استخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية من حمض الكانابيديول من الكتلة الحيوية للقنب

يوضح هذا البروتوكول العملية الكاملة لاستخراج اتفاقية التنوع البيولوجي ، بدءا من إعداد المواد واستخراج المذيبات وقياس محتوى اتفاقية التنوع البيولوجي. من خلال اقتراح تركيز المذيبات والمذيبات الأمثل ، تقضي هذه الطريقة على العمليات غير الضرورية ويمكن أن تساعد في استخراج المذيبات بكفاءة للأغراض الصناعية. ابدأ بالحصول على نورات نبيذ الكرز من النباتات المزروعة في الحقل.

جفف النورات في الهواء عند 35 درجة مئوية لمدة 48 ساعة. طحن النورات باستخدام آلة طحن مضبوطة على 177 ميكرومتر. مرر المادة المسحوقة من خلال غربال الشبكة رقم 80 وخزن المسحوق في كيس مغلق في درجة حرارة الغرفة.

في أنبوب مخروطي 50 ملليلتر ، يزن 0.5 جرام من مسحوق نورات القنب. أضف 40 ملليلتر من 50٪ من الإيثانول المحضر في ماء منزوع الأيونات. ضع وعاء الاستخراج في حمام بالموجات فوق الصوتية على درجة حرارة الغرفة المحددة 40 كيلوهرتز.

قم بإجراء الاستخراج لمدة 30 دقيقة ، مما يزيد من درجة حرارة الحمام من 25 إلى 30 درجة مئوية. بعد الصوتنة ، صب سائل الاستخراج في أنبوب طرد مركزي. الطرد المركزي للسائل في 3000 مرة G عند 15 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

قم بتصفية السوبرناتانت من خلال ورقة ترشيح 8 ميكرومتر تحت الفراغ. تمييع معايير القنب إلى تركيزات تشغيلية تبلغ 100 و 50 و 25 و 12.5 ميكروغرام لكل ملليلتر في 100٪ ميثانول. امزج وسونيكات لمدة خمس دقائق في حمام بالموجات فوق الصوتية بسرعة 40 كيلوهرتز وقوة صوتنة تبلغ 100 واط.

قم بتصفية المعايير وعينة القنب الفائقة من خلال مرشح حقنة بولي تترافلورو إيثيلين بسعة 0.45 ميكرومتر. ضع العينات في قوارير 1.5 ملليلتر ، وضعها في جهاز أخذ العينات التلقائي HPLC. قم بتحميل 10 ميكرولترات من العينة وقم بتشغيل HPLC باستخدام المعلمات الموضحة في هذا الجدول.

توليد منحنى قياسي واشتقاق تركيزات القنب في 50 إلى 200 ميكروغرام لكل ملليلتر. احسب وزن القنب بالميكروغرام عن طريق الضرب مع حجم المذيب المستخدم في عملية الاستخراج ، وتحويل القيمة إلى ملليغرام عن طريق قسمتها على 1000. قسمة هذه القيمة على وزن المادة النباتية المستخدمة في الاستخراج للحصول على ملليغرام لكل غرام من الوزن الجاف.

أظهر تحليل HPLC أنه عند استخدام مذيبات 100٪ ، كان الأسيتونيتريل أكثر ملاءمة لاستخراج القنب الفردي. ومع ذلك ، تم فحص الإيثانول بشكل أكبر بسبب أدنى سمية على الإطلاق. أظهر تقييم تأثير الإيثانول المائي على تركيز القنب المستخرج أن الحد الأقصى للاستخراج لوحظ عند 50٪ من الإيثانول.

كانت هناك زيادة بنسبة 39.7٪ على الإيثانول المطلق لاستخراج CBDA. كما تم تخفيض مستوى THCA بنسبة 20.3٪ باستخدام نهج تصميم التجربة ، تم تحسين استخراج CBDA بالإضافة إلى CBD. أكد تحليل منهجية سطح الاستجابة المعلمات المثالية مثل الاستخراج لمدة 30 دقيقة ، و 53.4٪ من الإيثانول في الماء ، ونسبة 1 إلى 100 عينة إلى مذيب.

تم الحصول على كمية أعلى من CBDA باستخدام طريقة الاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية مقارنة بطريقة النقع. كما تضاعفت كمية CBD المستخرجة باستخدام طريقة الموجات فوق الصوتية ، مما يشير إلى كفاءة أعلى لاستخراج القنب. من المهم أن نتذكر نسبة العينة إلى المذيبات ووقت الاستخراج وتركيز المذيبات.

الأمثل من خلال هذه الدراسة. يمكن تنفيذ هذا الإجراء لاستخراج القنب الأخرى من القنب.