يوضح هذا الفيديو إجراء مبسطا تم تطويره لإجراء دراسات الكبد الأيضية بدقة كافية وقابلية للتكرار ، والتي يمكن أن تكون بمثابة دليل لإجراء استئصال الكبد لدراسات تروية الجسم الحي. من الأفضل تطبيق هذه التقنية على عملية التمثيل الغذائي في الوقت الفعلي للكشف عن الوظيفة ، في مستقلبات الدوران في نماذج الأمراض. يسمح التروية بالتحكم الدقيق في العناصر الغذائية والهرمونات المتاحة للكبد.
على الرغم من أن هذه التقنية ليست موجهة نحو العلاج ، إلا أن تروية الكبد يمكن أن تكون مفيدة في فهم مسببات الأمراض وتأثيرها ، مثل مرض السكري و NAFLD و NASH على التمثيل الغذائي الكبدي. مع تطوير مستحضرات صيدلانية جديدة ، تصبح طرق تقييم استقلاب الطاقة المركزية الكبدية ضرورية. يمكن استخدام هذه الطريقة مع نماذج للعديد من الأمراض ، بما في ذلك السرطانات وفي عدة مراحل مختلفة من تطور المرض.
بادئ ذي بدء ، ضع أنف الفأر في مخروط الأنف بعد تحريض التخدير ، وسجل مخالبه. إدارة يدوكائين من خلال حقن تحت الجلد ثنائيا في منطقة القمة الحرقفية الأمامية. قم بإجراء اختبار قرصة إصبع القدم للتأكد من عدم وجود جميع ردود الفعل المؤلمة.
قم بإجراء بضع الاضطرابات الهضمية لفضح الأعضاء الداخلية عن طريق إجراء شق بعرض ثلاثة سنتيمترات. قم بتوسيع الشق باستخدام مرقئ يسحب الجر عن طريق تثبيت عملية الخنازير. استخدم قضيب قطني مائل لتنظيف الأمعاء الدقيقة والغليظة التي تغطي الوريد البابي.
ضع خياطة حريرية تحت قوس الوريد البابي القريب من الكبد. ضع الخيط الحريري الثاني القريب أو البعيد من الوريد المساريقي السفلي البعيد عن الكبد باستخدام خياطة 2-0. بمجرد أن تكون الغرز في مكانها ، قم بتقليب الوريد البابي باستخدام قسطرة قياس 22 ، مع الحفاظ على الشطبة تشير إلى أعلى.
أدخل الوريد البابي بزاوية لا تزيد عن 15 درجة. اربط الخيط الأول بعد نقرة القسطرة. بعد أن يتم تعليب الوريد البابي ، قم بتثبيت القسطرة على بعد مليمترين إلى ثلاثة ملليمترات من فرع الوريد البابي باستخدام خياطة الحرير.
قم بتأمين الجزء السفلي من القسطرة باستخدام الخيط الثاني. اربط عقدة مع الخيط لتثبيت القسطرة بالجزء البعيد من الوريد البابي والأنسجة المحيطة. بعد تأمين القسطرة، أدخل حقنة بملليلتر واحد مع إبرة قياس 27 يبلغ طولها 38.1 ملم في القسطرة لتدفق فقاعات الدم والهواء.
استخدم قطرا داخليا ملليمترا واحدا وأنبوب سيليكون قطره الخارجي خمسة ملليمترات مع ديك ثابت لإقران عمود التروية بالقسطرة ، مما يسمح بتدفق المخزن المؤقت إلى الكبد ، مما يمثل بداية التروية. بعد بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت ، قم بتخفيف ضغط الأوعية الدموية المتزايد عن طريق شق باستخدام مقص في الوريد الأجوف السفلي. تأكد من تدفق العطر عبر الكبد من خلال ملاحظة التغير المتجانس في لون الكبد من الوردي أو الأحمر إلى الأصفر الشاحب.
بمجرد تأكيد التدفق ، قم باستئصال المعدة والأمعاء الدقيقة والأمعاء الغليظة والكلى اليمنى من الأنسجة المحيطة. بمساعدة المساعد الجراحي ، قم بمناورة الكبد حول تجويف البطن والصدر حيث يقوم الجراح بقطع الصفاق الجداري والأنسجة الصدرية لاستئصال الكبد. ارفع الكبد لأعلى واقطع الأنسجة الضامة المتبقية التي تثبت الكبد في مكانه باستخدام المقص.
تعامل ببطء مع الكبد لسهولة الرؤية. معدل التدفق وقياسات استهلاك الأكسجين أمر حيوي لمراقبة صحة الكبد ووظيفته. غالبا ما يكون هناك فرق طفيف في استهلاك الأكسجين بين الكبد الذي يتم تغذيته والصيام ، والذي يمكن أن يعزى إلى زيادة الطلب على الطاقة التي يفرضها تكوين الجلوكوز في الكبد الصائم.
وتشمل أهم الخطوات إدخال القسطرة بزاوية 15 درجة، وتصور طرف القسطرة، ولف المعصم والكتفين عند ربط الخياطة، وتجنب الالتواء على الوريد البابي. يمكن دراسة الأنسجة المستأصالة بعد التروية بأي عدد من الأساليب الكيميائية الحيوية أو التحليلية. تتيح عمليات التروية خارج الجسم الحي بالاشتراك مع التصوير بالرنين المغناطيسي والتحليل الطيفي في الوقت الفعلي قياس التدفقات الأيضية في الوقت الفعلي.
بطبيعة الحال ، يمتد هذا إلى اضطراب التدفق من حالة التحكم استجابة للأمراض.
