استخدام تصوير الخلايا الحية لقياس آثار البروتينات المرضية على النقل المحوري في الخلايا العصبية الحصينية الأولية

تعتمد الخلايا العصبية على النقل ثنائي الاتجاه للبضائع على طول المحور العصبي للحفاظ على المشبك الوظيفي والاتصال العصبي. يعتقد أن العجز في النقل من العوامل الحاسمة في التسبب في العديد من الأمراض التنكسية العصبية. نحن نهدف إلى تحديد الآليات التي تؤدي بها التعديلات المرتبطة بالمرض على بروتين تاو إلى تعطيل نقل المحور العصبي.

لقد أثبتنا أن الأشكال المرضية المتعددة لبروتين تاو تعطل النقل المحوري الطبيعي في الخلايا العصبية للثدييات. يعتمد هذا التأثير على التغييرات في مسارات الإشارات القائمة على الفسفرة التي تنظم النقل المحوري. تمثل هذه الاضطرابات آلية محتملة للسمية العصبية التي يسببها تاو في المرض.

يمكن للأشكال المعدلة من بروتينات معينة أن تعطل النقل المحوري السريع الطبيعي عبر العديد من الأمراض التنكسية العصبية. ومع ذلك ، فإننا لا نفهم تماما الآليات الأساسية لهذه التأثيرات. يوفر هذا بروتوكولا بسيطا وقابلا للتكرار لتحديد كيفية تأثير التعبير عن البروتينات المرتبطة بالمرض على النقل المحوري السريع في الخلايا العصبية للثدييات.

يوفر هذا البروتوكول مقايسة قابلة للتكرار للنقل المحوري في الخلايا العصبية الأولية للثدييات ، والتي يمكن تعديلها بسهولة لتشمل بروتينات الشحن المختلفة جنبا إلى جنب مع التعبير عن البروتينات ذات الأهمية مع تعديلات مرضية محددة. كما يسمح بالضربة القاضية المستهدفة لمكونات المسار الأخرى لاختبار تفاصيل ميكانيكية معينة.