Bu protokol, malzemenin hazırlanmasından, çözücü ekstraksiyonundan ve CBD içeriğinin ölçülmesinden başlayarak CBD ekstraksiyonunun tüm sürecini gösterir. Optimize edilmiş çözücü ve çözücü konsantrasyonunu önererek, bu yöntem gereksiz işlemleri ortadan kaldırır ve endüstriyel amaçlar için verimli çözücü ekstraksiyonuna yardımcı olabilir. Tarlada yetişen bitkilerden Kiraz Şarabı salkımını elde ederek başlayın.
Hava, salkımları 48 saat boyunca 35 santigrat derecede kurutur. 177 mikrometreye ayarlanmış bir taşlama makinesi kullanarak salkımları öğütün. Toz haline getirilmiş malzemeyi 80 numaralı ağ eleğinden geçirin ve tozu oda sıcaklığında kapalı bir torbada saklayın.
50 mililitrelik konik bir tüpte, esrar salkımının 0.5 gram ağırlığındadır. Deiyonize suda hazırlanan 40 mililitre% 50 etanol ekleyin. Ekstraksiyon kabını 40 kilohertz set oda sıcaklığında ayarlanmış bir ultrasonik banyoya yerleştirin.
Ekstraksiyonu 30 dakika boyunca gerçekleştirin, banyonun sıcaklığını 25 ila 30 santigrat derece arttırın. Sonikasyondan sonra, ekstraksiyon sıvısını bir santrifüj tüpüne boşaltın. Sıvıyı 15 dakika boyunca 15 santigrat derecede 3000 kez G'de santrifüj yapın.
Süpernatantı vakum altında 8 mikrometrelik bir filtre kağıdından süzün. Kannabinoid standartlarını% 100 metanol içinde mililitre başına 100, 50, 25 ve 12.5 mikrogram çalışma konsantrasyonlarına seyreltin. 40 kilohertz ve 100 watt sonikasyon gücünde ayarlanmış ultrasonik bir banyoda beş dakika boyunca karıştırın ve sonikleştirin.
Standartları ve esrar numunesi süpernatantını 0,45 mikrometrelik politetrafloroetilen şırınga filtresinden filtreleyin. Numuneleri 1,5 mililitrelik şişelere koyun ve HPLC otomatik numune alma cihazına yerleştirin. Numunenin 10 mikrolitresini yükleyin ve bu tabloda gösterilen parametreleri kullanarak HPLC'yi çalıştırın.
Standart bir eğri oluşturun ve mililitre başına 50 ila 200 mikrogram arasında kanabinoid konsantrasyonları elde edin. Ekstraksiyon işleminde kullanılan çözücünün hacmiyle çarparak kannabinoidlerin ağırlığını mikrogram cinsinden hesaplayın, değeri 1.000'e bölerek miligramlara dönüştürün. Bu değeri, kuru ağırlığın gramı başına miligram elde etmek için ekstraksiyonda kullanılan bitki materyalinin ağırlığına bölün.
HPLC analizi,% 100 çözücüler kullanıldığında, asetonitrilin bireysel kanabinoidlerin ekstraksiyonu için en uygun olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, etanol, hepsinin en düşük toksisitesi nedeniyle daha fazla incelenmiştir. Sulu etanolün ekstrakte edilen kanabinoidlerin konsantrasyonu üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi, maksimum ekstraksiyonun% 50 etanolde gözlendiğini göstermiştir.
CBDA'nın ekstraksiyonu için mutlak etanol üzerinde% 39.7'lik bir artış vardı. THCA seviyesi de% 20.3 oranında azaltıldı Deney tasarımı yaklaşımını kullanarak, CBDA artı CBD'nin çıkarılması optimize edildi. Yanıt yüzeyi metodolojisi analizi, ideal parametreleri 30 dakikalık ekstraksiyon, suda% 53,4 etanol ve 1 ila 100 numune-çözücü oranı olarak doğruladı.
Maserasyon yöntemine kıyasla ultrasonik destekli ekstraksiyon yöntemi kullanılarak daha yüksek miktarda CBDA elde edildi. Ekstrakte edilen CBD miktarı da ultrasonik yöntem kullanılarak iki katına çıkarıldı ve kanabinoid ekstraksiyonu için daha yüksek verimlilik gösterdi. Numunenin çözücü oranını, ekstraksiyon süresini ve çözücü konsantrasyonunu hatırlamak önemlidir.
bu çalışma tarafından optimize edilmiştir. Bu prosedür, diğer kanabinoidlerin kenevirden çıkarılması için gerçekleştirilebilir.
