일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 Live-Cell Imaging 사용

뉴런은 기능적 시냅스와 신경 연결성을 유지하기 위해 축삭돌기를 따라 화물을 양방향으로 운반하는 데 의존합니다. 수송에 있는 결핍은 몇몇 neurodegenerative 질병의 발병에 결정적인 기인이기 위하여 생각됩니다. 우리는 타우 단백질에 대한 질병 관련 변형이 축삭 수송을 방해하는 메커니즘을 규명하는 것을 목표로 합니다.

우리는 여러 병리학적 형태의 타우 단백질이 포유류 뉴런의 정상적인 축삭 수송을 방해한다는 것을 확인했습니다. 이 효과는 축삭 수송을 조절하는 인산화 기반 신호 전달 경로의 변화에 따라 달라집니다. 이러한 혼란은 질병에서 타우 유발 신경 독성의 잠재적 메커니즘을 나타냅니다.

특정 단백질의 변형된 형태는 여러 신경 퇴행성 질환에서 정상적이고 빠른 축삭 수송을 방해할 수 있습니다. 그러나 우리는 이러한 효과의 근본적인 메커니즘을 완전히 이해하지 못합니다. 이는 질병 관련 단백질의 발현이 포유류 뉴런의 빠른 축삭 수송에 어떻게 영향을 미치는지 식별하기 위한 재현 가능하고 간단한 프로토콜을 제공합니다.

이 프로토콜은 포유류 일차 뉴런의 축삭 수송에 대한 재현 가능한 분석을 제공하며, 특정 병리학적 변형이 있는 관심 단백질의 발현과 함께 다양한 화물 단백질을 포함하도록 쉽게 수정할 수 있습니다. 또한 특정 기계론적 세부 사항을 테스트하기 위해 다른 경로 구성 요소의 표적 knockdown을 허용합니다.