该协议的总体目标是产生一个持久的感官冲突,用于研究自由行为小鼠的长期学习。降低感官学习的实验成本和时间,这种方法适应了体内实验和体外实验的结合。在确认对静静的老鼠的手指捏紧没有反应后,用一对钝钳抓住后脑皮,用剪刀做一个半厘米的纵向切口来露出头骨。
用手术刀轻轻抓下周长,在头骨中间涂抹一滴绿色活化剂,以增加骨骼的渗透性。接下来,将植入套件中一勺聚合物与五滴单体和一滴催化器混合,并在 lambda 和 bregma 头骨地标之间刷出大量的水泥混合物。使用从 lambda 到 bregma 的轻扫运动,快速将头柱放在水泥上,并在柱的劣质部分周围重新应用额外的水泥,以确保头柱牢固地粘在头骨上。
在水泥干燥时,将树脂粉末与树脂液体混合,使树脂保持平滑的一致性,并将产生的树脂混合物涂在干水泥和井柱周围。让树脂干燥三分钟后,使用Vicryl 4-0缝合线关闭耳朵背面的皮肤,并使用棉签将10至20%的碘溶液涂抹在切口上。然后将动物放在红灯下进行监测,直到完全恢复。
手术后四十八小时,条纹装置上的孔与头柱上的孔对齐,并使用 1.3 mm 六角螺丝刀和两个 1.2 毫米螺钉将设备固定到头柱上。我们建议在第二个操作员的帮助下将设备固定在车头柱上,以避免用螺丝刀撕下头柱或伤害动物的风险。要修复假象,请将设备倒置,并且与面向旋转方向的设备背面对齐设备中的孔与头柱上的孔。
确认设备安全良好,动物无法取出,且该装置不会直接对鼻子施加压力,这可能会导致疼痛、呼吸困难或皮肤损伤。由于小鼠在佩戴该装置前48小时内可能表现出一些行为异常,因此在此期间密切监测动物,并方便地获取食物和水,直到动物适应。植入后立即称体重,然后每24小时再次称体重,直到实验结束,特别注意佩戴条纹装置的小鼠。
要记录适应设备的动物的感官反应,请将第一只鼠标固定到转盘上,将螺钉插入到头柱上,并在动物周围放置一个屏幕圆顶。关闭房间内除光动力学投影仪外的所有灯光,并在顺时针和逆时针方向上以多种不同速度启动光动力学反射全场刺激记录。录音一结束,取出圆顶并打开灯。
要记录在漆黑的前视镜反射,在动物的眼睛上涂抹2%的皮洛卡平,并等待至少五分钟,然后用棉签轻轻取下软膏。再次关闭所有灯,在转盘上放置一个盒子,使动物保持漆黑。在开始水平前视镜-眼反射测试之前,使用正弦角旋转围绕垂直轴,具有不同的频率和/或不同速度。
第二次记录会话结束后,将鼠标返回到红外灯下的笼子,并进行监测,直到动物完全从皮洛卡平的二次血管扩张作用中恢复过来。在两周佩戴假眼镜或条纹装置后,假老鼠的前视镜反射反应在适应后保持不变,而条纹适应装置的动物则表现出大大受损的反射反应。在固定频率为 0.5 赫兹和 40 度/秒时,在视觉-前庭不匹配协议之前和之后,平均前视-眼反射增益的量化显示,在假小鼠没有表现出显著增益变化时,佩戴条纹装置的小鼠的增益显著减少。
然而,佩戴条纹装置的小鼠的光动力学反射与视觉-三叶草协议之前观察到的光动力学反射和假动物所展示的反射能力相当。确保每天监测小鼠,并确保设备正确定位在小鼠上,并且不会妨碍其常规操作。按照这个程序在体外电生理学或神经元成像识别塞拉尔适应机制或行为分析研究不同的反射输出可以执行。