الهدف العام لهذا البروتوكول هو إنتاج صراع حسي مستمر لدراسة التعلم على المدى الطويل في الفئران التي تتصرف بحرية. خفض التكلفة التجريبية والوقت من التعلم الحسية، وهذا النهج يستوعب الجمع بين في التجارب في الجسم الحي وفي المختبر. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في فأر مخدر ، استخدم زوجًا من ملقط حادة لفهم الجلد في الجزء الخلفي من الرأس واستخدام المقص لإجراء شق طولي واحد ونصف الطول لفضح الجمجمة.
خدش بلطف في periosteum مع مشرط وتطبيق قطرة من المنشط الأخضر على منتصف الجمجمة لزيادة نفاذية العظام. المقبل مزيج ملعقة واحدة من البوليمر من مجموعة زرع مع خمس قطرات من مونومر وقطرة واحدة من تحفيز وفرشاة كمية سخية من مزيج الاسمنت بين معالم الجمجمة لامدا وبريغما. باستخدام حركة الضرب من لامدا إلى bregma ، ضع بسرعة رافضة الرأس على الأسمنت وإعادة تطبيق الأسمنت الإضافي حول الجزء السفلي من المنشور لضمان أن الرأس يلتصق بشكل آمن بالجمجمة.
في حين أن الاسمنت هو التجفيف، وخلط مسحوق الراتنج مع السائل الراتنج إلى اتساق سلس وتطبيق خليط الراتنج الناتجة عن الاسمنت المجفف وحول رتة. بعد السماح للراتنج لتجف لمدة ثلاث دقائق، استخدم خياطة فيكريل 4-0 لإغلاق الجلد في الجزء الخلفي من الأذنين واستخدام مسحة القطن لتطبيق محلول اليود 10 إلى 20٪إلى شق. ثم ضع الحيوان تحت ضوء أحمر مع المراقبة حتى الشفاء التام.
ثمان وأربعون ساعة بعد الجراحة محاذاة الثقوب في الجهاز مخطط مع الثقوب في اِلرئيس واستخدام 1.3 ملم 1.3 مفك ال عشرية واثنين من مسامير 1.2 ملم لتأمين الجهاز إلى headpost. نوصي بإصلاح الجهاز على المصابيح الرأسية بمساعدة مشغل ثانٍ لتجنب خطر تمزيق الراس أو إيذاء الحيوان بمفك البراغي. لإصلاح حالة صورية، بدوره الجهاز رأسا على عقب ومع الجزء الخلفي من الجهاز التي تواجه اتجاه محاذاة الثقوب في الجهاز مع الثقوب في الرأس.
تأكد من أن الجهاز مؤمن بشكل جيد ولا يمكن إزالته من قبل الحيوان وأن الجهاز لا يطبق الضغط مباشرة على الأنف ، مما قد يسبب الألم أو صعوبات في التنفس أو إصابة الجلد. كما الفئران قد تظهر بعض التشوهات السلوكية خلال الساعات ال 48 الأولى من ارتداء الجهاز، ومراقبة الحيوانات عن كثب خلال هذا الوقت وتوفير سهولة الوصول إلى الطعام والماء حتى تصبح الحيوانات تأقلم. وزن الفئران مباشرة بعد زرع ومرة أخرى كل 24 ساعة بعد ذلك حتى نهاية التجربة، مع إيلاء اهتمام خاص للفئران ارتداء الجهاز مخطط.
لتسجيل الاستجابة الحسية للحيوانات المتكيفة مع الجهاز ، قم بتأمين الفأرة الأولى على القرص الدوار مع إدخال البراغي في اِرَب الرأس ووضع قبة الشاشة حول الحيوان. إيقاف جميع الأضواء في الغرفة باستثناء جهاز العرض optokinetic وبدء تسجيل التحفيز الميداني الكامل optokinetic في عدة سرعات مختلفة في كل من اتجاه عقارب الساعة وإتجاهات عكس عقارب الساعة. بمجرد أن ينتهي التسجيلات، قم بإزالة القبة ودر الأضواء.
لتسجيل رد الفعل الدهليزي في الظلام، وتطبيق قطرة من 2٪ pilocarpine على عيون الحيوان والانتظار على الأقل خمس دقائق قبل إزالة مرهم بلطف مع مسحة القطن. إيقاف كل الأضواء مرة أخرى ووضع مربع على القرص الدوار للحفاظ على الحيوان في الظلام الملعب. قبل البدء في اختبار انعكاس الدهليز الأفقي العيني باستخدام دوران الزاوي الجيوب الأنفية حول محور عمودي مع ترددات مختلفة و / أو سرعات مختلفة.
عند الانتهاء من جلسة التسجيل الثانية، ارجع الماوس إلى قفصه تحت مصباح الأشعة تحت الحمراء مع المراقبة حتى يتم استرداد الحيوان بالكامل من تأثيرات توسع الأوعية الثانوية للبيلوكربين. بعد أسبوعين من ارتداء إما صورة زائفة أو جهاز مخطط ، لا تزال استجابات رد الفعل الدهليزية العينية للفئران الزائفة دون تغيير بعد التكيف ، في حين أن الحيوانات المخططة المتكيفة مع الجهاز تظهر استجابة منعكسة معرضة للخطر بشكل كبير. ويكشف القياس الكمي للمكاسب الانعكاسية الدهليزية العينية المتوسطة في تردد ثابت قدره 0.5 هرتز وعند 40 درجة في الثانية قبل وبعد بروتوكول عدم التطابق البصري الدهليزي عن انخفاض قوي في الكسب في الفئران التي ارتدت الجهاز المخطط في حين أن الفئران الزائفة لم تظهر تغييرات كبيرة في المكاسب.
ومع ذلك ، فإن رد الفعل البصري للفئران التي ترتدي الجهاز المخطط مشابه لتلك التي لوحظت في الفترة السابقة للبروتوكول الدهليزي البصري وتلك التي أظهرتها الحيوانات الزائفة. تأكد من مراقبة الفئران يوميًا والتأكد من وضع الجهاز بشكل صحيح على الفئران وأنه لا يعيق إجراءاتها الروتينية. بعد هذا الإجراء في الفيزيولوجيا الكهربائية في المختبر أو التصوير العصبي لتحديد آليات التكيف sellar أو الاختبارات السلوكية لدراسة مختلف النواتج منعكس يمكن أن يؤديها.
