يمكن أن يساعد هذا البروتوكول في الحفاظ على استقرار الشحنة ، والتي يمكن أن تكون جزيئات صغيرة وبروتينات ، من خلال استخدام polybubble ، والتي يمكن أن تقلل بدورها من تفاعلات الكربون مع المذيبات. ويمكن استخدام هذه التقنية الجديدة لتحسين التغطية باللقاحات في البلدان النامية، حيث أن وظائف اللقاحات يمكن أن تتعرض للخطر في كثير من الأحيان بسبب عدم كفاءة مرافق النقل والتخزين. لتصنيع polybubbles، استخدم أولا ماصة نقل ملليلتر واحد لإضافة 800 ميكرولتر من 10٪ CMC في 0.92 ملليلتر الزجاج القارورة.
لتجميع PCLTA، مزيج 1،000 غرام لكل ملليلتر من 14 كيلودالون PCL في 200 ميكرولترات من DCM. لتجميع PLGADA، مزيج 1،000 غرام لكل ملليلتر من خمسة كيلودالون PLGADA في 200 ميكرولترات من الكلوروفورم. مزيج الضوئي مع خليط البوليمر من الفائدة في نسبة 0.005 إلى 1 وتحميل 200 ميكرولترات من الحل الناتج في حقنة زجاجية ملليلتر واحدة محمولة على مضخة حقنة متصلة أنبوب الفولاذ المقاوم للصدأ الاستغناء مع قطر داخلي من 0.016 بوصة.
باستخدام محرك صغير للسيطرة على الحركة الأمامية والخلفية للأنبوب البوليمر، حقن البوليمر في 10٪ CMC في القارورة الزجاجية لتشكيل polybubbles وعلاج polybubbles تحت الأشعة فوق البنفسجية في طول موجة نانومتر 254 لمدة 60 ثانية في اثنين من واط لكل سنتيمتر مربع، ثم فلاش تجميد polybubbles في النيتروجين السائل لمدة 30 ثانية وlyophilize الناقلين بين عشية وضحاها في 0.01 ملليبار فراغ في ناقص 85 درجة مئوية. لتمركز البضائع من الفائدة داخل polybubble، اخلط الحمولة مع 5٪ CMC في دوار بين عشية وضحاها لزيادة لزوجة البضائع قبل حقن يدويا اثنين microliters من خليط البضائع في polybubble. عندما تم حقن كل من البضائع، وإعادة علاج، وتجميد فلاش، وlyophilize polybubble حقن كما أظهرت للتو.
في صباح اليوم التالي، استخدم ملقط لفصل البولي بوبل من CMC المجففة وغسل البولي بوبل بالماء الأيون لإزالة أي CMC المتبقية. ثم قطع polybubble في نصف وصورة النصفين عن طريق المجهر confocal لضمان أن البضائع تركزت. بالنسبة لإطلاق البضائع جزيء صغير، احتضان polybubbles مع acriflavine تركزت في 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية لطول الحضانة المناسبة.
في كل نقطة زمنية تجريبية، وجمع عظمى وإضافة 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني جديد إلى القارورة. ثم استخدام قارئ لوحة لتحديد كثافة الفلوريسنس من supernatant التي تم جمعها. لتفعيل الأشعة تحت الحمراء القريبة، مزيج حل البوليمر مع قضبان نانو الذهب المهعور بنسبة واحد إلى تسعة وإضافة مبادر الصورة في 0.005 إلى 1 النسبة.
حقن الخليط الناتج في 0.92 ملليلتر الزجاج قارورة تحتوي على 800 ميكرولترات من 10٪ CMC وعلاج polybubbles تحت الأشعة فوق البنفسجية كما هو موضح. بعد تجميد فلاش وlyophilization كما هو موضح، وغسل polybubbles بالماء deionized واحتضان الناقلين في 400 microliters من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية لفترة الحضانة المناسبة. في نهاية الحضانة، والحصول على صورة الأشعة تحت الحمراء يبحث إلى الأمام من polybubble قبل وبعد تفعيل polybubbles مع ليزر 801 نانومتر بالقرب من الأشعة تحت الحمراء في ثماني أمبير لمدة خمس دقائق ثلاث مرات في الأسبوع لمدة أربعة أسابيع لبولي بوببلس PLGADA و 14 أسبوعا لبولي بوبل PCL-PCLTA.
في كل نقطة زمنية تجريبية، وجمع عظمى وإضافة 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني جديد إلى القارورة. ثم حساب الاختلافات في درجة الحرارة بين polybubbles قبل وبعد تنشيط الليزر على أساس قيم درجة الحرارة من الصور الأشعة تحت الحمراء تتطلع إلى الأمام. إضافة 10٪ على أساس CMC حل مائي النتائج في تعليق متعدد بوبل كاملة لصيانة ناجحة من الزخرق.
حقن البضائع في polybubble في غياب نتائج CMC في تسرب وما يترتب على ذلك من عدم الاحتفاظ البضائع داخل polybubble. لمعالجة هذا التسرب، يمكن زيادة لزوجة PCLTA باستخدام كربونات البوتاسيوم المعزولة بعد نهاية وضع حد للبولي كاببروكتون مع الترايكاريلات ويمكن زيادة لزوجة البضائع عن طريق خلط البضائع مع 5٪ CMC. اللزوجة من بوليبوببل PLGADA كافية لتسهيل تمركز البضائع ولا تتطلب تعديل عن طريق كربونات البوتاسيوم.
لاحظ أنه لا يوجد فرق مهم إحصائيا في الكفاءة الملزمة للجسم المضاد لوحظ بعد خلط فيروس نقص المناعة البشرية gp120/41 مستضد مع وبدون تريهالوس قبل حقن polybubble. ويلاحظ تأخر إطلاقات انفجار في polybubbles PLGADA مع acriflavine في منتصف في اليوم 19 لبولي بوبلز المحتضنة في 37 درجة مئوية وفي اليوم الخامس لبولي بوبلز المحتضنة في 50 درجة مئوية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن PLGADA polybubbles وPCL وPCLTA polybubbles التي تحتوي على قضبان نانو الذهب بنجاح الليزر تنشيط عدة مرات.
عند تشكيل polybubbles، يرجى الحرص على حماية الكواشف من الضوء وأيضا لاستخدام الحلول على الفور. بعد تطوير هذه التكنولوجيا، أردنا أيضا استكشاف أتمتة هذه العملية لتوسيع نطاق إنتاج polybubble.
