سيساعد البروتوكول في توفير نهج تدريجي للإجراء غير المستقر لزراعة البنكرياس في نماذج الخنازير. تتبع هذه التقنية تقريبا نفس الخطوات التي لوحظت في البشر ، وبالتالي فهي أقرب نموذج ممكن لتكراره في الممارسة السريرية. الهياكل الحشوية الخنازير والأوعية هشة للغاية عند مقارنتها بالبشر.
وبالتالي ، فإن هذا يمثل التحدي الأكبر لأي شخص يقوم بإجراء الجراحة لأول مرة. ابدأ بعمل شق في خط الوسط من xiphisternum إلى الارتفاق العاني باستخدام وضع القطع النقي لكوي Bovie. تأكد من الحفاظ على الجانب الجانبي لمجرى البول في الجزء السفلي من الشق خارج القضيب لتجنب الإصابة.
ضع مبعثر جدار البطن الذي يحتفظ بنفسه لتجنب إصابة الطحال والكبد ، لتحسين التعرض للمجال الجراحي. لتعبئة رأس البنكرياس ، قم بتوفير الطرح المعاكس لأخدود البنكرياس الاثني عشر بمساعدة المساعد. تشريح على طول المستوى اللفافة اللاوعائية بين الفص الاثني عشر لحمة البنكرياس في IVC تحت الكبد.
ابدأ تعبئة حلقة البنكرياس عن طريق تشريح اللفافة على جانبي الوريد البابي لضمان التعبئة الكاملة للفص المتصل من الوريد البابي العلوي. الطريقة الأكثر أمانا هي البدء في التشريح على جانبي الوريد البابي وفصل الأنسجة في اتجاه عقارب الساعة أو عكس اتجاه عقارب الساعة. بعد ذلك ، حدد التقاطع بين أنسجة البنكرياس والأنسجة الأبوية وابدأ في تشريح الذيل من الوريد الطحال الأساسي ، والبقاء بالقرب من الحمة.
اربط وقسم الروافد الوريدية الصغيرة إلى الحمة ، مع الحرص على عدم إصابة الوريد الطحال ، باستخدام روابط الحرير 3-0. لتعبئة جسم البنكرياس ، تشريح على طول الطبقة الرقيقة من الأنسجة التي تفصل الحمة عن الأمعاء الغليظة والمعدة ، والحفاظ على ممر الأوعية الدموية رقيقة على طول المنطقة تحت الحمراء. ثم بالنسبة لتعبئة البنكرياس والاثني عشر ، افصل الحمة عن الحلقة C للثنائي عن طريق التشريح الحاد في أخدود البنكرياس والاثني عشر عن طريق الجر ، والطرح المضاد ، والحفاظ على الممرات الوعائية الرقيقة على طول الحلقة C من الاثني عشر.
بعد ذلك ، حدد قناة البنكرياس. ربط مع الحرير 2-0 العلاقات وتقسيمها ، والحفاظ على حوالي ثلاثة إلى خمسة ملليمترات الجذع من القناة على حلقة C الاثني عشر ، والابتعاد عن ممر الأوعية الدموية الاثني عشر. أكمل الجزء الأخير من التعبئة عن طريق تشريح الحمة من الوصلة بين الفص الواصل والاثني عشر والقولون على جانبي الوريد البابي.
استخراج العينة في الكتلة عن طريق تقسيم الفص المتصل على الجانب الأمامي من الوريد البابي. مطلوب تقسيم متني لاستخراج العينة بسبب موقعها المحيطي حول الوريد البابي. تأكد من الارقاء على طول مناطق التشريح وفحص الاثني عشر بحثا عن أي إصابة واحتقان الأوعية الدموية.
تحضير الوريد البابي الكسب غير المشروع ونهاية الأبهر القريب عن طريق تقليم حواف مفاغرة. ضع الكسب غير المشروع المحضر في كيس الأعضاء بمحلول UW في حمام جليدي. خذ خزعات الإبرة الأساسية من ذيل البنكرياس ، وقم بتخزينها في الفورمالين ، وقم بتجميدها بشكل مفاجئ.
