهارة البولية. هذه الفئران أيضا عرض مستويات المصل مرتفعة من IL-6، G-CSF، KC، وIL-5 في HPI 24 الأولى التي تكون بمثابة المؤشرات الحيوية لتطوير التهاب المثانة المزمن. هذا قد يمثل بدقة المسار الطبيعي للUTI في بعض النساء، حيث أظهرت الدراسات همي أن نسبة كبيرة من النساء تعاني سوف UTI محافظة على مستويات عالية من البكتيريا في البول لعدة أسابيع بعد ظهور الأعراض الأولى من التهاب المثانة إذا لم تعط العلاج بالمضادات الحيوية 31 (32 عاما). وعلاوة على ذلك، وذلك باستخدام الفئران C3H / الدجاجة، وجدنا أن تاريخ من التهاب المثانة المزمن هو عامل خطر كبير للعدوى المتكررة الشديدة اللاحقة. المتكررة UTI هو الأكثر سيالمظاهر السريرية gnificant من التهاب المسالك البولية والماوس C3H / الدجاجة حاليا النموذج الوحيد الذي يلخص درس تهيء زادت بعد التعرض السابق. ولخص A نتائج UTI الثانية في C57BL / 6 الفئران حيث الإصابة UPEC الحاد محدودة ذاتيا، مع قرار من التهاب المثانة والجرثومية غضون ما يقرب من أسبوع. ومن المثير للاهتمام، في هذا النموذج، UPEC تشكيل بسهولة الخزانات داخل الخلايا هادئة داخل أنسجة المثانة التي UPEC قادرون على الخروج من حالة سبات على بدء لUTI نشط، ويحتمل أن تشرح آلية واحدة لنفس السلالة UTI المتكرر في البشر 33 و 34. بالإضافة إلى التأثيرات الوراثية على UTI الحساسية، وإدخال قسطرة في المثانة يزيد كثيرا من احتمال وجود العدوى، وكذلك زيادة نطاق من البكتيريا قادرة على أن تسبب عدوى. وقد ثبت أن القسطرة البولية الإنسان تسبب النسيجية والتغيرات المناعية في المثانة بسبب الإجهاد الميكانيكي الذي يؤدي إلى الاستجابة الالتهابية قوية، تقشير، وذمة من الصفيحة المخصوصة وsubmucusa، ترقق الظهارة البولية، والغشاء المخاطي آفة من الظهارة البولية والكلى 35،36. بالإضافة إلى ذلك، توفر القسطرة سطح لالتصاق البكتيريا وبالتالي خلق بيئة التي تستخدمها العديد من الأنواع أن يسبب CAUTI. في حين UPEC لا تزال مساهما رئيسيا، وحسابات المعوية البرازية عن 15٪ من هذه CAUTI 37. E. البرازية تزداد مقاومة للمضادات الحيوية مع فانكومايسين مقاومة ظهور، مما يشكل مشكلة صحية خطيرة 38. E. البرازية تمتلك عوامل الفوعة عديدة من بينها السموم وadhesins اللازمة لمرفق لكل من القسطرة وظهارة 38. خلال القسطرة البولية، والمضيف هو عرضة للميكروبات التصاق والضرب ونشر في المسالك البولية 39،40. E. faecaالدعاوى تشكل الأغشية الحيوية على القسطرة كجزء من آلية لتستمر في المثانة وتنشر على الكلى، والذي يرد في الماوس CAUTI نموذج 41. في الآونة الأخيرة، وقد تبين أنه خلال القسطرة البولية، ويتم تحريرها الفيبرينوجين (FG) في المثانة كجزء من الاستجابة الالتهابية. FG يتراكم في المثانة، والمعاطف القسطرة، كما أنه ضروري لE. البرازية تشكيل بيوفيلم، يعمل بمثابة سقالة المرفق. في نموذج C57BL / 6 الماوس من CAUTI، اكتشفنا أن E. تشكيل بيوفيلم البرازية على القسطرة، وبالتالي استمرار في المثانة، وكان يعتمد على شعرة EBP، وتحديدا في EbpA طرف adhesin. وجدنا أن المجال N-محطة من EbpA يربط خصيصا لFG طلاء القسطرة. بالإضافة إلى ذلك، فقد وجد أن E. البرازية تستخدم FG كمصدر الأيض خلال العدوى، مما يعزز تشكيل بيوفيلم 42. وقد أثبتت نماذج الماوس حاسم لالفضوليةtanding وكذلك التنبؤ المظاهر السريرية للالتهاب المسالك البولية وCAUTI 41. في هذه المقالة أن نبرهن إعداد اللقاح من التهاب المثانة UPEC عزل UTI89 والتلقيح عبر الاحليل من الفئران C3H / الدجاجة. بالإضافة إلى ذلك، علينا أن نظهر بروتوكول لإدخال القسطرة في C57BL / 6 الفئران والتلقيح من E. البرازية OG1RF سلالة. كل من هذه الأساليب تؤدي إلى التهاب المسالك البولية ثابت وموثوق بها أو CAUTI في الفئران. نحن أيضا عرض التقنيات المستخدمة لمراقبة تشكيل IBC خلال التهاب المثانة الحاد وجمع البول لتحليل التهاب المثانة المزمن أو المتكرر. وقد استخدمت الفئران C3H / الدجاجة لدراسة جوانب UPEC المرضية بما في ذلك الغزو الأولي البكتيرية، وتشكيل IBC، filamentation وتطوير التهاب المثانة المزمن 23،33،43. كما درست هذه المعايير الفوعة في مجموعة متنوعة من الخلفيات الماوس الأخرى 22،33. لCAUTI، وC57BL / 6 النموذج يسمح لزرع جسم غريب في المثانة مع زملاء البكتيرية لاحقاlonization، والتي لا يمكن الحفاظ عليه لمدة 7 أيام بعد الإصابة 41. كانت هذه نماذج مفيدة لتقييم آليات الفوعة البكتيرية، والاستجابات المضيفة لالتهاب المسالك البولية وآليات لتخريب الردود المضيف، والكثير منها تم تلخيصها في وقت لاحق أو التي لوحظت في البشر السريري.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Material for catheter and needle preparation:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30ga needles</td>
			<td>BD Precision Glide</td>
			<td>305106</td>
			<td>30Gx &#189; (0.3 mm x 13mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE10 polyethylene tubing</td>
			<td>BD</td>
			<td>427400</td>
			<td>Inside diameter -0.011 in (0.28 mm); outside diameter &#8211; 0.024 in (0.61 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaSIL 025 platinum cured silicon tubing</td>
			<td>Braintree Scientific, Inc</td>
			<td>SIL 025</td>
