Это представление может помочь ответить на ключевые вопросы в электрофиофиозной сфере, такие как поток жидкости только в правилах ионных каналов. Основным преимуществом этого метода является то, что он может оценить фактическую концентрацию ионов в неутябленные пограничный слой поверхности мембраны для интерпретации данных, связанных с регулированием потока жидкости ионных каналов. Чтобы начать эту процедуру, согните облеготовку капиллярную трубку, чтобы сформировать форму U.
Внутренний диаметр капилляра должен быть достаточно большим для снижения сопротивления серии при записи больших ионных течений. Затем растворите три грамма агарозы в 100 миллилитров трехмязыкного хлорида калия и поместите его на горячую пластину между 90 и 100 градусами цельсия. Затем загрузите мост хлоридом калия агарозой, погрузив стеклянный мост в раствор.
Держите его на ночь при комнатной температуре для агарозы установить и затвердеть. На следующий день, тщательно выкопать агарозы хлорида калия загружен стеклянный мост из затвердевшей соли агарозы. Храните мост в широкошеей бутылке трехмяголого хлорида калия в холодильнике.
В этой процедуре поместите контейнер, загруженный раствором для купания, над камерой зажима патча. Затем заполните патч-зажим камеры с купанием раствора путем всасывания трубки. Чтобы остановить поток жидкости, зарезать трубку со стороны контейнера, чтобы заблокировать поток жидкости.
Затем зарезать трубку на стороне всасывания, чтобы остановить всасывание в то же время. Это стационарное состояние управления. Чтобы применить силу потока жидкости, откройте обе трубки на стороне контейнера и всасывания в то же время.
До или после применения силы стрижки потока жидкости к клетке, рассчитать скорость потока в миллилитр в минуту путем измерения уменьшения объема жидкости в течение данного времени. Для измерения изменений в потенциале жидкометаллический стык, подготовить нормальный физиологически-солевой раствор для купальни и сравнить их при отсутствии и наличии хлоридного моста агара калия. Затем поместите в камеру пипетки с трехмяхалярным хлоридом калия, чтобы свести к минимуму потенциальный сдвиг между пипеткой и растворами для купания.
Затем установите усилитель зажима напряжения в текущем режиме зажима. Сведет на нет первоначальный потенциал смещения, измерьте изменения напряжения, вызванные изменением скоростью потока. Чтобы убедиться, что изменения напряжения являются жидкометаллический перекресток потенциалов, пересмотреть влияние потока жидкости на потенциал соединения, используя мост агарозы соли между раствором ванны и эталонный электрод.
По результатам изменений в потенциале жидкометаллический стык, нарисуйте функцию потенциальных взаимосвязей скорости потока и оцените насыщенную ценность потенциального сдвига соединения по скорости наджидкого потока. Затем измените концентрацию хлорида в купальной жидкости и нарисуйте связь потенциальной концентрации хлорида. Обратите внимание, что скорость жидкости должна быть постоянной и достаточно высокой, чтобы предотвратить снижение концентрации хлорида до уровня соседнего серебристо-серебряного хлорида эталонного электрода.
Из двух кривых отношений оцените изменения концентрации хлорида в результате измеренного потенциального сдвига соединения. VDCC-L токи были зарегистрированы в энзиматически рассеянных крыс мезентерических артериальных миоцитов, с нистатином перфорированной записи патч-зажима. С мостом хлорида калия агарозы потенциал соединения между эталонным электродом и растворами для купания можно свести к минимуму, а поток жидкости самостоятельно увеличил напряжение VDCC-L.
Однако, когда серебристо-серебряный хлорид эталонный электрод был непосредственно подключен к жидкости для купания, без моста хлорида калия агарозы, IV отношения в присутствии потока жидкости сместились вправо, по сравнению с течением VDCC-L в статическом состоянии. Вызванное потоком жидкости увеличение токов Керра 2.1, которые были зарегистрированы в клетках крысиного базофиличного лейкоза с мостом агарозы, может быть объяснено эффектом неуроченного слоя. После своего развития, эта техника проложила путь для исследователей в более электро-физиологии.
Так что это для регуляции потока жидкости в течениях ионных каналов. С точки зрения электрохимических явлений, в неутябленом пограничном слое на поверхности клеточной мембраны.
