이 방법은 급성 및 만성 말단 폐 질환의 치료와 관련된 것과 같은 폐 연구 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 생명을 구하는 절차로서 장기간의 외피 막 산소화 시 다기관 손상의 분자 및 병리학 적 메커니즘의 시작을 용이하게한다는 것입니다. 깨끗하고 비멸적인 조건에서 수술용 블레이드와 해부 현미경을 사용하여 16배 배율하에서 프랑스 폴리우레탄 카테터 2마리의 해반 3개에 3개의 회향을 도입합니다.
다음으로, 유출 캐뉼라를 프라이밍 용액에 넣고 연막 펌프를 켜서 분당 1밀리미터의 유량으로 회로프라이밍을 위한 초보막 산소화 또는 ECMO 기계를 채웁니다. 30 분 후, 산소에 100 %의 산소의 분당 0.5 리터를 추가하고 마취 성인 마우스에서 발가락 핀치에 대한 응답의 부족을 확인합니다. 동물의 눈에 연고를 적용한 후 목 왼쪽에 4mm 의 측면 피부 절개를 하여 경정맥을 시각화하고 마이크로 포셉과 면봉을 사용하여 혈관을 더욱 노출시합니다.
8-0 사용 실크 봉합사는 노출된 정맥의 단부 끝을 리게이트하고 근접 끝에 슬립 매듭을 놓습니다. 정맥의 전방 벽을 미세 사이주로 절개하고, 26 게이지 브라눌라를 통해 헤파린 그램당 2.5 개의 국제 단위를 경정맥에 주입하여 삽입 중에 과도한 혈액 손실을 피하기 위해 수술 패드의 머리 끝을 30도 들어 올립니다. 호향화된 두 개의 프랑스 폴리우레탄 캐뉼라를 경정맥의 근간 끝에 조심스럽게 삽입하고, 캐뉼라를 약간 회전시키면서 캐뉼라를 4센티미터 깊이로 밀어 주어 열등한 베나 카바의 일루악 비푸리에 도달한다.
캐뉼라를 매우 부드럽게 밀어 붙이는 것이 중요하지만, 여분의 힘을 사용하지 않고 지속적으로 추진합니다. 저항이 발생하면 캐뉼라를 다시 당기고 다시 삽입합니다. 8-0으로 캐뉼라 를 확보 실크 매듭, 그리고 그냥 입증 된 바와 같이 오른쪽 경정맥을 노출.
프랑스 폴리우레탄 캐뉼라 1개를 들고 오른쪽 경정맥을 세밀하게 움직여 오른쪽 아트리움쪽으로 5밀리미터를 부드럽게 움직이고, 캐뉼라를 8-0으로 고정합니다. 실크 매듭. 침습적 압력 모니터링 및 혈액 가스 분석을 위해 다른 프랑스 폴리우레탄 캐뉼라와 왼쪽 대퇴 동맥을 카테터레화하고, 데이터 수집 장치에 연결된 심전도 바늘을 앞다리와 왼쪽 흉부 벽에 피하한다. 그런 다음 데이터 수집 장치에 연결된 직장 온도계를 삽입합니다.
veno 정맥 외측 막 산소화를 시작하려면 펌프를 분당 0.1 밀리리터의 초기 유량으로 켭니다. 2분 후, 유속량을 분당 3~5밀리리터로 조정합니다. 안정적인 흐름 하에서, 실시간 모드에서 데이터 수집 장치를 통해 중요한 매개 변수를 모니터링하고, 정맥 배수로부터의 후유를 지속적으로 확인하고, 공기 트래퍼 저수지의 혈액 수준을 모니터링한다.
24게이지 브라눌라가 장착된 1밀리리터 주사기를 사용하여 혈액 누출을 수집하고 공기 트래핑 저장소를 통해 ECMO 회로로 혈액을 반환합니다. 혈중 가스 분석을 위해, ECMO 개시 후 10 분, 혈액 샘플링 카트리지를 사용하여 산소 공급기 전, 산소 공급기 직후, 대퇴 동맥으로부터 열등한 정맥 카바에서 약 75 마이크로리터의 동맥 혈액을 수집합니다. ECMO 개시 후 30 분 및 60 분, 대퇴동맥에서만 혈액을 수집합니다.
개시 후 45 및 90분, 에어 트래퍼를 통한 내트라바살 액체 손실을 보상하기 위해 프라이밍 용액0.1 밀리리터를 투여한다. 개시 후 2 시간, 산소 공급기에서 혈액을 수집, 열등한 베나 카바, 대퇴 동맥. 마지막 혈액 수집 후, 5 분 동안 펌프의 유량을 감소시켜 ECMO를 중지하고 또 다른 10 분 동안 중요한 매개 변수를 계속 기록합니다.
일반적인 실험에서, 동물의 생리 매개 변수는 매 10 분마다 기록됩니다. 이 대표적인 실험에서 혈액학적 매개 변수는 ECMO 동안 관련 혈액 검사를 입증했지만, 중간 정도의 빈혈을 보상하기 위해 수혈이 필요하지 는 않았습니다. 산소 매개 변수는 1.0의 영감 산소의 분수에서 산소 공기 혼합물에서 적절한 산소 를 표시했다.
또한, ECMO 중 대사 변화는 실험의 시작과 끝에 호흡 알칼로증을 포함하였다. 추가 혈액 버퍼링이 수행되지 않았습니다. ECMO 회로를 통해 혈액 흐름을 흡수하고, 혈액 가스 분석을 통해 산소 매개 변수를 모니터링하고, 혈액 샘플링으로 인한 혈액 손실을 추가 프라이밍 솔루션으로 대체하는 적절한 캐닝 기술을 사용하는 것이 중요합니다.
이 기술은 폐 질환 분야의 연구원들이 80개 이상의 가능한 노크인, 녹아웃 마우스 모델을 사용하여 생명을 구하는 치료법프로토콜을 크게 개선할 수 있는 길을 열어줍니다.