			<td>inside diameter-0.012 x outside diameter 0.025, 25 ft coil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Material for infections:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflourane &#8211; Isothesia</td>
			<td>Butler Schein</td>
			<td>29405</td>
			<td>250 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear Glass Straight-Sided Jar</td>
			<td>Kimble Chase</td>
			<td>5413289V 21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Tea Infuser</td>
			<td>Schefs-Amazon</td>
			<td></td>
			<td>Premium Loose Leaf Tea Infuser By Schefs - Stainless Steel - Large Capacity -</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-sterile cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-456-880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml Falcon tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotec 3 -vaporizer</td>
			<td>Ohmeda</td>
			<td>1224478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear punch</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-812-201</td>
			<td>(when necessary)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Betadine solution</td>
			<td></td>
			<td>10% Povidie-iodine topical solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-tips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-037-924</td>
			<td>6 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diapers for bench</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>14206 63</td>
			<td>Absorbent Underpads (20&#8221;X36&#8221;mats)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant</td>
			<td>Surgilube</td>
			<td>0281-0205-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissor</td>
			<td>Fine Science tools, INC</td>
			<td>14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps</td>
			<td>Fine Science tools, INC</td>
			<td>11018-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>Tuberculin slip tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM996</td>
			<td>4 in x 125 FT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf rack</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>05-541-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td>MIDSCI</td>
			<td>AVX-T-17-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harvesting catheters, bladders and kidneys:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homogenizer</td>
			<td>PRO Scientific INC</td>
			<td>Bio-Gen Pro 200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml polypropylene round-bottom tube</td>
			<td>BD</td>
			<td>352063</td>
			<td>for organ homogenization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper towel</td>
			<td>Georgia-Pacific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Pharmco-AAPER</td>
			<td>11100020S</td>
			<td>200 proof</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Costar&#8482; Clear Polystyrene 96-Well Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1X Phosphate sodium saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BRANSONIC Ultrasonic cleaner 1210</td>
			<td>Branson Ultrasonics Corporation</td>
			<td>1210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBC materials:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well tissue culture test plate</td>
			<td>Techno Plastic Products</td>
			<td>92006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>3097358-1004</td>
			<td>Silicone Elastomer Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15520-034</td>
			<td>Ultrapure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N, N-Dimethylformamide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4551</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2 (Magnesium chloride)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M8266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium deoxycholate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D6750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonidet-P40</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11754599001</td>
			<td>Octylphenolpoly(ethyleneglycolether)n</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hexacyanoferrate(II) trihydrate (K-ferrOcyanide)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P3289</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hexacyanoferrate(III) (K-ferrIcyanide)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>60299</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment and characterization of uti and cauti in a mouse model

