该协议意义重大，因为它提供了一种直接且具有成本效益的方法来测量骨骼肌温度。此外，它可以在各种情况下和在药剂的刺激下使用。该技术的主要优点是可以同时测试的动物数量。
这里描述的最小的动物干扰避免了对红外热成像等高科技方法的需求。个人可能难以测量动物在运动时在家笼内或跑步机上的温度。这可以通过在习惯化试验期间练习测量技术来缓解。
首先在戴手套的手之间加热封闭的应答器，并确保在使用应答器时保持无菌。使用温度扫描仪测量温度，并检查应答器是否读取温度变化。按照手稿中的描述麻醉小鼠后，用手术剪刀在右后肢的皮肤上做一个浅切口。
将预先编程和无盖的无菌应答器的锋利边缘放入切口中，平行于腓肠肌。确保绿色柱塞朝上且可见。继续将应答器涂抹器推入切口，直到不再可见应答器涂抹器的开口。
将涂抹器旋转 180 度，使绿色柱塞朝下朝向小鼠的肢体，实验者不再可见。一旦应答器涂抹器放置在腓肠肌附近或部分封闭在腓肠肌中，推动绿色柱塞，让涂抹器的压力引导研究者的手远离鼠标。使用镊子将打开的皮肤固定在一起。
用无菌自动夹放置伤口夹，如果需要，弯曲。在无菌自动夹之前使用可吸收的缝合线来闭合筋膜层。使用应答器阅读器检查小鼠肌肉的温度。
将鼠标从麻醉中取出后，将其放在加热垫顶部的干净家用笼子中，并确保家用笼子包括一个带有无味毛巾的茶球，以开始习惯。为测试室中的立管分配一个位置，为避免混淆变量，请将设置为接收不同上下文刺激的立管至少分开两米。使用磁条，将手术片贴在立管上，并形成视觉屏障，以最大程度地减少由于小鼠活动引起的温度波动，以响应实验者的运动。
用控制和捕食者气味毛巾准备茶球。将动物转移到准备好的测试室。将动物放在立管上的预先指定位置，并避免在习惯化和测试程序之间改变立管的位置。
从鼠标的笼子中取出主笼球。用布或手术片恢复笼子，让小鼠适应测试空间一到两个小时。适应完成后，使用扫描仪测量并记录受试者的基线温度。
揭开笼子的盖子，把茶球放在笼子的地板上。更换笼盖和布盖。启动秒表，以茶球放置的相同顺序测量测试对象的温度。
按照所需的时间点记录测量的温度和时钟时间。准备跑步机进行测试，确保电击器正常工作。确保动物使用相同的跑步机进行习惯化和测试程序。
将鼠标移到测试室，让它在家笼中适应一到两个小时。在将鼠标移动到跑步机之前，测量并记录其基线温度。为了便于放置和移除，请将控制或捕食者气味毛巾粘在天花板上或跑步机前部下方。
将鼠标引导至指定的跑步机。打开跑步机皮带和电击器，启动秒表，并按照在跑步机中设置的相同顺序对测试对象进行测量。按照所需的时间点记录测量的温度和时钟时间。
测试完成后，关闭电击器和跑步机，然后将鼠标放回其主笼。使用液体清洁剂和水清洁跑步机，并去除任何残留的捕食者气味。重复的习惯化试验显着降低了小鼠的肌肉温度，表明小鼠习惯于测试环境和方案。
试验四的综合性别分析显示，移动前和基线温度测量之间没有显着差异，证明了一小时适应测试环境的有效性。在小鼠中使用催产素的药物刺激显示相对于基线的肌肉温度降低，30分钟后最大下降。注射催产素后60分钟肌肉温度恢复正常。
在去除捕食者气味作为上下文刺激后，在Sprague Dawley大鼠中观察到肌肉温度持续升高。与对照气味相比，Sprague Dawley大鼠对雪貂气味表现出强烈的温度升高。在存在其他厌恶气味的情况下，与所有其他条件相比，雪貂气味产生并保持强烈的产热变化。
在尝试此过程时，使动物习惯于测试方案并安排每天测试一到两个小时的适应环境至关重要。
