이 프로토콜의 전반적인 목표는 자유롭게 행동하는 마우스에 있는 장기 학습의 연구 결과를 위한 지속적인 감각 충돌을 생성하는 것입니다. 감각 학습의 실험 비용과 시간을 낮추는이 방법은 생체 내 및 체외 실험의 조합을 수용합니다. 진정 된 마우스에 발가락 핀치에 대 한 응답의 부족을 확인 한 후, 무딘 집게 한 쌍을 사용 하 여 머리의 뒷면에 피부를 잡고 두개골을 노출 하는 하나 반 cm 세로 절개를 만들기 위해 가위를 사용 하 여.
메스로 골막막을 부드럽게 긁어내고 두개골 중앙에 녹색 활성제 한 방울을 발라 뼈 투과성을 증가시면 됩니다. 다음으로 이식 키트에서 폴리머 한 스푼을 5방울의 단조량과 촉매 1방울을 혼합하고 람다와 브레그마 두개골 랜드마크 사이에 넉넉한 양의 시멘트 믹스를 브러시합니다. 람다에서 브레그마로 스 와이프 모션을 사용하여 신속하게 헤드 포스트를 시멘트에 배치하고 헤드 포스트가 두개골에 단단히 붙어 있는지 확인하기 위해 포스트의 열등한 부분 주위에 추가 시멘트를 다시 적용합니다.
시멘트가 건조되는 동안 수지 분말을 수지 액과 혼합하여 매끄러운 일관성을 이루고 말린 시멘트 및 헤드포스트 주변에 그 결과로 생긴 수지 혼합물을 적용합니다. 수지가 3분 동안 건조하도록 허용한 후, 비릴 4-0 봉합사를 사용하여 귀 뒤쪽의 피부를 닫고 면봉을 사용하여 절개에 10~20% 요오드 용액을 적용합니다. 그런 다음 동물이 완전히 회복 될 때까지 모니터링하여 빨간 불빛 아래에 놓습니다.
수술 후 48시간 후에 줄무늬 장치의 구멍을 헤드포스트의 구멍과 정렬하고 1.3mm 육석 드라이버와 2개의 1.2mm 나사를 사용하여 헤드포스트에 장치를 고정시합니다. 헤드포스트를 찢어내거나 드라이버로 동물을 다치게 할 위험을 피하기 위해 두 번째 작업자의 도움으로 헤드 포스트에 장치를 고정하는 것이 좋습니다. 가짜 상태를 수정하려면 장치를 거꾸로 뒤집고 장밋빛 방향을 향한 장치의 뒷면 부분으로 장치의 구멍을 헤드 포스트의 구멍과 정렬합니다.
장치가 잘 고정되어 있고 동물이 제거 할 수 없으며 장치가 코에 직접 압력을 가하지 않아 통증, 호흡 곤란 또는 피부 손상을 일으킬 수 있음을 확인하십시오. 마우스는 장치를 착용하는 첫번째 48 시간 도중 몇몇 행동 이상을 전시할 수 있기 때문에, 이 시간 도중 동물을 밀접하게 감시하고 동물이 적응될 때까지 음식과 물에 쉽게 접근을 제공합니다. 이식 직후, 그리고 실험이 끝날 때까지 24시간마다 다시 마우스를 계량하여 줄무늬 장치를 착용한 마우스에게 특별한 주의를 기울입니다.
장치 적응 동물의 감각 반응을 기록하려면 헤드 포스트에 나사를 삽입하여 첫 번째 마우스를 턴테이블에 고정하고 동물 주위에 스크린 돔을 배치합니다. 광키네틱 프로젝터를 제외한 모든 조명을 끄고 시계 방향과 반시계 방향 모두에서 여러 가지 속도로 광동 반사 전체 필드 자극 레코딩 을 시작합니다. 녹음이 지나자마자 돔을 제거하고 조명을 켭니다.
피치 어두운 에 현관 안구 반사를 기록하려면, 동물의 눈에 2 %의 필로카르핀 한 방울을 적용하고 부드럽게 면봉연연을 제거하기 전에 적어도 5 분을 기다립니다. 모든 조명을 다시 끄고 턴테이블 위에 상자를 놓아 동물을 어둡게 유지합니다. 수평 현관-안구 반사 테스트를 시작하기 전에 다른 주파수 및/또는 다른 속도로 수직 축 주위의 부비동 각 회전을 사용 하 여.
두 번째 레코딩 세션이 끝나면 필로카르핀의 이차 혈관 확장제 효과에서 동물이 완전히 회복될 때까지 모니터링을 통해 마우스를 적외선 램프 아래 케이지로 되돌리세요. 2주 동안 샴 또는 줄무늬 장치를 착용한 후, 샴 마우스의 현관-안구 반사 반응은 적응 후 변경되지 않은 상태로 유지되며, 줄무늬 장치 적응 동물은 크게 손상된 반사 반응을 보여줍니다. 평균 전정-안구 반사의 정량화는 0.5 헤르츠의 고정 주파수에서 초당 40도에서 눈부조 부전 프로토콜을 통해 줄무늬 장치를 착용한 마우스의 강한 이득 감소를 나타내며, 가짜 마우스는 상당한 이득 변화를 나타내지 않았다.
그러나, 줄무늬 장치를 착용하는 마우스의 광키네틱 반사는 시각 전정 프로토콜 이전에 관찰된 기간 동안 관찰된 것과 필적하며, 이는 가짜 동물에 의해 입증된다. 매일 마우스를 모니터링하고 장치가 마우스에 올바르게 배치되고 루틴을 방해하지 않는지 확인해야합니다. 다른 반사 출력을 공부하기 위한 셀라 적응 메커니즘 또는 행동 해석을 식별하기 위한 체외 전기 생리학 또는 신경 이미징에서 이 절차에 따라 수행될 수 있다.