التهابات المسالك البولية (UTI) واسعة الانتشار، وهو سبب مهم للمراضة وتزداد مقاومة للعلاج بالمضادات الحيوية. تعاني النساء بشكل غير متناسب UTI: سوف 50٪ من جميع النساء لديهم التهاب المسالك البولية في حياتهم. بالإضافة إلى ذلك، 20-40٪ من هؤلاء النساء الذين لديهم وعلى UTI الأولي تعاني من تكرار مع بعض الذين يعانون تكرار المتكررة مع تدهور خطير في نوعية الحياة والألم وعدم الراحة، وتعطل الأنشطة اليومية، وزيادة تكاليف الرعاية الصحية، وقلة الخيارات العلاجية الأخرى من العلاج الوقائي بالمضادات الحيوية على المدى الطويل. Uropathogenic الإشريكية القولونية (UPEC) هو المسبب الرئيسي للمجتمع المكتسبة UTI. المرتبطة القسطرة UTI (CAUTI) هو الأكثر شيوعا المستشفى العدوى المكتسبة المحاسبة للحصول على مليون الحوادث في الولايات المتحدة سنويا، وتكاليف الرعاية الصحية الهائلة. في حين UPEC هو أيضا السبب الرئيسي لCAUTI، العوامل المسببة الآخرين من أهمية متزايدة بما في ذلك المعويةالبرازية. نحن هنا استخدام نموذجين الماوس راسخة أن ألخص العديد من الخصائص السريرية لهذه الأمراض التي تصيب الإنسان. لUTI، وهذا نموذج C3H / الدجاجة يلخص العديد من الميزات من UPEC الفوعة لوحظ في البشر بما في ذلك ردود المضيفة، وتشكيل IBC وfilamentation. لCAUTI، وهذا نموذج باستخدام C57BL / 6 الفئران، التي تحتفظ زرع المثانة قسطرة، وقد تبين أن تكون عرضة للE. البرازية عدوى المثانة. وتستخدم هذه النماذج التمثيلية للحصول على أفكار جديدة لفتا إلى التسبب في مرض التهاب المسالك البولية، مما يؤدي إلى تطوير علاجات جديدة واستراتيجيات إدارة أو منع.

