يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال البحوث الرئوية، مثل تلك المتعلقة بعلاج أمراض الرئة الحادة والمزمنة في المرحلة النهائية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسهل بدء الآليات الجزيئية والمرضية لتلف الأعضاء المتعددة أثناء الأكسجين المطول للغشاء خارج الجسم باعتباره إجراء منقذ للحياة. تحت ظروف نظيفة وغير معقمة ، استخدم شفرة جراحية ومجهر تشريح لإدخال ثلاثة fenestrations في الثلث من قسطرة البولي يوريثين الفرنسية تحت التكبير 16x.
المقبل، ووضع cannula تدفق في الحل فتيلة، والتبديل على مضخة الغشاء الخارجي لملء الأوكسجين غشاء خارجcorporeal، أو آلة ECMO، ل فتيلة من الدائرة بمعدل تدفق ملليمتر واحد في الدقيقة. بعد 30 دقيقة، إضافة 0.5 لتر في الدقيقة من 100٪ الأكسجين إلى المؤكسج وتأكيد عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في فأر الكبار تخدير. بعد تطبيق مرهم على عيون الحيوان، قم بعمل شق جانبي للجلد من أربعة ملليمترات على الجانب الأيسر من الرقبة لتصور الوريد الوداجي، واستخدام ملقط صغيرة ومسحات قطنية لمزيد من فضح الوعاء.
استخدام 8-0 خياطة الحرير لligate نهاية القعر من الوريد المكشوف، ووضع عقدة زلة في نهاية قريبة. احس الجدار الأمامي للورد بمقاسات ميكروسيسات، وحقن 2.5 وحدة دولية لكل غرام من الهيبارين في الوريد الوداجي عبر نخالة من عيار 26، ورفع نهاية رأس الوسادة الجراحية بمقدار 30 درجة لتجنب فقدان الدم المفرط أثناء عملية الإدراج. إدراج بعناية في fenestrated اثنين من cannula البولي يوريثين الفرنسية في الطرف القريب من الوريد الوداجي، وتناوب على القنية قليلا، في حين دفع القنية إلى عمق أربعة سنتيمترات للوصول إلى التشعب اللين من الكافا الوريدي السفلي.
من المهم دفع القنية بلطف شديد ، ولكن بشكل مستمر دون استخدام قوة إضافية. إذا واجهت المقاومة، سحب cannula مرة أخرى وإدراجه مرة أخرى. تأمين القنية مع 8-0 عقدة الحرير ، وفضح الوريد الوداجي الأيمن كما أظهرت للتو.
Cannulate الوريد الوداجي الأيمن مع واحد كانية البولي يوريثين الفرنسية، ونقل بلطف كانولا خمسة ملليمترات نحو الأذين الأيمن، وتأمين الكينولا مع 8-0 عقدة الحرير. قسطرة الشريان الفخذي الأيسر مع آخر واحد cannula البولي يوريثين الفرنسية لمراقبة الضغط الغازية وتحليل غاز الدم، وإدراج إبر تخطيط القلب المتصلة بجهاز الحصول على البيانات تحت الجلد في كل من الأمامية، وفي الجدار الصدري الأيسر. ثم أدخل ميزان حرارة المستقيم متصلاً بجهاز اكتساب البيانات.
لبدء الأوكسجين الغشاء خارجcorporeal الوريدية veno-venation، قم بتشغيل المضخة إلى معدل تدفق أولي قدره 0.1 ملليلتر في الدقيقة. بعد دقيقتين، ضبط معدل التدفق إلى ثلاثة إلى خمسة ملليلتر في الدقيقة الواحدة. تحت تدفق مستقر، ورصد المعلمات الحيوية عن طريق جهاز الحصول على البيانات في وضع الوقت الحقيقي، والتحقق باستمرار من تدفق الظهر من الصرف الوريدي، ورصد مستوى الدم في خزان الصياد الهواء.
استخدام حقنة ملليلتر واحدة مجهزة برانولا 24 قياس لجمع أي تسرب الدم، وإعادة الدم إلى دائرة ECMO عن طريق خزان محاصرة الهواء. لتحليل غاز الدم، بعد 10 دقائق من بدء ECMO، استخدم خرطوشة أخذ عينات الدم لجمع ما يقرب من 75 ميكرولترات من الدم الشرياني من الكافا الوريدي السفلي قبل الأكسجين، مباشرة بعد الأكسجين، ومن الشريان الفخذي. بعد 30 و 60 دقيقة من بدء ECMO، اجمع الدم من الشريان الفخذي فقط.
45 و 90 دقيقة بعد بدء, إدارة 0.1 ملليلتر من حل فتيلة للتعويض عن فقدان السائل داخل الفات عبر الصياد الهواء. بعد ساعتين من بدء, جمع الدم من الأوكسجين, الوريد السفلي cava, والشريان الفخذي. بعد جمع الدم الأخير، تقليل معدل التدفق على المضخة على مدى خمس دقائق، وبالتالي وقف ECMO، مع الاستمرار في تسجيل المعلمات الحيوية لمدة 10 دقائق أخرى.
في تجربة نموذجية، يتم تسجيل المعلمات الفسيولوجية للحيوان كل 10 دقائق. في هذه التجربة التمثيلية، أظهرت المعلمات الدموية وجود حالة من اللوت الدموي ذات الصلة أثناء ECMO، على الرغم من عدم وجود نقل دم كان ضروريًا للتعويض عن فقر الدم المعتدل. عرضت معلمات الأكسجين أداءً مناسبًا للأكسجين في خليط هواء الأكسجين في جزء صغير من الأكسجين المستوحاة من 1.0.
وعلاوة على ذلك، وشملت التغيرات الأيضية خلال ECMO القلوية التنفسية في بداية وفي نهاية التجربة. لم يتم إجراء أي تخزين إضافي للدم. من المهم استخدام تقنية التكبل المناسبة لامتصاص تدفق الدم من خلال دائرة ECMO ، ومراقبة معلمات الأكسجين عن طريق تحليل غاز الدم ، واستبدال أي فقدان للدم ناتج عن أخذ عينات الدم بمحلول فتيلي إضافي.
هذه التقنية تمهد الطريق للباحثين في مجال أمراض الرئة لتحسين كبير بروتوكولات العلاجات المنقذة للحياة من خلال استخدام أكثر من 80 المتاحة في ضرب في، ضرب خارج نماذج الماوس.
