يمكن أن يساعد هذا الطرح في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في المجال الكهربائي الفسيولوجي، مثل تدفق السوائل في لوائح القنوات الأيونية فقط. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن تقدير التركيز الأيوني الفعلي في طبقة الحدود غير ثنائية من سطح الغشاء لتفسير البيانات المتعلقة بتنظيم تدفق السوائل للقنوات الأيونية. لبدء هذا الإجراء، ثني أنبوب الشعيرات الدموية الزجاجي النار لتشكيل شكل U.
يجب أن يكون القطر الداخلي للشعر الشعري كبيرًا بما يكفي لتقليل مقاومة السلسلة عند تسجيل التيارات الأيونية الكبيرة. بعد ذلك، قم بحل ثلاثة غرامات من الأاغروز في 100 ملليلتر من كلوريد البوتاسيوم ثلاثي المولر، ووضعها على صفيحة ساخنة بين 90 و 100 درجة مئوية. ثم، تحميل الجسر مع كلوريد البوتاسيوم agarose، عن طريق غمر الجسر الزجاجي في الحل.
يبقيه بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة لأغاروز لتعيين وتصلب. في اليوم التالي، قم بحفر جسر أغاروز كلوريد البوتاسيوم المحملة بكلوريد من ملح agarose المتصلب. تخزين الجسر في زجاجة واسعة العنق من كلوريد البوتاسيوم ثلاثة المولار في الثلاجة.
في هذا الإجراء، ضع حاوية محملة بمحلول الاستحمام، فوق حجرة المشبك. المقبل، ملء غرفة التصحيح المشبك مع حل الاستحمام عن طريق شفط الأنبوب. لوقف تدفق السوائل، مقطع الأنبوب على جانب الحاوية، لمنع تدفق السوائل.
ثم مقطع الأنبوب في الجانب شفط لوقف الشفط في نفس الوقت. هذه هي حالة التحكم الثابتة. لتطبيق تدفق السوائل قوة القص، وفتح كلا الأنابيب على جانبي الحاوية والشفط في نفس الوقت.
قبل أو بعد تطبيق تدفق السائل قوة القص إلى الخلية، وحساب معدل التدفق في المليلتر في الدقيقة الواحدة عن طريق قياس الانخفاض في حجم السوائل على مدى وقت معين. لقياس التغيرات في إمكانات تقاطع المعادن السائلة، وإعداد المالحة الفسيولوجية الطبيعية لغرفة الاستحمام، ومقارنتها في غياب وجود جسر كلوريد البوتاسيوم أجار. بعد ذلك، ضع ماصة التصحيح التي تحتوي على محلول كلوريد البوتاسيوم ثلاثة المولر في الغرفة، لتقليل التحول المحتمل تقاطع بين الماصات وحلول الاستحمام.
ثم تعيين مضخم الجهد المشبك إلى وضع المشبك الحالي. بعد إبطال إمكانات الإزاحة الأولية، قم بقياس التغيرات في الجهد الناتج عن اختلاف معدلات التدفق. للتحقق من أن التغيرات في الجهد الكهربائي هي إمكانات تقاطع المعادن السائلة، إعادة النظر في تأثير تدفق السوائل على إمكانية تقاطع، وذلك باستخدام جسر الملح agarose بين محلول الحمام والأقطاب المرجعية.
مع نتائج التغيرات في إمكانات تقاطع المعادن السائلة، رسم الدالة المحتملة علاقات معدل التدفق، وتقدير القيمة المشبعة من التحول المحتملة الوصلة من قبل معدل التدفق فوق السوائل. ثم، تغيير تركيز كلوريد في سائل الاستحمام، ورسم وصلة احتمالية علاقة تركيز كلوريد. لاحظ أن معدل السائل يجب أن يكون ثابتاً، وعالياً بما فيه الكفاية لمنع انخفاض تركيز الكلوريد إلى القطب المرجعي للكلوريد الفضي والفضي المجاور.
من منحنيات العلاقة اثنين، تقدير التغيرات في تركيز كلوريد من التحول المحتمل الوصلة قياس. تم تسجيل التيارات VDCC-L في الفئران المنتشرة الأنزيمية mesenteric myocytes الشرايين، مع تسجيل nystatin مثقب التصحيح المشبك. مع جسر كلوريد البوتاسيوم agarose، يمكن تقليل إمكانات التقاطع بين القطب المرجعي وحلول الاستحمام، وزيادة تدفق السوائل الجهد VDCC-L الحالي بشكل مستقل.
ومع ذلك، عندما كان القطب المرجعي للكلوريد الفضي والفضة متصلاً مباشرة بسائل الاستحمام، دون جسر كلوريد البوتاسيوم agarose، تحولت العلاقة IV في وجود تدفق السوائل إلى اليمين، مقارنة بتلك التيارات VDCC-L في ظل حالة ثابتة. يمكن تفسير الزيادة الناجمة عن تدفق السوائل من تيارات كير 2.1 ، والتي تم تسجيلها في خلايا سرطان الدم القاعدي للفئران مع جسر agarose ، بتأثير الطبقة غير المنتهكة. بعد تطويره، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في أكثر من علم وظائف الأعضاء الكهربائية.
لذلك هو لتنظيم تدفق السوائل في التيارات قناة أيون. من حيث الظواهر الكهروكيميائية، في طبقة الحدود غير ثنائية في سطح غشاء الخلية.