نماذج من داخل المثانة غير معقدة والقسطرة UTI المرتبطة توفر منصات مرنة لتوضيح الآليات الجزيئية المرضية البكتيرية، وتأثير هذه الأمراض على الأنسجة المضيف، وتطوير واختبار نهج جديدة لإدارة هذه العدوى المشتركة والمكلفة. اعتمادا على سلالة الماوس والممرض، التلقيح إينترفس?...

Watch this Scientific Journal Video about Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model at JoVE.com

Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

The ability to model urinary tract infections (UTI) is crucial in order to be able to understand bacterial pathogenesis and spawn the development of novel therapeutics. This work&#8217;s goal is to demonstrate mouse models of experimental UTI and catheter associated UTI that recapitulate and predict findings seen in humans.

إنشاء وتوصيف UTI وCAUTI في نموذج الفأر

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. ...

establishment-and-characterization-of-uti-and-cauti-in-a-mouse-model

Research

JoVE Journal

Medicine

19.8K Views.  Washington University School of Medicine. The ability to model urinary tract infections (UTI) is crucial in order to be able to understand bacterial pathogenesis and spawn the development of novel therapeutics. This work’s goal is to demonstrate mouse models of experimental UTI and catheter associated UTI that recapitulate and predict findings seen in humans.

Video: Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

A Mouse Model of in Utero Transplantation

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus. For example, in utero transplantation (IUT) of hematopoietic stem cells has been used to successfully treat patients with severe combined immunodeficiency.1,2 In several other conditions, however, IUT has been attempted without success.3 Given these mixed results, the availability of an efficient non-human model to study the biological sequelae of stem cell transplantation and gene therapy is critical to advance this field. We and others have used the mouse model of IUT to study factors affecting successful engraftment of in utero transplanted hematopoietic stem cells in both wild-type mice4-7 and those with genetic diseases.8,9 The fetal environment also offers considerable advantages for the success of in utero gene therapy. For example, the delivery of adenoviral10, adeno-associated viral10, retroviral11, and lentiviral vectors12,13 into the fetus has resulted in the transduction of multiple organs distant from the site of injection with long-term gene expression. in utero gene therapy may therefore be considered as a possible treatment strategy for single gene disorders such as muscular dystrophy or cystic fibrosis. Another potential advantage of IUT is the ability to induce immune tolerance to a specific antigen. As seen in mice with hemophilia, the introduction of Factor IX early in development results in tolerance to this protein.14 
In addition to its use in investigating potential human therapies, the mouse model of IUT can be a powerful tool to study basic questions in developmental and stem cell biology. For example, one can deliver various small molecules to induce or inhibit specific gene expression at defined gestational stages and manipulate developmental pathways. The impact of these alterations can be assessed at various timepoints after the initial transplantation. Furthermore, one can transplant pluripotent or lineage specific progenitor cells into the fetal environment to study stem cell differentiation in a non-irradiated and unperturbed host environment.
The mouse model of IUT has already provided numerous insights within the fields of immunology, and developmental and stem cell biology. In this video-based protocol, we describe a step-by-step approach to performing IUT in mouse fetuses and outline the critical steps and potential pitfalls of this technique.

A Mouse Model of in Utero Transplantation

The mouse model of in utero transplantation is a versatile tool that can be used to study the potential clinical applications of stem cell transplantation and gene therapy in the fetus. In this protocol, we present a general approach to performing this technique

نموذج الفأر من في الرحم زراعة

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus.  For example, in ...

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient management strategies. Orthotopic mouse models of oral cancer have been developed to facilitate the study of factors that impact invasion and serve as model system for evaluating anti-tumor therapeutics. In these systems, visualization of disseminated tumor cells within oral cavity tissues has typically been conducted by either conventional histology or with in vivo bioluminescent methods. A primary drawback of these techniques is the inherent inability to accurately visualize and quantify early tumor cell invasion arising from the primary site in three dimensions. Here we describe a protocol that combines an established model for squamous cell carcinoma of the tongue (SCOT) with two-photon imaging to allow multi-vectorial visualization of lingual tumor spread. The OSC-19 head and neck tumor cell line was stably engineered to express the F-actin binding peptide LifeAct fused to the mCherry fluorescent protein (LifeAct-mCherry). Fox1nu/nu mice injected with these cells reliably form tumors that allow the tongue to be visualized by ex-vivo application of two-photon microscopy. This technique allows for the orthotopic visualization of the tumor mass and locally invading cells in excised tongues without disruption of the regional tumor microenvironment. In addition, this system allows for the quantification of tumor cell invasion by calculating distances that invaded cells move from the primary tumor site. Overall this procedure provides an enhanced model system for analyzing factors that contribute to SCOT invasion and therapeutic treatments tailored to prevent local invasion and distant metastatic spread. This method also has the potential to be ultimately combined with other imaging modalities in an in vivo setting.

A comprehensive overview of the techniques involved in generating a mouse model of oral cancer and quantitative monitoring of tumor invasion within the tongue through multi-photon microscopy of labeled cells is presented. This system can serve as a useful platform for the molecular assessment and drug efficacy of anti-invasive compounds.

