开放补丁夹具移液器测量未搅拌边界层中的离子浓度: 流体流动对离子通道控制的启示

这种提交可以帮助回答电生理领域的关键问题，例如离子通道的流体流动。该技术的主要优点是，它可以估计膜表面未分层边界层中的实际离子浓度，以便进行与离子通道流体流动调节相关的数据解释。要开始此过程，请弯曲发射玻璃毛细管以形成 U 形。

在记录大离子电流时，毛细管的内径应足够大，以减少系列电阻。接下来，在100毫升的三摩尔氯化钾中溶解三克阿加糖，放在90至100摄氏度之间的热盘子里。然后，将氯化钾加糖装上桥，将玻璃桥浸入溶液中。

在室温下过夜，使加糖被设置和硬化。第二天，小心翼翼地从硬化的加糖盐中挖出加糖钾装玻璃桥。将桥存放在冰箱中一个宽颈的三摩尔氯化钾瓶中。

在此过程中，将装有沐浴溶液的容器放在贴片夹室上方。接下来，通过吸管将修补夹室充满沐浴液。要停止流体流动，请将容器侧面的管子夹住，以阻止流体流动。

然后夹住吸管，同时停止吸气。这是静止控制条件。要施加流体流量剪切力，请同时打开容器和吸气侧的两个管子。

在将流体流量剪切力施加到细胞之前或之后，通过测量给定时间中流体体积的减少，以每分钟毫升为单位计算流速。要测量液态金属结点电位的变化，为沐浴室准备一个正常的生理盐盐水，并在没有和存在氯化钾桥的情况下进行比较。接下来，在腔室中放置一个含有三摩尔氯化钾溶液的贴片移液器，以尽量减少移液器和沐浴溶液之间的结移位。

然后将电压钳放大器设置为电流夹紧模式。取消初始偏移电位后，测量变化流速引起的电压变化。为了验证电压的变化是液金属结电位，请使用洗浴溶液和参考电极之间的气糖盐桥重新检查流体流动对结电位的影响。

利用液金属结电位变化的结果，绘制函数电位流速关系，用超流体流速估计结电位变化的饱和值。然后，改变洗浴液中的氯化物浓度，并绘制结位潜在氯化物浓度关系。请注意，流体速率应恒定且足够高，以防止氯化物浓度降低至相邻的氯化银参考电极。

从两个关系曲线中，估计从测量的结电位变化中氯化物浓度的变化。VDCC-L电流记录在酶分散的大鼠肠动脉菌细胞中，用尼他汀穿孔的贴片夹记录。使用氯化钾桥，可最大限度降低参考电极与沐浴溶液之间的结电位，流体流动可独立增加VDCC-L电流的电压。

然而，当氯化银参考电极直接连接到沐浴液时，没有氯化钾桥，与静态条件下的VDCC-L电流相比，流体流动存在的IV关系向右移动。Kerr 2.1电流的流体流量增加，这些电流在大鼠嗜血性白血病细胞中记录，其作用可以用未烧焦的层效应来解释。这项技术发展后，为超电生理学的研究人员铺平了道路。

因此，它用于调节离子通道电流中的流体流动。在电化学现象方面，在细胞膜表面的未分层边界层。