Proteazla Aktive Edilen Reseptörlerin Modülatörlerinin Plaka Okuyucu Kullanılarak Kalsiyum Mobilizasyon Testi ile Karakterize Edilmesi

Laboratuvarımız, proteaz ile aktive edilmiş reseptörlerin modülasyonunun iltihabı nasıl engelleyebileceğini anlamak için çalışıyor. PAR1'in aktivitesini modüle eden parmodulinler adı verilen yeni bir küçük molekül sınıfı geliştirdik. Amaç, ilaç adayları olarak potansiyel kullanım için geliştirilmiş özelliklere sahip parmodulinleri keşfetmek ve ayrıca etki tarzlarını anlamaktır.

İşbirlikçilerimizle yapılan klinik öncesi çalışmalarda, parmodulinlerin böbrek, karaciğer ve kardiyovasküler hastalık dahil olmak üzere tromboinflamasyonun neden olduğu bozuklukların tedavisi için özellikle umut verici olabileceğini belirledik. Etki şekilleri, önceki PAR1 hedefleme ilaç adaylarından daha iyi bir güvenlik profiline sahip bileşiklerin geliştirilmesini de sağlayabilir. PAR1 reseptörü trombositleri aktive etmek için önemlidir, ancak endotel hücrelerindeki sinyalizasyonu da çok sayıda patolojide önemli ve önemlidir.

Bu nedenle, parmodulinlerin ve kültürlenmiş endotel hücrelerinin aktivitesini test etmek için ucuz ve uygun bir protokol geliştirmek istedik. Standart bir plaka okuyucu kullanan ve otomatik bir sıvı işleyici gerektirmeyen kalsiyum mobilizasyonunu ölçen güncellenmiş bir protokolü paylaşmak için buradayız. Endotel hücrelerinde PAR1 ligandlarını taramak için uygundur, ancak teorik olarak, kalsiyum mobilizasyonunu etkileyen herhangi bir bileşiğin aktivitesini ölçmek için kullanılabilir.