متعدد الفوتون التصوير من غزو خلايا الورم في الفأر نموذج مثلي الفم سرطان الخلايا الحرشفية

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the lack of the bone microenvironment and auto/paracrine growth factors human MM cells are difficult to cultivate. Therefore, there is an urgent need to establish proper in vitro and in vivo culture systems to study the action of novel therapeutics on human MM cells. Here we present a model to grow human multiple myeloma cells in a complex 3D environment in vitro and in vivo. MM cell lines OPM-2 and RPMI-8226 were transfected to express the transgene GFP and were cultivated in the presence of human mesenchymal cells and collagen type-I matrix as three-dimensional spheroids. In addition, spheroids were grafted on the chorioallantoic membrane (CAM) of chicken embryos and tumor growth was monitored by stereo fluorescence microscopy. Both models allow the study of novel therapeutic drugs in a complex 3D environment and the quantification of the tumor cell mass after homogenization of grafts in a transgene-specific GFP-ELISA. Moreover, angiogenic responses of the host and invasion of tumor cells into the subjacent host tissue can be monitored daily by a stereo microscope and analyzed by immunohistochemical staining against human tumor cells (Ki-67, CD138, Vimentin) or host mural cells covering blood vessels (desmin/ASMA).
In conclusion, the onplant system allows studying MM cell growth and angiogenesis in a complex 3D environment and enables screening for novel therapeutic compounds targeting survival and proliferation of MM cells.

Human multiple myeloma (MM) cells require the supportive microenvironment of mesenchymal cells and extracellular matrix components for survival and proliferation. We established an in vivo chicken embryo model with engrafted human myeloma and mesenchymal cells to study effects of cancer drugs on tumor growth, invasion and angiogenesis.

إنشاء طعم أجنبي نموذج المايلوما المتعددة الإنسان في الدجاج لدراسة نمو الورم والغزو والأوعية الدموية

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic step. Despite advances in our understanding of DED, significant knowledge gaps remain. Advances are limited in part due to the lack of informative animal models. The authors recently reported on a method of DED induced by injecting all orbital lacrimal gland (LG) tissues with the lectin concanavalin A. Here, we report a novel model of aqueous-deficient DED based on the surgical resection of all orbital LG (dacryoadenectomy) tissues. Both methods use rabbits because of their similarity to human eyes in terms of the size and structure of the ocular surface. One week after removal of the nictitating membrane, the orbital superior LG was surgically removed under anesthesia, followed by removal of the palpebral superior LG, and finally removal of the inferior LG. Dacryoadenectomy induced severe DED, evidenced by a marked reduction in the tear break up time test and the Schirmer&#39;s tear test, and significantly increased tear osmolarity and rose bengal staining. Dacryoadenectomy-induced DED lasted at least eight weeks. There were no complications and animals tolerated the procedure well. The technique can be mastered relatively easily by those with adequate surgical experience and appreciation of the relevant rabbit anatomy. Since this model recapitulates the features of human aqueous-deficient DED, it is suitable for studies of ocular surface homeostasis, DED, and candidate therapeutics.

A novel approach is presented to induce chronic dry eye disease in rabbits by surgically removing all orbital lacrimal glands. This method, distinct from those previously reported, produces a stable, reproducible model of aqueous deficient dry eye well suited to study tear physiology and pathophysiology and ocular therapeutics.

إنشاء نموذج العين الجافة الشديدة باستخدام استئصال الددريوادادينال الكامل في الأرانب

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Establishment of a Mouse Severe Acute Pancreatitis Model using Retrograde Injection of Sodium Taurocholate into the Biliopancreatic Duct

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a lack of effective treatments in the current clinical practice. With the easy accessibility of transgenic and knockout strains and their small size, which allows minimal doses of drugs required for in vivo evaluation, a well-established experimental model in mice is preferred for AP research. Moreover, SAP induced through sodium taurocholate (TC) is currently one of the most widely used and best characterized models. This model has been investigated for novel therapies and possible molecular events during the process of AP. Here, we present the generation of an AP mouse model using sodium taurocholate and a simple homemade microsyringe. Moreover, we also provide the methodology for the subsequent histology and serological testing.

A mouse model of severe acute pancreatitis is described herein. The procedure presented here is very rapid, simple, and accessible, thereby potentially allowing the study of the molecular mechanisms and different therapeutic interventions in acute pancreatitis in a convenient way.

إنشاء نموذج التهاب البنكرياس الحاد الوخيم للفأر باستخدام الحقن الرجعي لتاوروكولات الصوديوم في القناة الصفراوية البنكرياسية

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a ...

