هذا البروتوكول مهم لأنه يسمح بالتحقيق في النظام الجلمفي في الثدييات الكبيرة ، وبالتالي يقربنا من فهم النظام الجلمفي في البشر. هناك ميزتان لهذه التقنية. إدخال آثار في ماجنا cisterna يتجنب أي ضرر مباشر للدماغ, وهو على النقيض من الحقن داخل البطين.
ثانيا، هذا هو النهج المباشر الذي يسمح التصور الفوري للكانون ومعرفة ما إذا كان أو لم يكن قد نجح. ابدأ بوضع الخنزير في وضع عرضة. بالبات الجزء الخلفي من رأسه ورقبته لتحديد ووضع علامة على قمة القذالي، والعمود الفقري للفقرات الصدرية الأولى، وقاعدة كل أذن.
رسم خط مستقيم بين قمة والفقرات على طول المحور الطولي. ثم بعد قاعدة الجمجمة، رسم خطين من قمة إلى قاعدة كل أذن. المشبك بعناية ذيل الحيوان ومشاهدة لرد الفعل لمعرفة ما اذا كان في نوم عميق.
ابدأ بإجراء شق جلدي على طول الخط الطولي وصولا إلى العضلات باستخدام مشرط مع شفرة رقم 21 ، ثم تمديد شقين عموديين على طول الكتفين ، كل منهما 10 إلى 15 سنتيمترا. بدءا من قمة القذالي، قم بعمل شقوق جلدية على طول الخط وصولا إلى قاعدة كل أذن. استخدام ملقط التشريحية لقبضة زوايا الجلد التي تشكلت في قمة القذالي، ثم تشغيل شفرة مشرط طفيفة على اللفافة لفصل الجلد من العضلات الكامنة.
استئصال الجلد على طول كل من الشقوق الخمسة لتصور أجزاء من العضلات trapezius. استخدام مشرط لجعل شق طولي ما يقرب من سنتيمتر واحد عميق حيث trapezius يأتي معا في منتصف الخط، ثم إجراء تشريح حادة على طول قطع طولية في العضلات باستخدام مزيج من ملقط الجراحية على التوالي والمنحنية، والتي سوف تفصل بين بطون trapezius والعضلات الكامنة شبه ثنائي الساقين التهاب الكبائر. قطع أي ألياف العضلات المستمرة مع مشرط والاستمرار في إجراء تشريح حاد حتى يصبح شبهpinalis التهاب الكبة المعقدة مرئية.
التحرك على طول الجانب الخلفي من الجمجمة وقطع أصول trapezius وشبهpinalis كابيتس ثنائي البطين العضلات. لفصل العضلات اثنين طوليا، استخدم ملقط الجراحية لإجراء تشريح حاد حتى شبهpinalis التهاب الكبة المعقدة مرئية تماما. ثم استخدم المتراجعات الاحتفاظ الذاتي للتراجع عن trapezius وشبهpinalis كابيتس ثنائي البطين العضلات.
استخدام مشرط لجعل شق طولي عميق سنتيمتر واحد حيث البطون من شبهpinalis capitis complexus معا في خط الوسط. إجراء تشريح حاد باستخدام ملقط الجراحية العمل على طول قطع طولي بين بطون العضلات حتى كل من أطلس والمحور واضح. التحرك على طول الجانب الخلفي من الجمجمة، وقطع أصول العضلات شبه النخاعية التهاب الكبة المعقدة.
استخدام مشرط وتشريح حاد لفصل العضلات طوليا من الفقرات الكامنة، ثم استخدام مجموعة أخرى من المتراجعين الذاتي الاحتفاظ لسحب عضلات التهاب الكبة شبهpinalis المعقدة. استخدم مشرطا لإزالة أي نسيج متبقي بعناية فوق المنطقة التي يلتقي فيها الأطلس بقاعدة الجمجمة. ضع ذراعا واحدة على رقبة الحيوان وإصبعا واحدا عند منعطف الأطلس والجمجمة ، ثم ارفع الرأس في وقت واحد واستعرض الرقبة أثناء الخفقان بإصبع للكشف عن ماجنا السيسترنا.
تأكد من أن شخصا واحدا يرفع وينثني رأس وعنق الحيوان بينما يخفق الآخر في الشهامة السيسترنا ، مع تدوين ملاحظة لموقعه التشريحي. إدخال قنية قياس 22 ببطء وبعناية في ماجنا cisterna من خلال دورا في زاوية مائلة إلى المحور الطولي، ثم سحب الإبرة من القنية ووضع غطاء على القفل. تبدأ مع تطبيق الغراء السوبر ومسرع حيث يدخل القنية الأنسجة، ثم تطبيق الاسمنت الأسنان.
انتظر خمس دقائق حتى يصلب الإسمنت. إزالة الغطاء بعناية من القنية. إرفاق القنية إلى نهاية الذكور من الصنبور خط الرابع مع التتبع باستخدام تمديد 10 سم.
حقن التتبع ببطء بمعدل 100 ميكرولتر في الدقيقة الواحدة إما باليد أو باستخدام مضخة ضخ صغيرة. قم بإزالة الصنبور الرابع واستبدالها بالغطاء. تحقق مما إذا كان التتبع مرئيا ينبض في قاعدة القنية.
ثم ضع أكياس الرمل تحت عنق الحيوان للحفاظ على بعض المرن. الإفراج عن الرأس وترك الحيوان في وضع عرضة للراحة. الإفراج عن الحفارات الذاتي الاحتفاظ واستبدال العضلات.
استخدام المشابك منشفة الجراحية لجمع الجلد معا على العضلات. أولا استخدام الشاش ثم بطانية لتغطية المشابك منشفة وشق للحد من فقدان الحرارة. السماح للمتتبع بالانتشار للفترة الزمنية المطلوبة.
يمكن أن توفر الصور العيانية المخيطة لسطح الدماغ الظهري رؤى مفصلة حول أنماط توزيع التتبع عبر الكبريت والشقوق. ويمكن لصور مماثلة من الأسطح البطنية والظرفية في الدماغ أن توفر معلومات عن توزيع التتبع في الفص الصدغي والتصدع الجانبي. يمكن أن تساعد صور سطح الدماغ للتكبير الأعلى المنتج باستخدام مجسم في تصور التتبع في PVS على طول الشرايين.
توفر أقسام الدماغ الإكليلية العيانية نظرة ثاقبة على عمق اختراق التتبع في الشق بين نصف الكرة الأرضية وتوزيع وبنية التتبع تحت القشرية ، مثل قرن آمون والم المخطط. تلطيخ المناعي الكيميائية لQP4، البروتين الحمضي الرجفان الدبقية، والعضلات الملساء أكتين أظهرت أن التتبع المترجمة داخل PVS، فضلا عن انتقلت إلى بارنشيما الدماغ. يتم تحديد عمليات القدم الخلايا الفلكية التي تشكل السطح الخارجي للPVS باستخدام AQP4 وتلطيخ البروتين الحمضي الرجفان الدبقية.
الخلايا البطانية التي تشكل السطح الداخلي للPVS ملطخة باستخدام الليكتين ووصمة عار GLUT-1. يحدد تلطيخ SMA الشرايين والشرايين ويمكن استخدامه لإظهار أن تدفق PVS يحدث على طول الشرايين بدلا من الأوردة ، مما يشكل الفسيولوجيا الأساسية للوظيفة الجلمفية الطبيعية. وفي المستقبل، نأمل في استكشاف النظام الجلمفي بدقة عالية في الثدييات الكبيرة في سياق علم الأمراض العصبية مثل السكتة الدماغية وإصابات الدماغ الرضية.
