Dieses Protokoll demonstriert den gesamten Prozess der CBD-Extraktion, beginnend mit der Vorbereitung des Materials, der Lösungsmittelextraktion und der Messung des CBD-Gehalts. Durch den Vorschlag der optimierten Lösungsmittel- und Lösungsmittelkonzentration eliminiert diese Methode unnötige Prozesse und kann zu einer effizienten Lösungsmittelextraktion für industrielle Zwecke beitragen. Beginnen Sie damit, Kirschweinblütenstände von Pflanzen zu erhalten, die auf dem Feld angebaut werden.
Trocknen Sie die Blütenstände 48 Stunden lang bei 35 Grad Celsius an der Luft. Schleifen Sie die Blütenstände mit einer Schleifmaschine, die auf 177 Mikrometer eingestellt ist. Führen Sie das pulverisierte Material durch das Maschensieb Nummer 80 und lagern Sie das Pulver in einem versiegelten Beutel bei Raumtemperatur.
Wiegen Sie in einem 50-Milliliter-Konusröhrchen 0,5 Gramm des Cannabis-Blütenstandpulvers. Fügen Sie 40 Milliliter 50% Ethanol hinzu, das in entionisiertem Wasser hergestellt wurde. Stellen Sie das Absauggefäß in ein Ultraschallbadset bei 40 Kilohertz eingestellter Raumtemperatur.
Führen Sie die Extraktion für 30 Minuten durch und erhöhen Sie die Temperatur des Bades von 25 auf 30 Grad Celsius. Nach der Beschallung die Extraktionsflüssigkeit in ein Zentrifugenröhrchen dekantieren. Zentrifugieren Sie die Flüssigkeit bei 3000-fach G bei 15 Grad Celsius für 15 Minuten.
Filtern Sie den Überstand durch ein 8-Mikrometer-Filterpapier unter Vakuum. Verdünnen Sie die Cannabinoidstandards auf Betriebskonzentrationen von 100, 50, 25 und 12,5 Mikrogramm pro Milliliter in 100%methanol. Mischen und beschallen Sie fünf Minuten lang in einem Ultraschallbad, das auf 40 Kilohertz und eine Beschallungsleistung von 100 Watt eingestellt ist.
Filtern Sie die Standards und den Überstand der Cannabisprobe durch einen 0,45 Mikrometer langen Polytetrafluorethylen-Spritzenfilter. Geben Sie die Proben in 1,5-Milliliter-Fläschchen und legen Sie sie in den HPLC-Autosampler. Laden Sie 10 Mikroliter der Probe und führen Sie die HPLC mit den in dieser Tabelle aufgeführten Parametern aus.
Erzeugen Sie eine Standardkurve und leiten Sie Cannabinoidkonzentrationen in 50 bis 200 Mikrogramm pro Milliliter ab. Berechnen Sie das Gewicht der Cannabinoide in Mikrogramm, indem Sie mit dem Volumen des im Extraktionsprozess verwendeten Lösungsmittels multiplizieren, konvertieren Sie den Wert in Milligramm, indem Sie ihn durch 1.000 dividieren. Teilen Sie diesen Wert durch das Gewicht des Pflanzenmaterials, das bei der Extraktion verwendet wird, um Milligramm pro Gramm Trockengewicht zu erhalten.
Die HPLC-Analyse zeigte, dass Acetonitril bei Verwendung von 100% Lösungsmitteln für die Extraktion einzelner Cannabinoide am günstigsten war. Ethanol wurde jedoch aufgrund der niedrigsten Toxizität von allen weiter untersucht. Die Bewertung des Einflusses von wässrigem Ethanol auf die Konzentration extrahierter Cannabinoide zeigte, dass die maximale Extraktion bei 50% Ethanol beobachtet wurde.
Bei der Extraktion von CBDA gab es einen Anstieg von 39,7% gegenüber dem absoluten Ethanol. Der THCA-Gehalt wurde ebenfalls um 20,3% reduziertMit dem Design-of-Experiment-Ansatz wurde die Extraktion von CBDA plus CBD optimiert. Die Analyse der Response-Oberflächenmethodik bestätigte die idealen Parameter wie 30-minütige Extraktion, 53,4% Ethanol in Wasser und 1 bis 100 Proben-Lösungsmittel-Verhältnis.
Eine höhere Menge an CBDA wurde mit der ultraschallgestützten Extraktionsmethode im Vergleich zur Mazerationsmethode erhalten. Die Menge an extrahiertem CBD verdoppelte sich auch mit der Ultraschallmethode, was auf eine höhere Effizienz bei der Cannabinoidextraktion hinweist. Es ist wichtig, sich an das Verhältnis von Probe zu Lösungsmittel, die Extraktionszeit und die Lösungsmittelkonzentration zu erinnern.
optimiert durch diese Studie. Dieses Verfahren kann zur Extraktion anderer Cannabinoide aus Hanf durchgeführt werden.