استخراج الحمض النووي الريبي في مرحلة لاحقة. خياطة موقع الخزعة باستخدام Prolene 6-0 بطريقة الرقم ثمانية. ابدأ تسلخ الشريان الأورطي عن طريق تحديد الحالب الأيمن وتشريح على طول اللفافة ، وفصل الحالب عن الغطاء خلف الصفاق فوق الوريد الأجوف السفلي.
تشريح على طول الحدود الجانبية للشريان الأورطي لكشفه من العضلة النعلية الكامنة. بعد ذلك ، تشريح على طول الأخدود بين الأبهر لفصل الشريان الأورطي عن IVC. ضمان التعبئة الكافية للشريان الأورطي و IVC من خلال تجربة وضع المشبك الوعائي لساتينسكي.
تبديل الموقف مع المساعد الأول وإعداد المجال الجراحي عن طريق سحب حلقات الأمعاء على الجانب الأيسر لفضح الأوعية الرئيسية لمفاغرة. ضع المشابك التجريبية على IVC والشريان الأورطي لإعادة تقييم التعبئة الكافية لكلا الوعاءين من أجل مفاغرة. بعد وضع مشبك العض الجانبي الوعائي في IVC ، قم بعمل فتحة صغيرة في الجدار الأمامي للوعاء وقم بتمديده إلى حجم مناسب من الناحية القحفية والذيلية باستخدام مقص بوتس.
اغسل التجويف بمحلول ملحي هيبارين باستخدام الغلاف المرن للقنية الوريدية. باستخدام إبرة Prolene 6-0 المزدوجة ، قم بعمل خيوط زاوية من الداخل إلى الخارج على IVC والوريد البابي الكسب غير المشروع. قم بتأمين خياطة زاوية التدليل ، وقم بتشغيل إحدى الإبر على طول الجدار الخلفي للكسب غير المشروع والوريد المتلقي بطريقة مستمرة.
قم بتأمين الجدار الأمامي بطريقة مستمرة من الخارج إلى الخارج ، وقم بتأمين العقدة في وسط الجدار الأمامي بعد تنظيف تجويف المفاغرة بمحلول ملحي من الهيبارين. ثم ضع مشبك بولدوغ الوعائي على الوريد البابي الكسب غير المشروع بعيدا عن مفاغرة ، وحرر ببطء مشبك العض الجانبي من IVC المتلقي. تحقق من إعادة التعبئة الوريدية ، وأي نزيف كبير من مفاغرة.
بعد ذلك ، ضع المشبك الجانبي على الشريان الأورطي دون إصابة الفروع القطنية على طول الجدار الخلفي للوعاء. اطلب من طبيب التخدير حقن الهيبارين وميثيل بريدنيزولون من خلال القسطرة الوريدية المركزية. قم بعمل فتحة على الجدار الأمامي للوعاء ، وقم بتمديده بشكل قحفي وذيلي ، مع الحرص على عدم تشريح جدار الوعاء الدموي.
اغسل التجويف بمحلول ملحي هيبارين. وباستخدام إبرة Prolene 6-0 المزدوجة ، قم بخياطة الطرف القريب من الشريان الأورطي الكسب غير المشروع إلى فتحة الأبهر المتلقي بشكل مستمر بواسطة تقنية المظلة. اغسل التجويف بمحلول ملحي هيبارين قبل ربط العقدة النهائية على الجدار الأمامي للوعاء.
قبل الشروع في إعادة التروية ، تحقق من تغيرات الدورة الدموية بحثا عن أي انخفاض حاد في متوسط ضغط الدم. راقب ضغط الدم الغازي من دقيقة إلى دقيقة ، وقم بإجراء معايرة جرعة من الضاغط الوعائي والتحميل المسبق للسوائل للحفاظ على متوسط ضغط الدم المستهدف بين 45 إلى 50 ملم من الزئبق. ثم حافظ على الإرقاء بعد إزالة مشبك البلدغ من الوريد عن طريق تقييم أي نزيف كبير من الحمة ومنطقة الأبهر ومنطقة المحيط. حرر المشبك الأبهري وتحقق من وجود نزيف من موقع مفاغرة الشرايين.
