يصف هذا البروتوكول تقنية موثوقة لإجراء ودراسة كسر عظم الفخذ على الفئران البالغة. هذه التقنية سهلة وسريعة وتتطلب الحد الأدنى من الأدوات ليتم تنفيذها. يسمح بتوصيف مراحل مختلفة من التئام الكسور.
قد يكافح الأفراد في البداية مع محاذاة نهايات الكسر بشكل صحيح وخلق كسور ثابتة بين الفئران. مع إيلاء اهتمام وثيق لموقع الكسر ، فإن إدخال الدبوس وإغلاق الجرح سيحسن نجاح هذه الجراحة. للبدء ، قم بإعداد الحيوان عن طريق حقن 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من البوبرينورفين تحت الجلد.
باستخدام أداة تشذيب كهربائية ، قم بحلاقة مربعين بمقدار سنتيمترين في سنتيمترين على كلا الفخذين المقابلة لموقع عظم الفخذ. تعقيم منطقة محلوقة باستخدام اليود وشطفها بمحلول الإيثانول بنسبة 70٪. قم بعمل شق طوله خمسة ملليمترات وكشف اللفافة الأساسية.
كشف العضلات التي تغطي عظم الفخذ عن طريق قطع اللفافة. افصل العضلة عن عظم الفخذ دون الإضرار بالأنسجة ، ثم افصل العضلات عن العظم وقم بتأمين عظم الفخذ لإجراء قطع. قم بعمل قطع عرضي في منتصف عمود عظم الفخذ.
أدخل إبرة توجيه عبر القسم البعيد من تجويف النخاع وادفع الخيط عبر مفصل الركبة. ثم قم بإزالة إبرة التوجيه وقم بإجراء مماثل من الطرف القريب. اترك الإبرة في الطرف القريب مع ظهور طرفها فوق الجلد.
أدخل دبوس تثبيت داخل طرف إبرة التوجيه، وادفعه بحيث يدخل التجويف القريب أثناء سحب إبرة التوجيه، ثم تخلص من إبرة التوجيه. قم بمحاذاة الطرف البعيد مع الطرف القريب بحيث يتم تمرير الخيط عبر تجويف النخاع البعيد عند خروجه من مفصل الركبة. اسحب طرف الدبوس باستخدام مشبك جراحي بحيث يتم سحب القسمين القريب والبعيد معا.
ثم قم بطي نهايات الدبوس الجراحي نحو موقع الكسر لإعادة محاذاة نهايات الكسر. باستخدام قواطع الأسلاك إزالة البلاستيك من قاعدة الإبرة. قم بلف نهايات الدبوس لتجنب أي إصابة داخلية في الأنسجة.
أخيرا ، استبدل العضلات على عظم الفخذ وأغلق فتحة الجرح عن طريق قرص الجلد مع مقاطع. قم بإجراء مماثل دون كسر عظم الفخذ على الساق الأخرى وأغلق الجرح. بعد الجراحة الناجحة ، كشف التصوير الفلوري عن العديد من أسلاف Messent-Kinal ، مثل الخلايا السمحاق الإيجابية Prx1 ، والتي تم العثور عليها أثناء عملية إصلاح كسر عظم الفخذ.
كشف تلطيخ ألسيان الأزرق لعظم الفخذ المكسور عن تكوين الكالس الناعم. علاوة على ذلك ، تم تحديد النسبة المئوية لتشكيل الكالس أو الغضروف أيضا. من خلال استخدام Micro-CT في حوالي 28 يوما بعد الكسر ، تم اكتشاف عملية التمعدن جنبا إلى جنب مع فجوة الكالس وفجوة الكسر.
ولوحظ أيضا أنه إذا لم تكن نهايات الكسر محاذاة بشكل صحيح أو مؤمنة بدبوس، فإن هناك نقصا في التكوين القاسي على كل أو جانب واحد من نهاية الكسر. عند محاولة هذا الإجراء تذكر محاذاة طرفي عظم الفخذ المكسور بعناية وتثبيتهما مع الدبوس لضمان الشفاء المناسب. بعد الجراحة ، يمكن جمع عظم الفخذ للتصوير والتحليل الجزيئي.
