이 프로토콜은 재료 준비, 용매 추출 및 CBD 함량 측정에서 시작하여 CBD 추출의 전체 과정을 보여줍니다. 최적화된 용매 및 용매 농도를 제안함으로써, 이 방법은 불필요한 공정을 제거하고 산업 목적을 위한 효율적인 용매 추출에 도움이 될 수 있다. 들판에서 자란 식물에서 체리 와인 꽃차례를 얻는 것으로 시작하십시오.
공기는 꽃차례를 섭씨 35도에서 48 시간 동안 건조시킵니다. 177 마이크로미터로 설정된 분쇄기를 사용하여 꽃차례를 분쇄하십시오. 분쇄 된 재료를 80 메쉬 체를 통해 통과시키고 실온에서 밀봉 된 백에 분말을 보관하십시오.
50 밀리리터 원뿔형 튜브에서 대마초 꽃차례 분말의 무게는 0.5 그램입니다. 탈이온수에서 준비된 40 밀리리터의 50 % 에탄올을 첨가하십시오. 추출 용기를 실온으로 설정된 40 킬로헤르츠로 설정된 초음파 욕조에 넣으십시오.
30 분 동안 추출을 수행하고 욕조의 온도를 섭씨 25도에서 30도까지 올립니다. 초음파 처리 후, 추출 유체를 원심분리 튜브에 데칸트한다. 유체를 섭씨 15도에서 3000배 G에서 15분 동안 원심분리한다.
진공 하에서 8 마이크로미터 여과지를 통해 상층액을 여과하십시오. 칸 나비 노이드 표준을 100 % 메탄올에서 밀리리터 당 100, 50, 25 및 12.5 마이크로 그램의 작동 농도로 희석하십시오. 40 킬로 헤르쯔와 100 와트의 초음파 처리 전력으로 설정된 초음파 욕조에서 5 분 동안 혼합하고 초음파 처리하십시오.
표준 및 대마초 샘플 상청액을 0.45-마이크로미터 폴리테트라플루오로에틸렌 시린지 필터를 통해 여과한다. 샘플을 1.5 밀리리터 바이알에 넣고, 이를 HPLC 자동 시료 주입기에 넣는다. 10 마이크로리터의 샘플을 로딩하고, 이 표에 나타낸 파라미터를 사용하여 HPLC를 실행한다.
표준 곡선을 생성하고 밀리리터 당 50 ~ 200 마이크로 그램의 칸 나비 노이드 농도를 도출하십시오. 추출 공정에 사용 된 용매의 부피와 곱하여 마이크로 그램의 칸 나비 노이드의 무게를 계산하고 1, 000으로 나누어 값을 밀리그램으로 변환합니다. 이 값을 추출에 사용된 식물 재료의 중량으로 나누어 건조 중량 그램당 밀리그램을 구한다.
HPLC 분석은 100 % 용매를 사용할 때 아세토 니트릴이 개별 칸 나비 노이드의 추출에 가장 유리하다는 것을 보여주었습니다. 그러나, 에탄올은 모두의 가장 낮은 독성으로 인해 추가로 조사되었다. 추출된 칸나비노이드의 농도에 대한 수성 에탄올의 영향에 대한 평가는 최대 추출이 50% 에탄올에서 관찰되었다는 것을 보여주었다.
CBDA의 추출을 위해 절대 에탄올에 비해 39.7 % 증가가있었습니다. THCA의 수준도 20.3 % 감소했으며 실험 설계 접근법을 사용하여 CBDA와 CBD의 추출이 최적화되었습니다. 반응 표면 방법론 분석은 30 분 추출, 물에서 53.4 % 에탄올, 및 1 ~ 100 샘플 대 용매 비율로 이상적인 매개 변수를 확인했습니다.
침윤 방법에 비해 초음파 보조 추출 방법을 사용하여 더 많은 양의 CBDA를 얻을 수있었습니다. 추출 된 CBD의 양은 또한 초음파 방법을 사용하여 두 배로 증가하여 칸 나비 노이드 추출에 대한 더 높은 효율을 나타냅니다. 시료 대 용매 비율, 추출 시간 및 용매 농도를 기억하는 것이 중요합니다.
이 연구에 의해 최적화되었습니다. 이 절차는 대마에서 다른 칸 나비 노이드를 추출하기 위해 수행 할 수 있습니다.
