هذا البروتوكول مهم ، لأنه يوفر طريقة مباشرة وفعالة من حيث التكلفة لقياس درجة حرارة العضلات الهيكلية. علاوة على ذلك ، يمكن استخدامه في سياقات مختلفة وتحت تحفيز العوامل الدوائية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي عدد الحيوانات التي يمكن اختبارها في وقت واحد.
الحد الأدنى من اضطراب الحيوانات الموصوف هنا ، يتجنب الحاجة إلى طرق عالية التقنية مثل التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء. قد يواجه الأفراد صعوبة في قياس درجة حرارة الحيوانات داخل قفص المنزل أو على أجهزة المشي أثناء الحركة. يمكن التخفيف من ذلك من خلال ممارسة تقنيات القياس أثناء تجارب التعود.
ابدأ بتسخين أجهزة الإرسال والاستقبال المغلقة بين أيدي القفاز وتأكد من الحفاظ على العقم أثناء العمل مع أجهزة الإرسال والاستقبال. قم بقياس درجة الحرارة باستخدام ماسح ضوئي لدرجة الحرارة وتحقق مما إذا كان جهاز الإرسال والاستقبال يقرأ تغيرات درجة الحرارة. بعد تخدير الفأر كما هو موضح في المخطوطة ، استخدم المقص الجراحي لعمل قطع ضحل عبر الجلد على الطرف الخلفي الأيمن.
ضع الحافة الحادة لجهاز الإرسال والاستقبال المعقم المبرمج مسبقا وغير المغطى في الشق ، بالتوازي مع gastrocnemius. تأكد من أن المكبس الأخضر متجها لأعلى ومرئي. استمر في دفع قضيب جهاز الإرسال والاستقبال في الشق حتى تصبح فتحة قضيب جهاز الإرسال والاستقبال غير مرئية.
أدر القضيب عند 180 درجة ، بحيث يكون المكبس الأخضر متجها لأسفل نحو طرف الفأر ولم يعد مرئيا للمجريب. بمجرد وضع قضيب جهاز الإرسال والاستقبال بجوار الساق أو محاطا به جزئيا ، ادفع المكبس الأخضر ، مما يسمح لضغط القضيب بتوجيه يد المحقق بعيدا عن الماوس. باستخدام ملقط ، امسك الجلد المفتوح معا.
ضع مشبك الجرح بمشبك تلقائي معقم ، ثني إذا لزم الأمر. استخدم الغرز القابلة للامتصاص قبل المشبك التلقائي المعقم لإغلاق طبقة اللفافة. باستخدام قارئ جهاز الإرسال والاستقبال ، تحقق من درجة حرارة عضلة الماوس.
بعد إزالة الماوس من التخدير ، ضعه في قفص منزلي نظيف أعلى وسادة التدفئة وتأكد من أن القفص المنزلي يحتوي على كرة شاي بمنشفة عديمة الرائحة لبدء التعود. قم بتعيين موقع للناهض في غرفة الاختبار ، ولتجنب المتغيرات المربكة ، افصل الناهضين الذين تم تعيينهم لتلقي محفزات سياقية مختلفة بحد أدنى مترين. باستخدام شرائط مغناطيسية ، قم بتوصيل صفائح جراحية عبر الناهض وإنشاء حاجز مرئي لتقليل تقلبات درجة الحرارة بسبب نشاط الماوس ، استجابة لحركة المجرب.
تحضير كرات الشاي مع السيطرة ومناشف رائحة المفترس. نقل الحيوان إلى غرفة الاختبار المعدة. ضع الحيوان في مكان محدد مسبقا على الناهض وتجنب تغيير موقع الناهض بين إجراءات التعود والاختبار.
قم بإزالة كرة القفص المنزلي من قفص منزل الماوس. استرجع القفص بقطعة قماش أو ورقة جراحية واترك الماوس يتأقلم مع مساحة الاختبار لمدة ساعة إلى ساعتين. بعد اكتمال التأقلم، استخدم الماسحة الضوئية لقياس درجة حرارة خط الأساس للهدف وتسجيلها.
اكشف القفص وضع كرة الشاي على أرضية قفص المنزل. استبدل غطاء القفص وغطاء القماش. ابدأ ساعة الإيقاف وقم بقياس درجات حرارة الأشخاص الخاضعين للاختبار بنفس ترتيب وضع كرة الشاي.
سجل درجات الحرارة ووقت ساعة القياسات ، باتباع النقاط الزمنية المطلوبة. قم بإعداد أجهزة المشي للاختبار ، مما يضمن عمل أجهزة الصدمات. تأكد من أن الحيوانات تستخدم نفس جهاز المشي لإجراءات التعود والاختبار.
انقل الماوس إلى غرفة الاختبار ، واتركه يتأقلم لمدة ساعة إلى ساعتين في قفصه المنزلي. قبل تحريك الماوس إلى جهاز المشي ، قم بقياس وتسجيل درجة حرارة خط الأساس. لسهولة وضعها وإزالتها ، قم بتثبيت مناشف التحكم أو مناشف الرائحة المفترسة بالسقف أو أسفل مقدمة جهاز المشي.
توجيه الماوس في حلقة مفرغة المعينة. قم بتشغيل حزام جهاز المشي والصدمة ، وابدأ تشغيل ساعة الإيقاف ، وقم بإجراء قياسات لموضوعات الاختبار بنفس الترتيب الذي تم إعداده به في أجهزة المشي. سجل درجات الحرارة ووقت الساعة للقياسات ، باتباع النقاط الزمنية المطلوبة.
بمجرد اكتمال الاختبار ، قم بإيقاف تشغيل جهاز الصدمة وجهاز المشي وأعد الماوس إلى قفصه المنزلي. نظف جهاز المشي باستخدام المنظفات السائلة والماء وأزل أي رائحة مفترسة متبقية. أدت تجارب التعود المتكررة إلى انخفاض كبير في درجة حرارة عضلات الفئران ، مما يدل على اعتياد الفئران على بيئة الاختبار والبروتوكول.
أظهر التحليل الجنسي المجمع للتجربة الرابعة عدم وجود فرق كبير بين قياسات درجة الحرارة قبل الحركة وخط الأساس، مما يدل على فعالية التأقلم لمدة ساعة واحدة مع سياق الاختبار. أظهر التحفيز الدوائي باستخدام الأوكسيتوسين في الفئران انخفاضا في درجة حرارة العضلات بالنسبة إلى خط الأساس مع انخفاض أقصى بعد 30 دقيقة. تم تطبيع درجات حرارة العضلات بعد 60 دقيقة من حقن الأوكسيتوسين.
لوحظت زيادة مستمرة في درجة حرارة العضلات في فئران Sprague Dawley ، بعد إزالة رائحة المفترس كمحفزات سياقية. أظهرت فئران Sprague Dawley زيادة قوية في درجة الحرارة استجابة لرائحة النمس ، مقارنة برائحة التحكم. في وجود روائح أخرى مكروهة ، تنتج رائحة النمس وتحافظ على تغيير حراري قوي مقارنة بجميع الظروف الأخرى.
أثناء محاولة هذا الإجراء ، من الأهمية بمكان تعويد الحيوانات على بروتوكول الاختبار وجدولة ساعة إلى ساعتين من التأقلم كل يوم من الاختبار.
