Bu protokol, yetişkin farelerde femur kırığı gerçekleştirmek ve incelemek için güvenilir bir tekniği tanımlar. Bu teknik kolay, hızlıdır ve gerçekleştirilmesi gereken minimum araçları gerektirir. Kırık iyileşmesinin farklı aşamalarının karakterizasyonuna izin verir.
Bireyler başlangıçta kırık uçlarını düzgün bir şekilde hizalamak ve fareler arasında tutarlı kırıklar oluşturmak için mücadele edebilirler. Kırık bölgesine, pimin yerleştirilmesine ve yaranın kapatılmasına çok dikkat edilmesi bu ameliyatın başarısını artıracaktır. Başlamak için, hayvanı deri altından kilogram buprenorfin başına 0.05 miligram enjekte ederek hazırlayın.
Bir elektrikli düzeltici kullanarak, femur konumuna karşılık gelen her iki uylukta iki x iki santimetre karelik bir tıraş edin. Tıraşlı bir alanı iyot kullanarak sterilize edin ve% 70 etanol çözeltisi ile durulayın. Beş milimetrelik bir kesi yapın ve altta yatan fasyayı ortaya çıkarın.
Fasyayı keserek femuru kaplayan kası açığa çıkarın. Kasları dokuya zarar vermeden femurdan ayırın, ardından kası kemikten ayırın ve bir kesim yapmak için femuru sabitleyin. Femur milinin ortasında enine bir kesim yapın.
İlik boşluğunun distal bölümünden bir kılavuz iğne yerleştirin ve ipliği diz eklemi boyunca itin. Ardından, kılavuz iğneyi çıkarın ve proksimal uçtan benzer bir prosedür uygulayın. İğneyi proksimal uçta bırakın, ucu cildin üzerinde belirmiştir.
Kılavuz iğnenin ucuna dengeleyici bir pim yerleştirin, kılavuz iğne dışarı çekilirken proksimal boşluğa girecek şekilde itin, ardından kılavuz iğneyi atın. Distal ucu proksimal uçla hizalayın, böylece iplik diz ekleminden çıkarken distal kemik iliği boşluğundan geçirilir. Cerrahi bir kelepçe kullanarak pimin ucunu çekin, böylece proksimal ve distal bölümler birlikte çekilir.
Daha sonra kırık uçlarını yeniden hizalamak için cerrahi pimin uçlarını kırık bölgesine doğru katlayın. Tel kesicilerin kullanılması, plastiği iğnenin tabanından çıkarın. Herhangi bir iç doku hasarını önlemek için pimin uçlarını bükün.
Son olarak, kasları femur üzerine yerleştirin ve cildi klipslerle birlikte sıkıştırarak yara açıklığını kapatın. Diğer bacakta femur kırığı olmadan da benzer bir işlem yapın ve yarayı kapatın. Başarılı ameliyatı takiben, floresan görüntüleme, femur kırığı onarım sürecinde bulunan Prx1-pozitif periosteal hücreler gibi çeşitli Messent-Kinal progenitörleri ortaya çıkardı.
Kırık femurda Alcian mavisi boyanması yumuşak nasır oluşumunu ortaya çıkardı. Ayrıca, nasır veya kıkırdak oluşumunun yüzdesi de belirlendi. Kırıktan yaklaşık 28 gün sonra Micro-CT kullanılarak, mineralizasyon işlemi nasır boşluğu ve kırık boşluğu ile birlikte tespit edildi.
Ayrıca, kırık uçları düzgün bir şekilde hizalanmamış veya bir pim ile sabitlenmemişse, kırık ucunun tamamında veya bir tarafında duyarsız oluşum eksikliği olduğu gözlenmiştir. Bu prosedürü denerken, kırık femurun iki ucunu dikkatlice hizalamayı ve uygun iyileşmeyi sağlamak için pimle stabilize etmeyi unutmayın. Ameliyattan sonra görüntüleme ve moleküler analiz için femora toplanabilir.