A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

نموذج فأر BALB/c الوليدي لالتهاب الأمعاء والقولون الناخر

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight ...

Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the investigation of disease mechanisms and the development of therapeutic strategies. 
To perform the surgery, we enter the cardiac chamber through the third intercostal space and carefully dissect the internal mammary vein and immerse it in normal saline. The right main coronary artery is then treated for ischemia. The target vessel is incised, a shunt plug is placed, and the distal end of the graft vein is anastomosed. The ascending aorta is partially blocked, and the proximal end of the graft vein is anastomosed after perforation. The graft vein is checked for patency, and the proximal right coronary artery is ligated. 
CABG surgery is performed in minipigs to harvest the left internal mammary vein for its use as a vascular graft. Serum biochemical tests are used to evaluate the physiological status of the animals after surgery. Ultrasound examination shows that the proximal, middle, and distal end of the graft vessel are unobstructed. In the surgical model, turbulent blood flow in the graft is observed upon histological examination after the CABG surgery, and venous graft stenosis associated with intimal hyperplasia is observed in the graft. The study here provides detailed surgical procedures for the establishment of a repeatable CABG-induced VGD model.

In this protocol, novel pig vein bypass grafting was performed through a small incision in the left chest wall without cardiopulmonary bypass. A postoperative pathology study was done, which showed intimal thickening.

إنشاء وتقييم نموذج مرض الكسب غير المشروع في الوريد الخنزير

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the ...

Establishment of a Simple and Effective Rat Model for Intraoperative Parathyroid Gland Imaging

Parathyroid gland (PG) identification is a critical unmet need in thyroidectomy. The identification of the PG is challenging in thyroid surgery as it is similar in color to the thyroid gland. The lack of effective animal models in preclinical research is a severe limitation for the development of PG identification techniques. This protocol allows for the establishment of a simple and effective rat model for PG identification. In this model, black iron oxide nanoparticles (IONPs) are injected locally in the thyroid gland and rapidly diffuse within the thyroid gland but not the PG. A negatively stained PG and a positively stained thyroid gland can be easily identified by the naked eye without requiring external microscopes. The position of the PG can be identified by increasing the color contrast between the thyroid gland and the PG, based on the color of the black IONPs. This rat model is low-cost and convenient for PG identification, and the IONPs are a novel PG contrast agent.

To date, the development of parathyroid gland (PG) identification methods is limited by the lack of animal models in preclinical research. Here, we establish a simple and effective rat model for intraoperative PG imaging and evaluate its effectiveness by using iron oxide nanoparticles as a novel PG contrast agent.

إنشاء نموذج بسيط وفعال للفئران لتصوير الغدة الجار درقية أثناء العملية

Parathyroid gland (PG) identification is a critical unmet need in thyroidectomy. The identification of the PG is challenging in thyroid surgery as it is ...

جراحة الناسور الشرياني الوريدي المعدلة لإنشاء نموذج الماوس الزائد لحجم RV

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV myocardium may respond differently to VO in children compared to adults. The present study aims to establish a postnatal RV VO model in mice using a modified abdominal arteriovenous fistula. To confirm the creation of VO and the following morphological and hemodynamic changes of the RV, abdominal ultrasound, echocardiography, and histochemical staining were performed for 3 months. As a result, the procedure in postnatal mice showed an acceptable survival and fistula success rate. In VO mice, the RV cavity was enlarged with a thickened free wall, and the stroke volume was increased by about 30%-40% within 2 months after surgery. Thereafter, the RV systolic pressure increased, corresponding pulmonary valve regurgitation was observed, and small pulmonary artery remodeling appeared. In conclusion, modified arteriovenous fistula (AVF) surgery is feasible to establish the RV VO model in postnatal mice. Considering the probability of fistula closure and elevated pulmonary artery resistance, abdominal ultrasound and echocardiography must be performed to confirm the model status before application.

تسليط الضوء على المؤلف: إنشاء وتأكيد نموذج الماوس الزائد لحجم البطين الأيمن بعد الولادة  

This protocol presents the establishment and confirmation of a postnatal right ventricular volume overload (VO) model in mice with abdominal arteriovenous fistula (AVF), which can be applied to investigate how VO contributes to postnatal heart development.