تأمين نقاط النزيف مع الأربطة وخياطة مرقئ. اطلب من طبيب التخدير حقن قنينة من حمض الترانيكساميك من خلال القسطرة الوريدية المركزية. من الضروري تقليل التعامل العدواني مع البنكرياس خلال هذه المرحلة من التروية لتجنب وذمة الكسب غير المشروع والورم الدموي.
بعد التأكد من عدم حدوث التواء مساريقي ، اعزل حلقة من الصائم على بعد 40 إلى 50 سم من تقاطع الاثني عشر ، واجعلها قريبة من الكسب غير المشروع. مفاغرة الاثني عشر الكسب غير المشروع إلى الصائم المتلقي بطريقة مستمرة جنبا إلى جنب باستخدام خياطة polydioxanone 4-0. تأكيد الارقاء حول الكسب غير المشروع وفي مواقع مفاغرة.
ثم خذ ثلاث خزعات إبرة أساسية من ذيل البنكرياس بعد ساعة واحدة من إعادة التروية. تخزينها في الفورمالين ، تجميد المفاجئة ، واستخراج الحمض النووي الريبي في وقت لاحق. خياطة موقع الخزعة مع Prolene 6-0 بطريقة الرقم ثمانية.
بعد تقييم المماسح المحتفظ بها وتأمين الإرقاء ، قم بخياطة المستقيم البطني بطريقة مستمرة باستخدام إبرة polydioxanone 0 ، مع إبقاء خط الوسط السفلي بعيدا عن مجرى البول. أغلق الجلد باستخدام خيوط الحرير 0 المستمرة. قم بإنشاء نفق تحت الجلد على الرقبة ، وقم بتأمين القسطرة الوريدية المركزية عن طريق دفنها تحت النفق وخياطة الجلد المغطي بإبرة قطع من الحرير 0-0.
بعد التأكد من استقرار متوسط ضغط الدم واتجاه محسن لمستويات الأس الهيدروجيني واللاكتات في تحليل غازات الدم ، قم بإزالة القسطرة الشريانية وربط الوعاء لتأمين الإرقاء في الرقبة. أغلق الجلد المغطي بخيط Silk 0 بطريقة مستمرة. كان متوسط معدل ضربات القلب بعد ساعة واحدة من إعادة التروية 135 نبضة في الدقيقة في المتوسط ، وكان متوسط ضغط الدم حوالي 37 ملليلتر من الزئبق.
تم الحفاظ على هذه المستويات تحت جرعة عالية من ضخ بافراز التي يمكن أن تتناقص وتوقف في جميع الحالات الخمس قبل إعادة الحيوان إلى قلمه. تمت مراقبة مستويات اللاكتات في غرفة العمليات لمدة ثلاث ساعات بعد إعادة التروية. كانت جميع الحيوانات الخمسة في حالة تأهب سريري ، ويتضح ذلك من خلال الحركة النشطة للأطراف وأنماط التنفس في غضون خمس إلى ست ساعات من إعادة التروية.
تمت مراقبة مستويات الأميليز بعد العملية الجراحية ، والليباز في الدم ، ونازعة هيدروجيناز اللاكتات في الدم خلال الأيام الثلاثة الأولى. تم إجراء اختبار تحمل الجلوكوز لمدة 120 دقيقة في اليوم الثالث بعد الجراحة. تم بعد ذلك سحب عينات الدم ومعالجتها لمستويات الجلوكوز في دقيقتين وخمس دقائق و 10 دقائق و 20 دقيقة و 30 دقيقة و 60 دقيقة و 90 دقيقة و 120 دقيقة.
يعد التعامل الدقيق مع الممرات الوعائية حول البنكرياس أثناء استئصال البنكرياس أمرا بالغ الأهمية. ويضمن تنفيذ هذه الخطوة بعناية إمدادا جيدا للأوعية الدموية إلى الاثني عشر في نهاية الجراحة ، والذي بدوره يعد محددا رئيسيا للنجاح بعد استئصال البنكرياس. لقد فتحت هذه التقنية خيار نضح الماكينة مع الزرع في نماذج الخنازير ، وإنشاء نماذج البقاء على قيد الحياة.
