توصيف معدلات المستقبلات المنشطة بالبروتياز باستخدام مقايسة تعبئة الكالسيوم باستخدام قارئ الألواح

يعمل مختبرنا على فهم كيف يمكن لتعديل المستقبلات المنشطة للبروتياز أن يمنع الالتهاب. لقد طورنا فئة جديدة من الجزيئات الصغيرة تسمى البارمودولين التي تعدل نشاط PAR1. الهدف هو اكتشاف البارمودولين مع خصائص محسنة للاستخدام المحتمل كمرشحين للأدوية ، وكذلك لفهم طريقة عملهم.

في الدراسات قبل السريرية مع المتعاونين معنا ، قررنا أن البارمودولين قد يكون واعدا بشكل خاص لعلاج الاضطرابات الناجمة عن التهاب الخثار ، بما في ذلك أمراض الكلى والكبد والقلب والأوعية الدموية. وقد تمكن طريقة عملها أيضا من تطوير مركبات ذات مواصفات أمان أفضل من مركبات PAR1 السابقة التي تستهدف الأدوية المرشحة. مستقبلات PAR1 مهمة لتنشيط الصفائح الدموية ، ولكن الإشارات في الخلايا البطانية مهمة أيضا وذات صلة في العديد من الأمراض.

لذلك ، أردنا تطوير بروتوكول رخيص ومريح لاختبار نشاط البارمودولين والخلايا البطانية المستزرعة. نحن هنا لمشاركة بروتوكول محدث يقيس تعبئة الكالسيوم يستخدم قارئ لوحة قياسي ، ولا يتطلب معالج سائل آلي. إنه مناسب لفحص روابط PAR1 في الخلايا البطانية ، ولكن من الناحية النظرية ، يمكن استخدامه لقياس نشاط أي مركبات تؤثر على تعبئة الكالسيوم.